User Guide: PhotoSpray Ion Source Operator Guide (IT)

User Guide: PhotoSpray Ion Source Operator Guide (IT)

Sorgente di ionizzazione PhotoSpray

®

Guida per l'Operatore

RUO-IDV-05-1461-IT-A Giugno 2014

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Sorgente di ionizzazione

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Contenuto

Capitolo 1 Panoramica della sorgente di ionizzazione.......................................................................5

Documentazione correlata..........................................................................................................................................5

Assistenza Tecnica......................................................................................................................................................6

Componenti della sorgente ionica...............................................................................................................................6

Collegamenti Elettricità e Gas...............................................................................................................................7

Linea di erogazione dell'agente dopante e tubo del campione.............................................................................7

Sonda APCI...........................................................................................................................................................8

Lampada UV.........................................................................................................................................................9

Circuito di sensing della sorgente di ionizzazione...............................................................................................10

Sistema di Scarico della Sorgente.......................................................................................................................11

Capitolo 2 Installazione della Sorgente di ionizzazione..................................................................12

Collegamenti del gas necessari.................................................................................................................................12

Preparazione per l'Installazione................................................................................................................................13

Installare la sonda.....................................................................................................................................................13

Installare i collegamenti della sorgente di ionizzazione............................................................................................15

Installare la Sorgente di ionizzazione sullo Spettrometro di Massa..........................................................................16

Capitolo 3 Ottimizzazione della Sorgente di ionizzazione..............................................................18

Introduzione del Campione.......................................................................................................................................18

Metodo...............................................................................................................................................................18

Velocità di Flusso................................................................................................................................................18

Requisiti per il Sistema di Introduzione del Campione........................................................................................18

Ottimizzazione della sonda APCI..............................................................................................................................19

Eseguire il Metodo..............................................................................................................................................19

Impostare le Condizioni Iniziali...........................................................................................................................20

Ottimizzazione di Gas 1, Gas 2, e del flusso di Curtain Gas ...............................................................................20

Regolare la Posizione dell'Ago di Scarica Corona...............................................................................................20

Ottimizzare la Posizione della Sonda APCI..........................................................................................................21

Regolazione della Lampada UV..........................................................................................................................22

Suggerimenti per l'Ottimizzazione......................................................................................................................23

Capitolo 4 Manutenzione della Sorgente di ionizzazione...............................................................25

Rimuovere la Sorgente di ionizzazione......................................................................................................................26

Rimuovere la Sonda..................................................................................................................................................27

Pulire l'Elettrodo Tubolare........................................................................................................................................28

Montaggio dei componenti della Sonda...................................................................................................................29

Regolare l'Estensione della Punta dell'Elettrodo.......................................................................................................30

Pulire la finestrella ottica UV.....................................................................................................................................31

Sostituzione della Lampadina della Lampada UV.....................................................................................................33

Capitolo 5 Suggerimenti per la risoluzione dei problemi................................................................35

Appendice A Principi di funzionamento-Sorgente di ionizzazione.................................................37

Processo di Ionizzazione...........................................................................................................................................37

Selezione dell'agente dopante..................................................................................................................................37

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Contenuto

Composizione dell'eluente e dei modificatori...........................................................................................................38

Eluente................................................................................................................................................................39

Modificatori........................................................................................................................................................39

Zona di ionizzazione.................................................................................................................................................39

Produzione di fotoioni.........................................................................................................................................40

Percorso dei fotoioni...........................................................................................................................................41

Descrizione del Sistema di Introduzione del Campione.......................................................................................41

Appendice B Elenco Materiali di Consumo e Parti di Ricambio.......................................................42

Appendice C Parametri e Voltaggi della Sorgente...........................................................................43

Parametri Sonda APCI...............................................................................................................................................43

Descrizione Parametri...............................................................................................................................................44

Composizione dei solventi........................................................................................................................................45

Composizione dell'agente dopante e velocità di flusso.............................................................................................46

Cronologia delle revisioni...................................................................................................................47

Sorgente di ionizzazione

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Panoramica della sorgente di ionizzazione

1

La fotoionizzazione a pressione atmosferica offre un metodo alternativo di introduzione dei campioni nello spettometro di massa. Il sorgente di ionizzazione PhotoSpray ® , molto simile alle sorgenti di ionizzazione standard APCI (ionizzazione chimica a pressione atmosferica) e Ionspray

, genera ioni che rappresentano la composizione molecolare del campione.

Da un punto di vista delle applicazioni, questa sorgente di ionizzazione fornisce una versione di APCI più versatile, in grado di garantire maggiore sensibilità se ottimizzata con composti specifici. La sorgente di ionizzazione consente inoltre il rilevamento LC/MS/MS di composti biologici e di composti a bassa polarità importanti dal punto di vista ambientale.

AVVERTENZA! Rischio di Contaminazione da Radiazioni o Esposizione ad

Agenti Tossici Chimici e Biologici: Utilizzare la sorgente di ionizzazione solo se si hanno la conoscenza e l'esperienza necessarie riguardo l'utilizzo, il contenimento e l'evacuazione dei materiali tossici o nocivi utilizzati con la sorgente di ionizzazione. Interrompere l’uso della sorgente di ionizzazione se la finestra risulta crepata o danneggiata e contattare un responsabile dell’assistenza tecnica AB SCIEX. Qualsiasi materiale tossico o nocivo introdotto nell'apparecchiatura sarà presente nella sorgente di ionizzazione e nel sistema di scarico. Smaltire gli oggetti taglienti seguendo le procedure di sicurezza previste dal laboratorio.

AVVERTENZA! Pericolo di Scosse Elettriche: evitare il contatto con le alte tensioni presenti sulla sorgente di ionizzazione durante il funzionamento. Porre il sistema in modalità Standby prima di regolare il tubo del campionatore o altre attrezzature vicino alla sorgente di ionizzazione.

Nota: Per informazioni su normative e sicurezza relative allo spettrometro di massa, fare riferimento alla

Guida per l’utente.

Per informazioni su normative e sicurezza relative allo spettrometro di massa, fare riferimento alla Guida di

sicurezza oppure alla Guida per l’utente del sistema.

Documentazione correlata

Le guide e le esercitazioni per lo spettrometro di massa e il software Analyst

®

sono installate automaticamente con il software e sono disponibili dal menu Start: Tutti i programmi > AB SCIEX > Analyst. La documentazione per la sorgente di ionizzazione è disponibile nel DVD Customer Reference della sorgente stessa. Un elenco completo della documentazione disponibile è riportato nel menu Help. Per visualizzare il menu Help del software, premere F1.

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Panoramica della sorgente di ionizzazione

Assistenza Tecnica

AB SCIEX e i suoi rappresentanti si affidano a uno staff di tecnici di manutenzione e assistenza formati e qualificati, presenti in tutto il mondo. Saranno felici di rispondere a domande sul sistema o su eventuali problemi tecnici che potrebbero sorgere. Per ulteriori informazioni visitare il sito Web all'indirizzo www.absciex.com

.

Componenti della sorgente ionica

Questa sorgente di ionizzazione utilizza un nebulizzatore riscaldato per vaporizzare il campione. Seguendo la vaporizzazione, i costituenti molecolari del campione vengono ionizzati dal processo di fotoionizzazione, indotto da un fascio continuo di onde ultraviolette in presenza di un'agente di drogaggio all'interno del corpo della sorgente di ionizzazione.

Figura 1-1 Sorgente di ionizzazione PhotoSpray

Elemento

1

2

3

4

Descrizione

Tubo del campione sonda APCI

Micrometro della lampada UV utilizzato per impostare la posizione verticale quando si regola la sensibilità della sorgente di ionizzazione

I due fermi che fissano la sorgente di ionizzazione allo spettrometro di massa

Sorgente di ionizzazione

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Panoramica della sorgente di ionizzazione

Elemento

5

6

7

8

9

10

11

12

Descrizione

Cavo della sorgente di ionizzazione da collegare allo spettometro di massa

Modulo di controllo della lampada UV in cui è alloggiata la porta del display di stato della luce a LED e del connettore a 9 pin per il cavo della sorgente di ionizzazione per fornire alimentazione elettrica e comunicazione alla lampada UV

Micrometro della sonda APCI usato per posizionare la sonda sull'asse orizzontale quando si regola la sensibilità della sorgente di ionizzazione

Micrometro della sonda APCI usato per posizionare la sonda sull'asse verticale quando si regola la sensibilità della sorgente di ionizzazione

La piastra dell'alloggiamento della sorgente di ionizzazione che ospita il connettore di alta tensione, il connettore di identità della sorgente di ionizzazione e le porte di collegamento per l'erogazione del gas e dell'alimentazione elettrica della sorgente di ionizzazione

Collegamento alta tensione

Sistema di inserimento dell'agente di drogaggio utilizzato per collegare la linea di erogazione dell'agente dopante

Fascetta fermacavi

Collegamenti Elettricità e Gas

I collegamenti del gas e dell'alta tensione sono forniti attraverso la piastra frontale dell'interfaccia e si connettono internamente attraverso il corpo della sorgente di ionizzazione. Quando la sorgente di ionizzazione

è installata sullo spettrometro di massa, tutti i collegamenti elettrici e del gas sono completati.

I collegamenti logici e dell'alimentazione a bassa tensione aggiuntivi vengono realizzati attraverso il cavo della sorgente di ionizzazione che collega il connettore delle sorgenti D a 25 pin sullo spettometro di massa al connettore D a 9 pin sull'erogazione di alimentazione della luce UV montata sul corpo della sorgente di alimentazione.

Un cavo della sorgente di ionizzazione proveniente dallo spettometro di massa si collega al modulo di controllo lampada UV (ultravioletta)per fornire alimentazione elettrica e comunicazione dallo spettometro di massa alla lampada UV. Gli indicatori a LED (diodo a emissione luminosa) sul modulo di controllo della lampada UV visualizzano lo stato corrente della lampada UV.

Quando la sorgente di ionizzazione è installata sullo spettrometro di massa, la maggior parte dei collegamenti elettrici e del gas è realizzata automaticamente. Fare riferimento a

Figura 1-1 a pagina 6

e

Figura 1-4 a pagina 10

.

Linea di erogazione dell'agente dopante e tubo del campione

Collegare manualmente una linea di erogazione dell'agente dopante al sistema di inserimento dell'agente dopante per introdurre quest'ultimo nel gas del nebulizzatore e collegare manualmente il tubo del campione alla sonda.

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Panoramica della sorgente di ionizzazione

Sonda APCI

La sonda APCI è adatta per:

• Ionizzazione di composti che non formano facilmente ioni in soluzione. Di solito si tratta di composti non polari.

• Creazione di spettri APCI semplici da esperimenti LC/MS/MS.

• Analisi ad alto rendimento di campioni complessi e sporchi. È meno sensibile agli effetti di soppressione ionica.

• Introduzione rapida del campione attraverso iniezione del flusso con o senza colonna LC.

La sonda APCI può accettare l'intero effluente, senza dividerlo, a velocità di flusso che vanno da 50 µl/min a

3000 µl/min (attraverso una colonna ad ampio diametro). Può vaporizzare composti labili e volatili con una decomposizione termica ridotta al minimo. La desolvatazione e la vaporizzazione rapida delle goccioline e dell'analita inglobato minimizzano la decomposizione termica e preservano l'identità molecolare per la ionizzazione, che sarà compiuta dall'ago di scarica a corona. I tamponi sono tollerati senza difficoltà dalla sorgente di ionizzazione, senza che abbia luogo una contaminazione rilevante, e la vaporizzazione tempestiva degli effluenti nebulizzati permette l'uso di acqua fino al 100% senza difficoltà.

La sonda APCI è composta da un tubo di acciaio inossidabile, dal diametro interno di 100 µm (0,004"), circondato da un flusso di gas nebulizzatore. Il flusso del campione liquido viene pompato nel nebulizzatore, dove viene nebulizzato in un tubo di ceramica che contiene un riscaldatore. La parete interna del tubo in ceramica può essere mantenuta ad una temperatura tra 100 °C e 750 °C e viene monitorata dal sensore incorporato nel riscaldatore.

Un getto ad alta velocità di gas di nebulizzazione scorre intorno alla punta dell'elettrodo per disperdere il campione in un aerosol di particelle fini. Si sposta attraverso il riscaldatore di vaporizzazione in ceramica nella zona di reazione della sorgente di ionizzazione e dopo l'ago di scarica a corona dove le molecole del campione

vengono ionizzate al passaggio attraverso il corpo della sorgente di ionizzazione. Fare riferimento a

Principi di funzionamento-Sorgente di ionizzazione a pagina 37

.

Figura 1-2 Componenti della sonda APCI

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Panoramica della sorgente di ionizzazione

Elemento

1

2

3

Descrizione

Dado di regolazione dell'elettrodo (di colore nero) che regola l'estensione della punta dell'elettrodo

Ghiera di fermo in bronzo che fissa la sonda alla torretta sul corpo della sorgente di ionizzazione

Punta dell'elettrodo attraverso il quale i campioni sono nebulizzati nella zona di introduzione del campione della sorgente di ionizzazione

Lampada UV

La lampada di fotoionizzazione al cripton è ubicata all'interno ed è controllata dal modulo di controllo lampada

UV. Questa luce UV ionizza le molecole dell'agente di drogaggio all'interno del flusso del campione in entrata.

Figura 1-3 Lampada UV sorgente di ionizzazione PhotoSpray

Elemento

1

2

3

Descrizione

Supporto della lampada

Modulo di controllo della lampada

Lampada UV

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Panoramica della sorgente di ionizzazione

Figura 1-4 Modulo di controllo lampada e display di stato LED

Elemento

1

LED

Controllo

2

3

4

5

Normale

Accensione

Colore

Rosso

Verde

Giallo

Descrizione

Condizione di guasto. La lampada UV può essere accesa o spenta. Fare

riferimento alla

Suggerimenti per la risoluzione dei problemi a pagina 35

.

Lo spettometro di massa è in modalità

Ready. La lampada UV è accesa.

Lo spettometro di massa è in modalità

Standby. La lampada UV è spenta.

Connettore a 9 pin: I collegamenti logici e dell'alimentazione a bassa tensione aggiuntivi vengono realizzati attraverso il cavo della sorgente di ionizzazione che collega il connettore delle sorgenti D a 25 pin sullo spettometro di massa al connettore D a 9 pin.

Modulo di controllo della lampada

Circuito di sensing della sorgente di ionizzazione

Un circuito con un sensore della sorgente di ionizzazione disabilita l'alimentazione ad alta tensione per lo spettrometro di massa e il sistema di scarico della sorgente se:

• Il corpo della sorgente di ionizzazione non è installato o non è installato correttamente.

• Non è presente alcuna sonda.

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Panoramica della sorgente di ionizzazione

• Lo spettrometro di massa rileva un guasto al sistema del gas.

Sistema di Scarico della Sorgente

AVVERTENZA! Rischio di Contaminazione da Radiazioni o Esposizione ad

Agenti Tossici Chimici e Biologici: Utilizzare la sorgente di ionizzazione solo se si hanno la conoscenza e l'esperienza necessarie riguardo l'utilizzo, il contenimento e l'evacuazione dei materiali tossici o nocivi utilizzati con la sorgente di ionizzazione. Interrompere l’uso della sorgente di ionizzazione se la finestra risulta crepata o danneggiata e contattare un responsabile dell’assistenza tecnica AB SCIEX. Qualsiasi materiale tossico o nocivo introdotto nell'apparecchiatura sarà presente nella sorgente di ionizzazione e nel sistema di scarico. Smaltire gli oggetti taglienti seguendo le procedure di sicurezza previste dal laboratorio.

AVVERTENZA! Pericolo di Contaminazione da Radiazioni o Esposizione ad

Agenti Tossici Chimici e Biologici: Assicurarsi di usare il sistema di scarico della sorgente per rimuovere in tutta sicurezza i vapori di scarico del campione dall'ambiente di laboratorio. Per i requisiti del sistema di scarico della sorgente, fare riferimento alla Guida alla Pianificazione del Sito.

AVVERTENZA! Pericolo di Contaminazione da Radiazioni o Esposizione ad

Agenti Tossici Chimici e Biologici: Collegare il sistema di scarico della sorgente a una cappa aspirante o un impianto di ventilazione che scaricano verso l'esterno, per impedire la diffusione di vapori pericolosi nell'ambiente del laboratorio.

Tutte le sorgenti ioniche producono vapori di solvente e di campione. Questi vapori comportano dei rischi per l'ambiente di laboratorio. Il sistema di scarico della sorgente è progettato per rimuovere in tutta sicurezza e consentire un trattamento adeguato dei vapori del campione e del solvente. Quando la sorgente di ionizzazione

è installata, lo spettrometro di massa non entrerà in funzione finché il sistema di scarico della sorgente non sarà operativo.

Un vacuostato montato nel circuito di scarico della sorgente misura il vuoto nella sorgente. Se il vuoto nella sorgente aumenta oltre il valore prefissato , il sistema entra in modalità “Not Ready”, indicando un guasto allo scarico.

Un sistema di scarico attivo rimuove gli scarichi dalla sorgente di ionizzazione (vapori di solventi, gas campioni) attraverso un raccordo di scarico, senza introdurre rumore chimico. Il raccordo di scarico si collega attraverso una camera di scarico e una pompa di scarico della sorgente a un contenitore per raccolta residui, e da qui a un sistema di ventilazione di scarico fornito dal cliente. Per ulteriori informazioni sui requisiti del sistema di scarico della sorgente, fare riferimento alla Guida alla Pianificazione del Sito.

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Installazione della Sorgente di ionizzazione

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AVVERTENZA! Pericolo di Scosse Elettriche: l'installazione della sorgente di ionizzazione sullo spettrometro di massa deve essere l'ultimo passo di questa procedura. L'alta tensione è presente quando la sorgente di ionizzazione è installata nell'apparecchiatura.

La sorgente di ionizzazione è collegata al corpo dell'interfaccia di vuoto ed è mantenuta in posizione da due fermi. L'interno della sorgente di ionizzazione è visibile attraverso le finestre di vetro temperato

Quando la sorgente di ionizzazione è installata, il software riconosce la sorgente di ionizzazione e ne visualizza l'identificazione.

Nota: Utilizzare sempre una pompa HPLC per l'agente di drogaggio. L'uso di una pompa a siringa ridurrà notevolmente la sensibilità della sorgente di ionizzazione. Nelle versioni precedenti della sorgente di ionizzazione PhotoSpray ® , l'agente di drogaggio veniva introdotto in una linea non pressurizzate, pertanto una pompa a siringa non era sufficiente.

Materiali richiesti

• Gruppo sorgente di ionizzazione (corpo)

• Sonde

• sonda APCI (facoltativa)

• Kit dei materiali di consumo della sorgente di ionizzazione

Collegamenti del gas necessari

Se come gas per il nebulizzatore e per la lampada UV viene utilizzato l'azoto, a differenza dell'aria zero, la sensibilità aumenta. Accertarsi che siano disponibili i seguenti gas:

• Aria di zero pulita

• Azoto UHP (ultra puro)

Controllare i seguenti collegamenti del gas allo spettometro di massa:

• L'erogazione di Curtain Gas

TM

è azoto UHP

• L'erogazione di gas per il sistema di scarico della sorgente è l'aria di zero

• Il Gas 1/Gas 2 è l'azoto UHP

Utilizzando l'azoto UHP per il Gas 1/Gas 2 si garantisce maggiore sensibilità rispetto all'aria di zero.

Fornire i seguenti requisiti di gas per la sorgente di ionizzazione come mostrato in

Tabella 2-1

.

Sorgente di ionizzazione

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Installazione della Sorgente di ionizzazione

Tabella 2-1 Requisiti del Gas

Componente

PhotoSpray

®

convenzionale

Requisito del Gas

12 l/min UHP N

2

Preparazione per l'Installazione

AVVERTENZA! Pericolo di contaminazione da radiazioni, rischio biologico o di esposizione ad agenti chimici tossici: assicurarsi che l'elettrodo protenda oltre l'estremità della sonda, in modo da evitare che i vapori pericolosi fuoriescano dalla sorgente. L'elettrodo non deve essere incassato all'interno della sonda.

AVVERTENZA! Pericolo di Perforazione: fare attenzione quando si maneggia l'elettrodo tubolare. La punta dell'elettrodo tubolare è estremamente acuminata.

Suggerimento! Non gettare via gli imballaggi. Usarli per conservare la sorgente di ionizzazione quando non usata.

• Regolare il dado di regolazione dell'elettrodo (di colore nero) sulla sonda per spostare la punta dell'elettrodo all'interno del tubo.

• Accertarsi che la linea di erogazione di agente di drogaggio e il tubo del campione siano sufficientemente lunghi da consentire alla sorgente di ionizzazione abbastanza gioco per allontanare il corpo della sorgente di ionizzazione completamente collegata dall'alloggiamento dell'interfaccia di vuoto.

• Accertarsi che la punta dell'elettrodo della sonda sia regolata secondo le specifiche. Per garantire stabilità e prestazioni ottimali, la punta dell'elettrodo dovrebbe fuoriuscire per una lunghezza compresa tra 0,5 mm e 1,0 mm dall'estremità della sonda.

Questa distanza influenza la forma del cono di nebulizzazione che, a sua volta, influenza la sensibilità dello

spettometro di massa. Fare riferimento a

Regolare l'Estensione della Punta dell'Elettrodo a pagina

30

.

Installare la sonda

AVVERTENZA! Pericolo di Scosse Elettriche: assicurarsi che la sorgente di ionizzazione sia completamente scollegata dallo spettrometro di massa prima di procedere.

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Sorgente di ionizzazione

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Installazione della Sorgente di ionizzazione

AVVERTENZA! Pericolo di scosse elettriche: installare la sonda nella sorgente di ionizzazione prima di installare la sorgente di ionizzazione sullo spettrometro di massa.

La sorgente di ionizzazione non viene fornita con la sonda già installata. Rimuovere sempre la sorgente di ionizzazione dallo spettrometro di massa prima di cambiare le sonde. Fare riferimento alla

Rimuovere la

Sorgente di ionizzazione a pagina 26

.

Se la sonda non è installata correttamente nella sorgente di ionizzazione, la corrente ad alta tensione non arriverà dallo spettrometro di massa ed il sistema di scarico della sorgente sarà disattivato.

1. Inserire la sonda nella corpo. Fare riferimento alla

Componenti della sorgente ionica a pagina

6

.

2. Spingere delicatamente verso il basso sulla sonda in modo che i contatti si innestino con quelli presenti alla del corpo.

3. Ruotare la ghiera di fermo in ottone sulla sonda, spingerla verso il basso, in modo da agganciarne la filettatura con la filettatura nella e infine serrare la ghiera completamente nella posizione più bassa. Serrare solo manualmente, per evitare di danneggiare i filetti.

Figura 2-1 Collegamento del tubo del campione

Sorgente di ionizzazione

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Installazione della Sorgente di ionizzazione

Elemento

1

2

3

4

Descrizione

Tubo del campione

Dado regolazione elettrodo

Sonda

Ghiera di fermo in bronzo

4. Solo per la sonda APCI, assicurarsi che la punta dell'ago di scarica a corona della sonda punti verso la

fenditura della piastra Curtain. Fare riferimento a

Regolare la Posizione dell'Ago di Scarica Corona a pagina 20

.

5. Avvitare il dado del tubo del campione nell'attacco in cima alla sonda, quindi serrare il dado manualmente.

Installare i collegamenti della sorgente di ionizzazione

Dopo avere installato la sonda, installare i collegamenti restanti della sorgente di ionizzazione.

1. Installare la linea di erogazione agente di drogaggio nel tubo dell'agente di drogaggio.

2. Avvitare il dado del tubo dell'agente di drogaggio nel raccordo di giunzione e serrare manualmente. Fare riferimento a

Figura 2-2

.

Figura 2-2 Linea di erogazione dell'agente di drogaggio

Elemento

1

2

3

Descrizione

Raccordo di giunzione

Dado del tubo dell'agente di drogaggio

Linea di erogazione dell'agente di drogaggio

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Installazione della Sorgente di ionizzazione

Attenzione: Rischio di Danni All'Apparecchiatura: Non scollegare il cavo di alimentazione dalla sorgente di ionizzazione o dallo spettometro di massa durante il funzionamento.

3. Collegare il cavo di alimentazione dal connettore di alimentazione sul pannello I/O dello spettometro di massa al connettore a 9 pin del modulo di controllo luce UV. Inserire entrambe le viti di fermo e serrarle manualmente. Fare riferimento a

Figura 2-3

.

Figura 2-3 Connettore del cavo della sorgente di ionizzazione

Elemento

1

2

3

Descrizione

Cavo della sorgente da collegare allo spettometro di massa

Connettore a 9 pin

Modulo di controllo della lampada

Installare la Sorgente di ionizzazione sullo

Spettrometro di Massa

AVVERTENZA! Pericolo di scosse elettriche: installare la sonda nella sorgente di ionizzazione prima di installare la sorgente di ionizzazione sullo spettrometro di massa.

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Installazione della Sorgente di ionizzazione

Suggerimento! Utilizzare il separatore di vuoto corretto per il sistema per ottenere prestazioni ottimali.

Non utilizzare un separatore di vuoto di un altro sistema. Il numero del modello del sistema è inciso nel separatore di vuoto.

Se la sonda della sorgente di ionizzazione non è installata correttamente, l'alimentazione elettrica ad alta tensione non sarà disponibile.

1. Assicurarsi che i fermi posti sui lati della sorgente di ionizzazione siano diretti verso la posizione ore 12.

Fare riferimento alla

Componenti della sorgente ionica a pagina 6

.

2. Allineare la sorgente di ionizzazione con l'interfaccia di vuoto, assicurandosi che i fermi sulla sorgente di ionizzazione siano allineati agli attacchi dell'interfaccia di vuoto.

3. Premere delicatamente la sorgente di ionizzazione contro l'interfaccia di vuoto e poi ruotare i fermi della sorgente di ionizzazione verso il basso per bloccare la sorgente di ionizzazione in posizione.

Figura 2-4 Installazione della sorgente di ionizzazione

Elemento

1

2

3

Descrizione

Fermi della sorgente

Posizione aperta (ore 12) e chiusa (6:30)

Perno guida (2)

Lo spettrometro di massa riconosce la sorgente di ionizzazione e visualizza l’identificazione della sorgente di ionizzazione nel software Analyst ® .

4. Collegare il tubo dal dispositivo di erogazione del campione fino alla giunzione di messa a terra posta sulla sorgente di ionizzazione .

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Ottimizzazione della Sorgente di ionizzazione

3

AVVERTENZA! Rischio di Contaminazione da Radiazioni o Esposizione ad

Agenti Tossici Chimici e Biologici: Utilizzare la sorgente di ionizzazione solo se si hanno la conoscenza e l'esperienza necessarie riguardo l'utilizzo, il contenimento e l'evacuazione dei materiali tossici o nocivi utilizzati con la sorgente di ionizzazione. Interrompere l’uso della sorgente di ionizzazione se la finestra risulta crepata o danneggiata e contattare un responsabile dell’assistenza tecnica AB SCIEX. Qualsiasi materiale tossico o nocivo introdotto nell'apparecchiatura sarà presente nella sorgente di ionizzazione e nel sistema di scarico. Smaltire gli oggetti taglienti seguendo le procedure di sicurezza previste dal laboratorio.

Ottimizzare la sorgente di ionizzazione ogniqualvolta si modifica l'analita, la velocità di flusso o la composizione della fase mobile.

Diversi parametri possono influenzare le prestazioni della sorgente Ottimizzare le prestazioni mentre si inietta un composto già noto monitorando il segnale dello ione noto. Regolare i parametri del gas, del voltaggio e del micrometro per massimizzare il rapporto segnale/rumore e la stabilità del segnale.

Introduzione del Campione

Metodo

Il flusso di campione liquido viene erogato nella sorgente di ionizzazione tramite una pompa LC o una pompa a siringa. Se erogato da una pompa LC, il campione può essere iniettato direttamente nella fase mobile usando la FIA o mediante infusione con raccordo a T, oppure attraverso una colonna di separazione usando un iniettore con loop o un autocampionatore. Se introdotto tramite una pompa a siringa, il campione è iniettato direttamente nella sorgente di ionizzazione. L'ottimizzazione dell'infusione ha lo scopo di ottimizzare il percorso degli ioni e la selezione dei frammenti MS/MS.

Velocità di Flusso

La velocità di flusso di ogni campione è determinata dal sistema di cromatografia o dal volume del campione disponibile.

Requisiti per il Sistema di Introduzione del Campione

• Usare procedure e pratiche analitiche appropriate per minimizzare i volumi morti esterni. Il sistema di introduzione del campione trasferisce il campione liquido alla sorgente di ionizzazione senza perdite e con un volume morto ridotto al minimo.

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Ottimizzazione della Sorgente di ionizzazione

• Filtrare preventivamente i campioni in modo che i tubi capillari presenti nel sistema di introduzione del campione non siano bloccati da particelle, campioni precipitati o sali.

• Assicurarsi che tutti i collegamenti siano ermetici e stretti allo scopo di prevenire eventuali perdite. Fare attenzione a non stringere eccessivamente.

Ottimizzazione della sonda APCI

AVVERTENZA! Pericolo di contaminazione da radiazioni, rischio biologico o di esposizione ad agenti chimici tossici: assicurarsi che lo spettrometro di massa sia adeguatamente ventilato e che sia fornita una buona ventilazione generale da laboratorio. Un'adeguata ventilazione del laboratorio è necessaria per controllare le emissioni di solventi e campioni e per un funzionamento sicuro dello spettrometro di massa.

Attenzione: Rischio di danni al sistema: se il sistema LC collegato allo spettrometro di massa non è controllato dal software Analyst

®

, non lasciare lo spettrometro non presidiato mentre è in funzione. Il sistema LC può allagare la sorgente di ionizzazione quando lo spettrometro di massa entra in modalità Standby.

Fare riferimento a

Parametri Sonda APCI a pagina 43

.

Attenzione: È più facile ottimizzare il segnale e il rapporto segnale-rumore con analisi mediante iniezioni in flusso o iniezioni in testa alla colonna.

Eseguire il Metodo

1. Avviare il Analyst ® .

2. Nella Barra di Navigazione, alla voce Tune and Calibrate (Sintonizza e calibra), fare doppio clic su

Manual Tuning (Sintonizzazione manuale).

3. Aprire un metodo ottimizzato in precedenza o creare un metodo basato sui composti.

4. Se la sorgente di ionizzazione ha avuto il tempo necessario per raffreddarsi, procedere come segue.

a. Impostare il parametro Temperature (TEM) su 450.

b. Lasciar riscaldare la sorgente di ionizzazione per almeno 30 minuti.

La fase di riscaldamento, della durata di 30 minuti, impedisce ai vapori di solvente di condensarsi nella sonda ancora fredda.

5. Avvio acquisizione.

6. Avviare il flusso del campione e l'iniezione del campione.

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Ottimizzazione della Sorgente di ionizzazione

Impostare le Condizioni Iniziali

1. Sulla scheda Source/Gas (Sorgente/Gas) nel Tune Method Editor (Editor metodo di sintonizzazione), digitare 70 nel campo Ion Source Gas 1 (GS1) (Sorgenti di ionizzazione gas 1 (GS1)).

2. Digitare 20 nel campo Ion Source Gas 2 (GS2).

3. Nel campo Curtain Gas (CUR), digitare il valore appropriato per lo spettrometro di massa.

Tabella 3-1 Valori dei parametri CUR

Spettrometro di Massa

Sistemi 3200, 4000 e 4500

Sistemi 5000 e 5500

Sistemi 6500

Valore iniziale

20

25

30

4. Impostare la Ion Transfer Voltage (Tensione di trasferimento ioni) a 800.

Ottimizzazione di Gas 1, Gas 2, e del flusso di Curtain Gas

TM

1. Regolare i valori del GS2 in incrementi da cinque fino a ottenere il segnale o il rapporto segnale-rumore migliore.

2. Regolare i valori del GS1 in incrementi da cinque fino a ottenere il segnale o il rapporto segnale-rumore migliore.

Nota: Usare il valore maggiore possibile per il CUR in modo da impedire la contaminazione senza compromettere la sensibilità. Non impostare il CUR su valori minori di 20. Ciò contribuisce a evitare la penetrazione del flusso del Curtain Gas, che può generare rumore, a evitare la contaminazione della fenditura e ad aumentare il rapporto segnale-rumore complessivo.

3. Aumentare il CUR fino a quando il segnale inizia a diminuire.

Regolare la Posizione dell'Ago di Scarica Corona

AVVERTENZA! Pericolo di Scosse Elettriche: Seguire questa procedura per evitare il contatto con le alte tensioni presenti sull'ago di scarica a corona, sul separatore di interfaccia e sui riscaldatori.

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Ottimizzazione della Sorgente di ionizzazione

Quando si usa la sonda APCI , assicurarsi che l'ago di scarica corona punti verso la fenditura.

Materiali richiesti

• Cacciavite a taglio isolato

1. Utilizzare un cacciavite a lama piatta isolato per ruotare la vite di regolazione dell’ago di scarica a corona in cima all'ago.

2. Guardare attraverso la finestrella per assicurarsi che la punta dell'ago sia allineata in direzione della fenditura.

3. Salvare il metodo ottimizzato come nuovo metodo.

Ottimizzare la Posizione della Sonda APCI

Assicurarsi che la fenditura della piastra Curtain sia sempre libera da solventi o goccioline di solvente.

La posizione dell'ugello nebulizzatore influenza la sensibilità e la stabilità del segnale. Regolare la sensibilità della sonda esclusivamente con piccoli incrementi. Alle basse velocità di flusso, posizionare la sonda più vicino alla fenditura. Alle velocità di flusso elevate posizionare la sonda lontano della fenditura.

Attenzione: Rischio di Danni All'Apparecchiatura: Prestare attenzione quando si apportano modifiche alla sonda. In alcune combinazioni della posizione della sonda e della lampada UV, potrebbe essere difficile regolare la posizione della sonda a causa della posizione della lampada e viceversa.

Figura 3-1

mostra la posizione della sonda relativamente alla lampada UV e alla fenditura della piastra

Curtain.

Figura 3-1 Posizione della sonda APCI

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Ottimizzazione della Sorgente di ionizzazione

Elemento Descrizione

1

2

3 sonda APCI

Riscaldatore

Deflettore di ioni

4

5

6

7

8

Lampada UV

Zona di ionizzazione

Ioni

Fenditura della piastra Curtain

Piastra Curtain

1. Usare le impostazioni precedenti dei micrometri come posizione iniziale di partenza.

Nota: Per evitare la riduzione delle prestazioni dello spettrometro di massa, non nebulizzare direttamente nella fenditura.

2. Usare la FIA o un’infusione tramite raccordo a T per iniettare il campione ad una velocità di flusso elevata.

3. Monitorare il segnale all'interno del software.

4. Utilizzare il micrometro verticale per regolare la sonda in piccoli incrementi, per ottenere il segnale o il rapporto segnale-rumore migliore.

Una volta che la sonda è stata ottimizzata, richiederà solo alcune piccole regolazioni. Se si rimuove la sonda, o se cambiano l'analita, la velocità di flusso o la composizione del solvente, ripetere la procedura di ottimizzazione dopo l'installazione.

5. Regolare il dado di regolazione dell'elettrodo (di colore nero) sulla sonda per inserire o estrarre l'elettrodo tubolare dalla sonda. Per garantire stabilità e prestazioni ottimali, la punta dell'elettrodo dovrebbe fuoriuscire

per una lunghezza compresa tra 0,5 mm e 1,0 mm dall'estremità della sonda. Fare riferimento a

Regolare l'Estensione della Punta dell'Elettrodo a pagina 30

.

Regolazione della Lampada UV

La posizione della lampada UV in relazione alla fenditura della piastra Curtain influisce sulla sensibilità e sulla stabilità del segnale. Regolare sempre la lampada UV a piccoli incrementi.

Per ottimizzare le impostazioni della sorgente di ionizzazione per un componente specifico, provare varie altezze della lampada UV e ottimizzare la tensione di trasferimento ioni su ciascuna nuova impostazione dell'altezza per individuare la migliore impostazione per l'altezza della lampada UV e per la tensione di trasferimento ioni.

La regolazione della lampada UV dipende dal composto. Ripetere questa procedura di ottimizzazione ogniqualvolta si modifica l'analita, la velocità di flusso o la composizione della fase mobile.

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Ottimizzazione della Sorgente di ionizzazione

Nota: La tensione ottimale di trasferimento ioni dipende dall'altezza della lampada UV. Vi è solo una tensione ottimale di trasferimento ioni per un'altezza impostata della lampada UV e solo un'altezza ottimale della lampada UV per una tensione specifica di trasferimento ioni. Se l'utente modifica l'altezza della lampada

UV, ottimizzare la tensione di trasferimento ioni su ciascuna nuova impostazione dell'altezza per individuare la migliore impostazione per l'altezza della lampada UV e per la tensione di trasferimento ioni.

Attenzione: Rischio di Danni All'Apparecchiatura: Prestare attenzione quando si apportano modifiche alla lampada UV. In alcune combinazioni della posizione della sonda e della lampada UV, potrebbe essere difficile regolare la posizione della sonda a causa della posizione della lampada e viceversa.

• Utilizzare il micrometro verticale della lampada UV per regolare la posizione verticale e ottenere il segnale o il rapporto segnale-rumore migliore.

Una volta che la sonda è stata ottimizzata, richiederà solo alcune piccole regolazioni. Se si rimuove la sonda, o se cambiano l'analita, la velocità di flusso o la composizione del solvente, ripetere la procedura di ottimizzazione dopo l'installazione.

Suggerimenti per l'Ottimizzazione

• L'APPI risponde meglio alle velocità di flusso più basse, solitamente molto più basse rispetto a quelle utilizzate dall'ESI (Electrospray Ionization), pertanto il lavoro di esplorazione iniziale e l'ottimizzazione deve iniziare con velocità di flusso basse. Il flusso nella parte anteriore della lampada UV, attraverso la zona di ionizzazione, corrisponde alla somma della fase mobile e dell'agente di drogaggio, il cui totale deve essere, idealmente, inferiore a 0,5 mL/min. È possibile utilizzare velocità di flusso più alte, ma ciò potrebbe compromettere l'intensità di picco dell'analita man mano che la velocità di flusso aumenta.

• Quando l'utente ottimizza le tensioni dello spettometro di massa, i valori sono di solito significativamente più bassi rispetto a quelli utilizzati con l'ESI. Ad esempio, la tensione di trasferimento ioni (IS ) deve rimanere intorno a 700 V - 800 V.

• GS1 e GS2 si ottimizzano solitamente a valori bassi. Non utilizzare mai la sorgente APPI con GS2 impostato su zero. GS2 agisce come gas della lampada UV per proteggere la finestrella ottica UV dalla contaminazione, pertanto la durata utile della lampada UV risulterà ridotta se vengono utilizzati metodi con GS2 impostato su zero.

• Una migliore risposta si nota quando la velocità di flusso dell'agente di drogaggio è impostato su una percentuale alta della velocità di flusso in fase mobile (solitamente compresa tra il 50% e il 100% della velocità di flusso in fase mobile. Ad esempio, una velocità di flusso in fase mobile di 0,2mL/min funzionerebbe al meglio con una velocità di flusso dell'agente di drogaggio nell'intervallo compreso tra 0,1 mL/min e 0,2 mL/min.).

• I modificatori in fase mobile non sono necessari per favorire la ionizzazione poiché sono nell'ESI. Tuttavia, se sono richiesti modificatori per migliorare la cromatografia, questi possono essere comunque necessari.

Utilizzare l'erogazione del gas della lampada UV e di Curtain Gas

TM

per modificare la concentrazione di vapori di solvente e reagente nella zona di ionizzazione immediata

Selezione dell'agente dopante a pagina 37

.

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Ottimizzazione della Sorgente di ionizzazione

Flusso Curtain Gas

Quando si aziona la sorgente di ionizzazione, impostare il flusso di Curtain Gas

TM

su un valore più alto possibile, un numero sotto il punto in cui l'intensità degli ioni comincia a diminuire. Ciò contribuisce a evitare la contaminazione della fenditura e ad aumentare il rapporto segnale-rumore complessivo.

Per alcuni composti difficili da ionizzare, l'intensità del segnale si sintonizza con le impostazioni di Curtain

Gas, garantendo spesso il massimo alle impostazioni comprese tra 45 e 50. È molto importante sintonizzare il flusso di Curtain Gas quando si esegue l'ottimizzazione per la più alta sensibilità possibile.

Controllo temperatura

Quando si utilizza la sorgente di ionizzazione, impostare la temperatura sul valore più basso che consente la vaporizzazione completa del campione.

Più alta è la velocità di flusso del liquido o più alta è la composizione acquosa del solvente, più alta sarà la temperatura del riscaldatore richiesta per vaporizzare l'analita. Tuttavia, una temperatura eccessivamente alta può causare la degradazione termica del composto e provocare un elevato rumore di fondo chimico.

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Manutenzione della Sorgente di ionizzazione

4

Le seguenti avvertenze riguardano tutte le procedure di manutenzione del presente capitolo.

AVVERTENZA! Pericolo di Superfici calde: lasciar raffreddare la sorgente di ionizzazione per almeno 30 minuti prima di iniziare qualsiasi procedura di manutenzione. Le superfici della sorgente di ionizzazione e i componenti dell’interfaccia di vuoto raggiungono temperature considerevoli durante il funzionamento.

AVVERTENZA! Pericolo di incendio e di esposizione ad agenti chimici tossici: tenere i solventi infiammabili lontano da fiamme e scintille e usarli solo sotto una cappa aspirante per fumi chimici o negli armadi di sicurezza.

AVVERTENZA! Pericolo di esposizione ad agenti chimici tossici: indossare i dispositivi di protezione individuale, compreso il camice da laboratorio, guanti e occhiali di sicurezza per evitare l'esposizione degli occhi o della pelle a solventi.

AVVERTENZA! Pericolo di contaminazione da radiazioni, rischio biologico o di esposizione ad agenti chimici tossici: in caso di fuoriuscita di prodotti chimici, consultare le istruzioni contenute nelle Schede di Sicurezza dei materiali. Arrestare la fuoriuscita o la perdita solo se ciò può essere fatto in sicurezza. Usare i dispositivi di protezione individuale appropriati e panni assorbenti per contenere la fuoriuscita e smaltirla secondo le normative locali.

AVVERTENZA! Pericolo di Scosse Elettriche: evitare il contatto con le alte tensioni presenti sulla sorgente di ionizzazione durante il funzionamento. Porre il sistema in modalità Standby prima di regolare il tubo del campionatore o altre attrezzature vicino alla sorgente di ionizzazione.

Questa sezione descrive le procedure di manutenzione generale della sorgente di ionizzazione. Per determinare la frequenza delle operazioni di pulizia della sorgente di ionizzazione o della manutenzione preventiva, tenere in considerazione quanto segue:

• Composti testati

• Pulizia dei metodi di preparazione

• Periodo di inattività di una sonda contenente un campione

• Tempo di attività generale del sistema

Questi fattori possono causare dei cambiamenti nelle prestazioni della sorgente di ionizzazione, che indicano la necessità di un intervento di manutenzione.

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Manutenzione della Sorgente di ionizzazione

Assicurarsi che la tenuta della sorgente di ionizzazione montata sullo spettrometro di massa sia perfetta, senza alcuna traccia di perdite di gas. Eseguire i controlli di manutenzione generale per essere sicuri del funzionamento sicuro del sistema. Pulire regolarmente i componenti della sorgente di ionizzazione per mantenerla in condizioni ottimali.

Attenzione: Rischio di Danni al Sistema: usare solo il metodo di pulizia raccomandato per evitare di danneggiare l'apparecchiatura.

Materiali richiesti

• Chiave aperta da 1/4"

• chiave esagonale da 9/64" (forma a L, in dotazione)

• chiave esagonale da 5 mm

• chiave esagonale da 2,5 mm

• Cacciavite a croce

• Cacciavite a taglio

• Metanolo per MS

• Acqua deionizzata per HPLC

• Occhiali di sicurezza

• Mascherina e filtro

• Guanti senza polvere (consigliati in neoprene)

• Camice da laboratorio

Rimuovere la Sorgente di ionizzazione

AVVERTENZA! Pericolo di Superfici calde: lasciar raffreddare la sorgente di ionizzazione per almeno 30 minuti prima di iniziare qualsiasi procedura di manutenzione. Le superfici della sorgente di ionizzazione e i componenti dell’interfaccia di vuoto raggiungono temperature considerevoli durante il funzionamento.

Nota: Sistemi Altri 5,3 L/min di azoto scorrono quando lo spettrometro di massa è spento o la sorgente di ionizzazione viene rimossa dal sistema. Per ridurre al minimo il consumo di gas azoto e per mantenere pulito lo spettrometro di massa quando non lo si utilizza, lasciare la sorgente di ionizzazione installata sullo spettrometro di massa e lasciare acceso il sistema.

La sorgente di ionizzazione può essere rimossa facilmente e rapidamente, senza l'uso di attrezzi. Rimuovere sempre la sorgente di ionizzazione dallo spettrometro di massa prima di svolgere qualsiasi attività di manutenzione sulla sorgente di ionizzazione o durante lo scambio delle sonde.

1. Arrestare le scansioni in corso.

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Manutenzione della Sorgente di ionizzazione

2. Arrestare il flusso del campione.

3. Type (Tipo) 0 nel campo Temperature (TEM), se i riscaldatori sono in uso.

4. Scollegare il tubo di campionamento dalla giunzione di messa a terra.

5. Sbloccare la sorgente di ionizzazione girando i due fermi di sicurezza verso la posizione ore 12.

6. Staccare delicatamente la sorgente di ionizzazione dall'interfaccia di vuoto.

7. Posizionare la sorgente di ionizzazione su una superficie pulita e stabile.

Rimuovere la Sonda

Procedure preliminari

Rimuovere la Sorgente di ionizzazione a pagina 26

AVVERTENZA! Pericolo di Superfici calde: lasciar raffreddare la sorgente di ionizzazione per almeno 30 minuti prima di iniziare qualsiasi procedura di manutenzione. Le superfici della sorgente di ionizzazione e i componenti dell’interfaccia di vuoto raggiungono temperature considerevoli durante il funzionamento.

AVVERTENZA! Pericolo di Scosse Elettriche: assicurarsi che la sorgente di ionizzazione sia completamente scollegata dallo spettrometro di massa prima di procedere.

La sonda può essere rimossa facilmente e rapidamente, senza l'uso di attrezzi. Rimuovere sempre la sorgente di ionizzazione dallo spettrometro di massa prima di cambiare le sonde o di svolgere la manutenzione sulle stesse.

1. Svitare il dado del tubo del campione e scollegare il tubo dalla sonda.

2. Svitare la ghiera di fermo in ottone che fissa la sonda al corpo della sorgente di ionizzazione.

3. Estrarre delicatamente la sonda dall'alto del corpo della sorgentedella .

Nota: Non lasciare che la punta della sonda tocchi alcun oggetto quando la si rimuove o la si conserva.

4. Riporre la sonda su una superficie pulita e stabile.

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Manutenzione della Sorgente di ionizzazione

Pulire l'Elettrodo Tubolare

Procedure preliminari

Rimuovere la Sorgente di ionizzazione a pagina 26

Rimuovere la Sonda a pagina 27

AVVERTENZA! Pericolo di Scosse Elettriche: assicurarsi che la sorgente di ionizzazione sia completamente scollegata dallo spettrometro di massa prima di procedere.

AVVERTENZA! Pericolo di Perforazione: fare attenzione quando si maneggia l'elettrodo tubolare. La punta dell'elettrodo tubolare è estremamente acuminata.

AVVERTENZA! Pericolo di Superfici calde: lasciar raffreddare la sorgente di ionizzazione per almeno 30 minuti prima di iniziare qualsiasi procedura di manutenzione. Le superfici della sorgente di ionizzazione e i componenti dell’interfaccia di vuoto raggiungono temperature considerevoli durante il funzionamento.

La sonda contiene un elettrodo tubolare. Pulire l'elettrodo tubolare regolarmente, o quando si nota un calo delle prestazioni.

Questa procedura è applicabile a entrambe le sonde. Seguire questa procedura per rimuovere e pulire l'elettrodo tubolare. Se non si riesce a pulire l'elettrodo tubolare, seguire questa procedura per sostituirlo.

1. Rimuovere il dado di regolazione dell'elettrodo.

2. Tenendo la sonda con la punta rivolta verso il basso in modo che la molla resti all'interno della sonda, estrarre dalla sonda la giunzione in PEEK e l’elettrodo tubolare collegato.

Figura 4-1 Sonda, Vista esplosa

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Manutenzione della Sorgente di ionizzazione

4

5

6

7

8

Elemento

1

2

3

Descrizione

Dado regolazione elettrodo

Dado di regolazione da 1/4"

Molla

Ghiera di fermo in bronzo

Nebulizzatore tubolare

Punta dell’elettrodo

Elettrodo tubolare

Raccordo in PEEK

3. Usare la chiave aperta da 1/4" per rimuovere il dado di fissaggio che mantiene l'elettrodo tubolare nel raccordo in PEEK.

4. Rimuovere l'elettrodo tubolare dal dado di fissaggio.

5. Pulire l’elettrodo tubolare con una soluzione di acqua e metanolo (1:1): immergere il tubo in un bagno a ultrasuoni.

Montaggio dei componenti della Sonda

AVVERTENZA! Pericolo di Perforazione: fare attenzione quando si maneggia l'elettrodo tubolare. La punta dell'elettrodo tubolare è estremamente acuminata.

Dopo avere pulito l'elettrodo tubolare oppure dopo averlo sostituito con un ricambio nuovo, montare i componenti della sonda.

1. Assicurarsi che la molla sia ancora all'interno della sonda e poi serrare il dado di fissaggio dell'elettrodo.

2. Allineare l'elettrodo tubolare con l'apertura presente nel tubo del nebulizzatore e inserire nella sonda la giunzione in PEEK e l'elettrodo tubolare ad essa collegato. Fare attenzione a non piegare l'elettrodo tubolare.

3. Inserire la sonda nel corpo sorgente della torretta, evitando che la punta della sonda entri in contatto con qualsiasi componente del corpo della sorgente di ionizzazione.

4. Premere verso il basso la ghiera di fermo in ottone per agganciare la filettatura con la filettatura posta sul corpo della sorgente di ionizzazione e poi serrare la ghiera.

5. Inserire un pezzo di tubo rosso in PEEK lungo 30 cm nel dado del tubo di campionamento.

6. Inserire il dado del tubo del campione nell'attacco in cima alla sonda e quindi serrare il dado senza forzare eccessivamente.

7. Installare la sorgente di ionizzazione sullo spettrometro di massa. Fare riferimento alla

Installazione della Sorgente di ionizzazione a pagina 12

.

8. Regolare l’estensione della punta dell’elettrodo. Fare riferimento a

Regolare l'Estensione della Punta dell'Elettrodo a pagina 30

.

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Manutenzione della Sorgente di ionizzazione

Regolare l'Estensione della Punta dell'Elettrodo

AVVERTENZA! Pericolo di contaminazione da radiazioni, rischio biologico o di esposizione ad agenti chimici tossici: assicurarsi che l'elettrodo protenda oltre l'estremità della sonda, in modo da evitare che i vapori pericolosi fuoriescano dalla sorgente. L'elettrodo non deve essere incassato all'interno della sonda.

AVVERTENZA! Pericolo di Perforazione: fare attenzione quando si maneggia l'elettrodo tubolare. La punta dell'elettrodo tubolare è estremamente acuminata.

Regolare l'Estensione della Punta dell'Elettrodo per prestazioni migliori. La configurazione ottimale varia secondo il composto. La distanza di estensione della punta dell'elettrodo influisce sulla forma del cono di nebulizzazione e la forma di tale cono influisce sulla sensibilità dello spettrometro di massa.

• Regolare il dado di regolazione dell'elettrodo (di colore nero) in cima alla sonda per estendere o ritirare la punta dell'elettrodo. La punta dell'elettrodo dovrebbe fuoriuscire per una lunghezza compresa tra 0,5 mm e 1,0 mm dall'estremità della sonda.

Figura 4-2 Regolazione dell'estensione della punta dell'elettrodo

Elemento

1

2

Descrizione

Sonda

Elettrodo

Sorgente di ionizzazione

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Manutenzione della Sorgente di ionizzazione

Pulire la finestrella ottica UV

Procedure preliminari

Rimuovere la Sorgente di ionizzazione a pagina 26

Utilizzare la seguente procedura per pulire la finestrella ottica UV se contaminata.

AVVERTENZA! Pericolo di Scosse Elettriche: rimuovere la sorgente di ionizzazione dallo spettrometro di massa prima di iniziare questa procedura. Seguire tutte le norme di sicurezza relative ai lavori in presenza di elettricità.

AVVERTENZA! Pericolo di Superfici calde: lasciar raffreddare la sorgente di ionizzazione per almeno 30 minuti prima di iniziare qualsiasi procedura di manutenzione. Le superfici della sorgente di ionizzazione e i componenti dell’interfaccia di vuoto raggiungono temperature considerevoli durante il funzionamento.

AVVERTENZA! Pericolo di esposizione ad agenti chimici tossici: indossare i dispositivi di protezione individuale, compreso il camice da laboratorio, guanti e occhiali di sicurezza per evitare l'esposizione degli occhi o della pelle a solventi.

AVVERTENZA! Pericolo di contaminazione da radiazioni, rischio biologico o di esposizione ad agenti chimici tossici: in caso di fuoriuscita di prodotti chimici, consultare le istruzioni contenute nelle Schede di Sicurezza dei materiali. Arrestare la fuoriuscita o la perdita solo se ciò può essere fatto in sicurezza. Usare i dispositivi di protezione individuale appropriati e panni assorbenti per contenere la fuoriuscita e smaltirla secondo le normative locali.

Attenzione: Rischio di Danni All'Apparecchiatura: Quando si manipola una nuova lampada UV, utilizzare guanti privi di polvere. Le impronte digitali, in condizioni di temperatura elevata e forte intensità UV derivanti dal funzionamento della lampada

UV, formano composti corrosivi che incidono la superficie della lampada UV e possono causarne la rottura all'accensione. Quando si manipola la lampada UV, tenere la finestrella ottica UV asciutta e proteggerla da eventuali abrasioni.

1. Rimuovere entrambe le viti di fermo, quindi scollegare il cavo della sorgente dal connettore a 9 pin sul modulo di controllo lampada UV. Fare riferimento a

Figura 4-3

.

2. Rimuovere i due bulloni a testa esagonale da 4 mm.

3. Rimuovere il gruppo modulo di controllo lampada UV dalla sorgente di ionizzazione.

4. Spingere e girare il portalampada UV, quindi rimuoverlo dalla sorgente di ionizzazione.

5. Rimuovere la lampadina della lampada UV dalla sorgente di ionizzazione.

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Manutenzione della Sorgente di ionizzazione

Figura 4-3 Lampada UV: componenti

Elemento

1

2

3

4

5

6

7

Descrizione

Cavo della sorgente da collegare allo spettometro di massa

Viti da 4 mm

Modulo di controllo della lampada

Molla di compressione

Lampada UV

Supporto della lampada

Finestrella ottica UV

6. Utilizzando dei panni antipelo o dei tamponi in schiuma, pulire la finestrella ottica UV con una miscela metanolo/acqua 1:1.

7. Quando la finestrella ottica UV è pulita, riposizionare la lampada UV nella sorgente di ionizzazione.

8. Avvitare il portalampada UV nella sorgente di ionizzazione per fissare la lampadina della lampada UV.

9. Riposizionare i due bulloni a testa esagonale da 4 mm.

10.Installare il gruppo modulo di controllo lampada UV sulla sorgente di ionizzazione.

11.Collegare il cavo della sorgente al connettore a 9 pin sul modulo di controllo lampada UV.

12.Inserire entrambe le viti di fermo e serrarle manualmente.

13.Installare la sorgente di ionizzazione sullo spettrometro di massa. Fare riferimento alla

Installazione della Sorgente di ionizzazione a pagina 12

.

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Manutenzione della Sorgente di ionizzazione

Sostituzione della Lampadina della Lampada UV

Procedure preliminari

Rimuovere la Sorgente di ionizzazione a pagina 26

La lampadina della lampada UV deve essere sostituita dopo alcuni mesi di funzionamento continuo. Sostituire la lampadina se non si accende quando l'utente inizializza la sorgente di ionizzazione. Per informazioni sulla

risoluzione dei problemi relativi alla lampada UV, fare riferimento a

Suggerimenti per la risoluzione dei problemi a pagina 35

.

AVVERTENZA! Pericolo di Scosse Elettriche: rimuovere la sorgente di ionizzazione dallo spettrometro di massa prima di iniziare questa procedura. Seguire tutte le norme di sicurezza relative ai lavori in presenza di elettricità.

AVVERTENZA! Pericolo di Superfici calde: lasciar raffreddare la sorgente di ionizzazione per almeno 30 minuti prima di iniziare qualsiasi procedura di manutenzione. Le superfici della sorgente di ionizzazione e i componenti dell’interfaccia di vuoto raggiungono temperature considerevoli durante il funzionamento.

Attenzione: Rischio di Danni All'Apparecchiatura: Quando si manipola una nuova lampada UV, utilizzare guanti privi di polvere. Le impronte digitali, in condizioni di temperatura elevata e forte intensità UV derivanti dal funzionamento della lampada

UV, formano composti corrosivi che incidono la superficie della lampada UV e possono causarne la rottura all'accensione. Quando si manipola la lampada UV, tenere la finestrella ottica UV asciutta e proteggerla da eventuali abrasioni.

1. Rimuovere entrambe le viti di fermo, quindi scollegare il cavo della sorgente dal connettore a 9 pin sul modulo di controllo lampada UV. Fare riferimento a

Figura 4-3 a pagina 32

.

2. Rimuovere i due bulloni a testa esagonale da 4 mm.

3. Rimuovere il gruppo modulo di controllo lampada UV dalla sorgente di ionizzazione.

4. Spingere e girare il portalampada UV, quindi rimuoverlo dalla sorgente di ionizzazione.

Nota: Manipolare la lampadina UV con cautela per evitare di romperla.

5. Sostituire la lampada UV.

6. Avvitare il portalampada UV nella sorgente di ionizzazione per fissare la lampadina della lampada UV.

7. Riposizionare i due bulloni a testa esagonale da 4 mm.

8. Installare il gruppo modulo di controllo lampada UV sulla sorgente di ionizzazione.

9. Collegare il cavo della sorgente al connettore a 9 pin sul modulo di controllo lampada UV.

10.Inserire entrambe le viti di fermo e serrarle manualmente.

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Sorgente di ionizzazione

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Manutenzione della Sorgente di ionizzazione

11.Installare la sorgente di ionizzazione sullo spettrometro di massa. Fare riferimento alla

Installazione della Sorgente di ionizzazione a pagina 12

.

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Suggerimenti per la risoluzione dei problemi

5

Problema

La lampada UV è in modalità di

Controllo.

La lampada UV è in modalità

Accensione per più di 5 secondo dopo la predisposizione dello strumento.

Probabile causa

Corto circuito nella lampada UV o

PCB.

Azioni da intraprendere

Accertarsi che la linguetta PCB sia collegata correttamente alla molla o alla rondella della lampada UV.

Sostituire la lampada UV. Fare

riferimento alla

Sostituzione della Lampadina della

Lampada UV a pagina 33

. Se non è possibile risolvere il problema, contattare un

Responsabile dell'Assistenza Clienti

(FSE).

Unità modulo di controllo della lampada UV difettosa.

Il segnale di controllo è assente. Un cavo della sorgente potrebbe essere difettoso.

Verificare che il cavo della sorgente sia collegato correttamente. In tal caso, riposizionarlo.

Lo spettometro di massa non è pronto.

Sostituire l'unità modulo di controllo lampada UV o contattare un Responsabile dell'Assistenza

Clienti (FSE).

Un fermo potrebbe essere danneggiato.

Controllare che lo spettometro di massa sia pronto. Riavviare il software Analyst ® .

Risolvere la condizione di danneggiamento dell'interbloccaggio. Fare

riferimento alla

Circuito di sensing della sorgente di ionizzazione a pagina 10

.

È presente un contatto elettrico improprio nel corpo della lampada

UV.

Rimuovere la lampada UV.

Verificare l'eventuale presenza di corrosione sulla sede della lampada

UV o sull'elettrodo superiore della lampada UV. Collegare i collegamenti elettrici sulla lampada

UV. Reinstallare la lampada UV.

Fare riferimento alla

Sostituzione della Lampadina della

Lampada UV a pagina 33

.

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Suggerimenti per la risoluzione dei problemi

Problema

La lampada è in modalità Ready, ma il segnale è assente (linea piatta).

Più di una luce lampeggiante.

Il segnale è basso.

Probabile causa

Non vi è alcuna lampada UV nel modulo di controllo lampada UV.

Lampada UV non funzionante.

L'unità modulo di controllo della lampada UV è difettosa.

La tensione di trasferimento ioni è impostata su un valore inferiore a

500 V (nel valore assoluto).

Azioni da intraprendere

Inserire una lampada UV nel modulo di controllo lampada UV.

Sostituire la lampada UV.

Sostituire l'unità di controllo o contattare un Responsabile dell'Assistenza Clienti (FSE).

Impostare Ion Transfer Voltage

(Tensione di trasferimento ioni) (IS) a un valore maggiore di 500 V (in valore assoluto).

La finestrella ottica UV potrebbe essere sporca.

La lampadina della lampada UV potrebbe essere difettosa.

La lampada UV della sorgente di ionizzazione non è posizionata correttamente.

Pulire la finestrella ottica UV. Fare

riferimento alla

Pulire la finestrella ottica UV a pagina

31

.

Sostituire la lampada UV. Sostituire il modulo di controllo della lampada

UV. Fare riferimento alla

Sostituzione della Lampadina della Lampada UV a pagina

33

.

Sostituire il modulo di controllo della lampada UV.

Il modulo di controllo della lampada UV potrebbe essere difettoso.

Il sistema di erogazione agente dopante potrebbe essere difettoso.

Verificare il flusso dell'agente dopante erogato al sistema dopante a T di quest'ultimo.

Il Declustering Potential non è ottimizzato.

Ottimizzare il declustering per ottenere il miglior segnale o rapporto segnale/rumore. I valori ottimali potrebbero differire da quelli trovati utilizzando altre sorgenti ioniche.

Ottimizzare la posizione verticale della lampada UV.

L'elettrodo del nebulizzatore potrebbe essere sporco od ostruito.

Pulire l'elettrodo. Fare riferimento

alla

Rimuovere la Sonda a pagina 27

.

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Principi di funzionamento-Sorgente di ionizzazione

A

Processo di Ionizzazione

I motivi delle incompatibilità di LC riscontrate in passato con la spettrometria di massa derivano dalle difficoltà nel convertire molecole relativamente non volatili (solvatate in un liquido) in un gas molecolare senza indurre una decomposizione eccessiva. La ionizzazione Electrospray e APCI sono due metodi comuni di ionizzazione morbida.

La sorgente di ionizzazione PhotoSpray

®

è un'evoluzione della tecnica APCI. Una lampada UV viene utilizzata per avviare il processo di ionizzazione, in opposizione a una scarica a corona utilizzata nell'APCI.

I campioni introdotti attraverso la sonda di nebulizzazione riscaldata vengono nebulizzati, grazie all'ausilio di un gas di nebulizzazione, nella zona di ionizzazione. All'interno della sonda, le goccioline finemente disperse di campione e di solvente subiscono una vaporizzazione rapida con la decomposizione termica ridotta al minimo.

Anche un agente dopante, solitamente il toluene, viene vaporizzato nel gas di nebulizzazione all'interno della camera della sorgente. Quando la miscela vaporizzata entra nella zona di ionizzazione, la radiazione UV proveniente dalla lampada ionizza le molecole dell'agente dopante. Il campione gassoso e gli ioni molecolari del solvente sono attratti dalla zona di ionizzazione a causa della differenza di potenziale tra la sonda e la piastra Curtain. Fare riferimento a

Figura A-2

.

I fotoioni, formatisi in grande quantità dall'agente dopante, avviano una cascata di reazioni ione-molecola che coinvolgono le molecole del solvente. Queste reazioni ione-molecola portano infine alla generazione di analiti ionizzati nella forma [M

+

H]

+

(tramite trasferimento di protoni) o [M]

+

(tramite scambio di carica), a seconda della natura della molecola di analita. In modalità di ione negativo, [M

H]

gli ioni vengono formati tramite astrazione di protoni.

L'elevata velocità di collisione che si verifica alla pressione atmosferica fa sì che la carica presente sul fotoione venga trasferita in modo efficiente all'analita, se i parametri termodinamici sono favorevoli. In generale, nella sorgente di ionizzazione PhotoSpray, le reazioni di trasferimento dei protoni tendono a predominare.

I dati di ionizzazione termodinamici per i composti organici più comuni possono essere ottenuti dal sito Web

NIST all'indirizzo http://webbook.nist.gov/chemistry (gratuito al momento della pubblicazione).

Selezione dell'agente dopante

Attenzione: Rischio di danni al sistema: non usare acetone come dopante. Ha il potenziale di causare il deterioramento del tubo del gas.

La produzione di fotoioni risulta significativamente aumentata aggiungendo un agente dopante al gas di nebulizzazione (rispetto al gas di nebulizzazione senza agente dopante). L'agente dopante ideale viene selezionato in base ai seguenti motivi:

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Principi di funzionamento-Sorgente di ionizzazione

• La relativa capacità di subire la fotoionizzazione a causa della sua energia di ionizzazione favorevole

(appena inferiore all'energia dei fotoioni UV di 10,0 eV). Fare riferimento a

Figura A-1

.

• La facilità con cui può essere vaporizzato di continuo nel flusso del gas di nebulizzazione.

• La relativa disponibilità nel grado di purezza elevata (preferibilmente grado HPLC) e a bassa tossicità.

Figura A-1 Scala dell'energia di ionizzazione

Il toluene (energia di ionizzazione di 8,83 eV) soddisfa tutti i requisiti ed è l'agente dopante preferito per la maggior parte delle applicazioni della sorgente di ionizzazione PhotoSpray

®

. L'energia di ricombinazione relativamente alta e la bassa affinità protonica del toluene fa sì che il fotoione del toluene reagisca in modo favorevole con le specie presenti per trasferimento di carica o per trasferimento di protoni nella zona di ionizzazione.

Composizione dell'eluente e dei modificatori

La composizione della fase eluente è un parametro importante da prendere in considerazione quando si sviluppa un metodo per la sorgente di ionizzazione PhotoSpray

®

. Immediatamente dopo la fotoionizzazione, la reazione dei fotoioni con le molecole di solvente apre un canale di reazione dovuto alla formazione di complessi a carica intermedia. Questi complessi si ridispongono rapidamente e formano complessi di solvente protonato (con il rilascio di molecole di agente dopante deprotonato). Di contro, questi complessi di solvente agiscono da fase intermedia nella ionizzazione dell'analita.

I complessi di solvente sono caratterizzati da un numero di associazioni che riflette la natura e la struttura della molecola di solvente. Ad esempio, tre molecole di solvente sono coinvolte nei complessi protonati formatisi con un metanolo simile a un solvente protico ((CH3OH)3 H

+

·) e due molecole di solvente in complessi protonati da una acetonitrile simile a un solvente aprotico dipolare ((CH3CN)2 H

+

·). La protonazione finale delle molecole di analita si verifica tramite trasferimento di protonico da questi complessi.

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Principi di funzionamento-Sorgente di ionizzazione

Eluente

Per la cromatografia in fase inversa, un eluente contenente metanolo e acqua garantisce la migliore sensibilità per la maggior parte delle specie analitiche. La presenza di acetonitrile nell'eluente tende a ridurre la forza del segnale per alcuni composti.

Durante la cromatografia in fase normale, quando le reazioni di carica-trasferimento predominano, un eluente completamente organico può aumentare significativamente il segnale analitico. Tuttavia, l'uso degli eluenti in fase inversa può anche offrire significativi guadagni in termini di sensibilità. Una miscela di iso-ottano e

2-propanolo funziona bene nella sorgente di ionizzazione PhotoSpray ® . Anche i solventi clorurati come il cloruro di metilene e il cloroformio sono compatibili con la ionizzazione PhotoSpray.

Modificatori

I modificatori come l'acido formico, l'acido acetico, il formiato di ammonio e l'acetato di ammonio, possono essere utilizzati nella sorgente di ionizzazione PhotoSpray ® sebbene, in generale, non aumentino significativamente la produzione di ioni. Le concentrazioni tipiche di formiato di ammonio o di acetato di ammonio sono da 2 mM a 10 mM per gli ioni positivi e da 2 mM a 100 mM per gli ioni negativi. La concentrazione di acidi organici è compresa tra 0,01% e 6,0% per volume.

Vengono utilizzati altri modificatori come la trietilammina, il fosfato di sodio, l'acido trifluoracetico e il sodio dodecil solfato, ad eccezione delle applicazioni specifiche, poiché complicano lo spettro con le loro miscele e i loro complessi ionici. Possono anche sopprimere il segnale ionico dei composti bersaglio

Zona di ionizzazione

Figura A-2

mostra la zona di ionizzazione principale, indicata dal cerchio tratteggiato, nella sorgente di fotoionizzazione. In questa zona, la luce UV viene irradiata perpendicolarmente dall'oblò della lampada attraverso il flusso del gas di nebulizzazione e il flusso dell'eluente vaporizzato.

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Principi di funzionamento-Sorgente di ionizzazione

Figura A-2 Sezione della camera della sorgente di ionizzazione PhotoSpray

Elemento

1

2

3

4

5

6

7

8

Descrizione

sonda APCI

Riscaldatore

Deflettore di ioni

Lampada UV

Zona di ionizzazione

Ioni

Fenditura della piastra Curtain

Piastra Curtain

Produzione di fotoioni

I fotoioni sono prodotti principalmente dalle molecole di agente dopante all'interno della fase gassosa del flusso di gas dinebulizzazione, a seguito dell'esposizione diretta al fascio di fotoni da 10,0 eV emesso dalla lampada al cripton. I fotoioni (che agiscono da ioni primari) reagiscono a loro volta con le molecole di solvente per produrre complessi a carica intermedia. La reazione finale del trasferimento di protoni si verifica tra i complessi di solvente protonato e le molecole del campione e causa la formazione di ioni analitici. Un altro percorso di reazione che porta alla formazione di ioni a elettroni dispari dalle molecole di analita dotate di bassa energia di ionizzazione e bassa affinità protonica coinvolge una reazione diretta di carica-trasferimento dal fotoione.

Le collisioni che si verificano nella zona di ionizzazione garantiscono una distribuzione dell'equilibrio per determinati ioni. Tutta l'energia in eccesso che uno ione può acquistare nel processo di reazione ione-molecola

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Principi di funzionamento-Sorgente di ionizzazione

è termalizzata. La formazione sia degli ioni prodotto sia degli ioni reagenti è governata da condizioni di equilibrio a pressione atmosferica.

Percorso dei fotoioni

Quando gli ioni dell'analita vengono formati nella zona di ionizzazione primaria, vengono forzati verso la fenditura dall'applicazione di un potenziale sfalsato tra il deflettore di ioni PhotoSpray ® e la piastra Curtain dello spettrometro di massa. Il valore ottimale del potenziale sfalsato è solitamente qualche centinaio di volt, in valore assoluto, superiore a quello della piastra Curtain (500 V relativamente alla messa a terra, essendo la polarità la stessa di quella degli ioni analizzati). Ciò è determinato sia dalla natura dell'analita sia dalla distanza tra il deflettore di ioni e la piastra Curtain.

La sorgente di ionizzazione genera una corrente totale di ioni inferiore a quella dell'APCI. Tuttavia, questa sorgente di ionizzazione raggiunge un'elevata sensibilità, in parte perché gli ioni formati nella zona di ionizzazione in assenza di campo possono essere trasferiti con efficienza elevata allo spettometro di massa.

Descrizione del Sistema di Introduzione del Campione

La sonda del nebulizzatore è composta da un tubo in acciaio inossidabile con d.e. di 0,012 pollici e da un nebulizzatore circondato da un flusso di gas di nebulizzazione. Il flusso del campione liquido viene pompato attraverso il nebulizzatore, dove viene nebulizzato in un tubo di ceramica dotato di un riscaldatore incorporato.

Quando il campione liquido viene pompato nel tubo di ceramica, il campione e il solvente vengono vaporizzati.

Il vapore passa quindi, attraverso il tubo di ceramica, nella zona di ionizzazione all'interno del corpo della sorgente di ionizzazione.

La temperatura del riscaldatore determina la velocità di vaporizzazione del campione e, di conseguenza, il grado di decomposizione termica nel campione. La temperatura effettiva del campione e del solvente non supera la temperatura di vaporizzazione. In altre parole, non si verifica un sovrariscaldamento significativo del campione liquido. Tuttavia, l'aumento della temperatura incrementa la velocità di vaporizzazione, che potrebbe indurre una decomposizione termica degli ioni del campione.

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Elenco Materiali di Consumo e

Parti di Ricambio

Numero

Particolare (NP)

029031

Descrizione

Molla di compressione (per lampadina della lampada UV)

1008006 Cappello molla (mantiene la lampadina della lampada UV nel corpo della sorgente di ionizzazione)

1002998

1009515

025388

1009095

1005596

Rilevatore di fotoionizzazione (lampadina lampada UV)

Rondella di ottone (per lampadina della lampada UV)

Elettrodo (per sonda APCI)

Gruppo sonda APCI (sonda completa)

Cavo della sorgente

B

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Parametri e Voltaggi della

Sorgente

C

A seconda della sorgente di ionizzazione installata sullo spettrometro di massa, sono disponibili per l'ottimizzazione diversi parametri dipendenti dalla sorgente.

Parametri Sonda APCI

Tabella C-1

mostra le condizioni operative della sorgente di ionizzazione. Queste condizioni rappresentano

un punto a partire dal quale si può ottimizzare la sorgente di ionizzazione. La composizione del solvente usato per l'ottimizzazione era acqua/acetonitrile 1:1. La tabella mostra anche i valori tipici per il potenziale di declustering, presupponendo che il composto utilizzato sia la reserpina. Attraverso un processo iterativo, si possono ottimizzare varie impostazioni usando l'analisi mediante iniezione in flusso per ottenere il rapporto segnale/rumore ottimale per il composto di interesse.

Tabella C-1 Ottimizzazione dei Parametri per la Sonda APCI

Parametro

Lamp vertical micrometer setting

Gas di nebulizzazione (GS1)

Lamp gas (GS2) (Gas lampada)

Valore tipico

5

70*

10*

Curtain Gas (CUR) da 10 a 20

Ion Transfer Voltage (IS) (Tensione di trasferimento ioni IS o ISVF)

1500

Temperature (°C)

Dopant (toluene) (% of total flow)

400

10

5 Sonda impostazione micrometro orizzontale

Sonda impostazione micrometro verticale

2

Gamma di esercizio

da 0 a 8,5 da 20 a 90° da 10 a 40° da 25 a 50 da 600 a 1500 da 350 a 450 da 10 a 15 da 0 a 10 da 0 a 13

* Se come gas per il nebulizzatore e per la lampada UV viene utilizzato l'azoto, a differenza dell'aria zero, la sensibilità aumenta.

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Parametri e Voltaggi della Sorgente

Descrizione Parametri

Parametro

Curtain Gas (CUR)

Descrizione

Controlla il flusso di gas nell'interfaccia del Curtain Gas

TM

interfaccia. L'interfaccia del

Curtain Gas è posizionata tra il separatore di interfaccia e l'orifizio. Impedisce all'aria presente nell'ambiente e alle goccioline di solvente di entrare e contaminare le ottiche ioniche, permettendo allo stesso tempo il convogliamento degli ioni campione nella camera da vuoto tramite i campi elettrici generati tra l'interfaccia di vuoto e l'ago del nebulizzatore. La contaminazione delle ottiche ioniche di ingresso riduce quindi la trasmissione al Q0, la stabilità e la sensibilità, e aumenta inoltre il rumore di fondo.

Mantenere il flusso del Curtain Gas più alto possibile senza perdere la sensibilità.

Ion Transfer Voltage

(IS)

Temperature (TEM)

(Temperatura (TEM))

La tensione ottimale di trasferimento ioni dipende dall'altezza della lampada UV. Vi

è solo una tensione ottimale di trasferimento ioni per un'altezza impostata della lampada UV e solo un'altezza ottimale della lampada UV per una tensione specifica di trasferimento ioni. Se l'utente modifica l'altezza della lampada UV, ottimizzare la tensione di trasferimento ioni su ciascuna nuova impostazione dell'altezza per individuare la migliore impostazione per l'altezza della lampada UV e per la tensione di trasferimento ioni.

Di solito, i valori sono significativamente più bassi rispetto a quelli utilizzati con l'ESI.

Ad esempio, la tensione di trasferimento ioni deve rimanere intorno a 700 V - 800V.

Il calore utilizzato per vaporizzare il campione e il solvente nebulizzato nel corpo della sorgente di ionizzazione. Se la temperatura è impostata su valori troppo bassi, la vaporizzazione del campione risulta incompleta e potrebbe formarsi della condensa di solvente nel corpo. Se la temperatura è impostata su valori troppo alti, si potrebbe verificare degradazione termica del campione.

La temperatura ottimale della sorgente di ionizzazione è influenzata da:

• Il tipo di campione. Il fattore più significativo è la composizione del solvente. La temperatura ottimale della sonda diminuisce quando il contenuto organico del solvente aumenta. Le prestazioni della sonda possono diventare ottimali a meno di 300 °C con solventi composti da metanolo o acetonitrile 100%. I solventi acquosi costituiti da 100% acqua (a un flusso di circa 0,5mL/min) richiedono una temperatura minima della sonda di 425 °C.

• La quantità di campione. La temperatura ottimale aumenta alle velocità di flusso più elevate. La sorgente di ionizzazione è normalmente utilizzata a velocità di flusso del campione di 0,2 ml/min - 0,5 ml/min, ma può essere utilizzata anche con flussi fino a 1,5 ml/min.

Eseguire l'ottimizzazione a incrementi di 25 °C. La temperatura ottimale è l'impostazione più bassa che consente la vaporizzazione completa del campione.

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Parametri e Voltaggi della Sorgente

Parametro Descrizione

Ion Source Gas 1 (Gas sorgente di ionizzazione 1)

Questo gas viene utilizzato per generare una nebulizzazione fine. Ottimizzare l'impostazione del gas per la stabilità e sensibilità del segnale. I valori tipici vanno da

20 psi a 90 psi e dipendono dalla velocità di flusso del campione. In generale, una velocità di flusso più alta richiede un'impostazione Gas 1 più elevata.

Ion Source Gas 2 (Gas sorgente di ionizzazione 2)

Il gas della lampada UV (Gas 2) è utilizzato per proteggere la finestrella ottica della lampada UV. I valori tipici vanno da 10 psi a 40 psi.

Composizione dei solventi

Questa sezione contiene informazioni sui solventi e sui modificatori. La sorgente di ionizzazione è compatibile con le fasi mobili e i tamponi volatili solitamente utilizzati in LC/MS in entrambe le fasi inversa e normale.

La concentrazione standard del formiato d'ammonio o dell'acetato d'ammonio va da 2 mmol/L a 10 mmol/L per gli ioni positivi e da 2 mmol/L a 100 mmol/L per gli ioni negativi. La concentrazione di acidi organici è compresa tra 0,1% e 6,0% per volume.

I solventi in fase normale vengono spesso utilizzati per i composti non polari. I composti polari hanno maggiori possibilità di sciogliersi nei solventi utilizzati per la cromatografia in fase inversa. Le sostanze chimiche seguenti sono comunemente utilizzate come solventi in fase normale:

• Iso-ottano

• Diclorometano

• Cloroformio

I solventi comunemente impiegati sono:

• Acetonitrile

• Metanolo

• Propanolo

• Acqua

Utilizzare i modificatori chimici nel solvente per ottimizzare le condizioni di campionamento. In generale, tuttavia, i modificatori chimici non aiutano nel supporto di fotoionizzazione.

I modificatori comunemente impiegati sono:

• Acido acetico

• Acido formico

• Formiato d'ammonio

• Acetato d'ammonio

I seguenti modificatori non sono di norma impiegati, in quanto complicano lo spettro con le loro miscele ioniche e le combinazioni in cluster. Possono anche sopprimere la forza del segnale ionico del composto bersaglio:

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Parametri e Voltaggi della Sorgente

• Trietilammina (TEA)

• Fosfato di sodio

• Acido trifluoroacetico (TFA)

• Dodecilsolfato di sodio (SLS)

Composizione dell'agente dopante e velocità di flusso

Attenzione: Rischio di danni al sistema: non usare acetone come dopante. Ha il potenziale di causare il deterioramento del tubo del gas.

Il toluene è l'agente dopante più comunemente utilizzato, tuttavia, possono essere utilizzati anche altri composti. Gli agenti dopanti devono essere della più alta qualità possibile, preferibilmente di grado HPLC.

Con agenti dopanti di qualità inferiore si verificano seri problemi con gli ioni di fondo.

In generale, il segnale analitico ottimale è asintomaticamente vicino a una velocità di infusione dell'agente di drogaggio corrispondente al 10% - 15% della velocità di flusso totale della fase mobile (senza separazione).

La velocità di infusione tipica è compresa tra 75 µL/min e 150µL/min. Il valore selezionato durante lo sviluppo del metodo è dettato dalla forza del segnale e dal flusso della fase mobile richiesto.

Nota: Utilizzare sempre una pompa LC per l'agente dopante. L'uso di una pompa a siringa ridurrà notevolmente la sensibilità della sorgente. Nelle versioni precedenti della sorgente di ionizzazione PhotoSpray ® l'agente dopante veniva introdotto in una linea non pressurizzate, pertanto una pompa a siringa non era sufficiente.

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Cronologia delle revisioni

Revisione

A

Motivo del cambiamento

Prima versione del documento. In base a RUO-IDV-05-1461-B.

Data

Giugno 2014

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