User Guide: Turbo V Ion Source Operator Guide (ES)

User Guide: Turbo V Ion Source Operator Guide (ES)
Fuente de iones Turbo V™
Guía del operador
RUO-IDV-05-0940-ES-A
Julio de 2014
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Fuente de iones Turbo V™
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Guía del operador
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Contenido
Capítulo 1 Descripción general de la fuente de iones........................................................................5
Documentación relacionada........................................................................................................................................5
Asistencia técnica.......................................................................................................................................................5
Componentes de la fuente de iones............................................................................................................................6
Sondas........................................................................................................................................................................7
TurboIonSpray Sonda............................................................................................................................................8
Sonda APCI...........................................................................................................................................................8
Conexiones de gas y electricidad..............................................................................................................................10
Circuito detector de fuente de iones.........................................................................................................................10
Sistema de escape de la fuente.................................................................................................................................10
Capítulo 2 Instalación de la fuente de iones.....................................................................................12
Preparación para la instalación.................................................................................................................................12
Instalación de la sonda.............................................................................................................................................13
Instalación de la fuente de iones en el espectrómetro de masas..............................................................................13
Conexión del tubo de muestra..................................................................................................................................14
Capítulo 3 Optimización de la fuente de iones.................................................................................15
Introducción de muestras..........................................................................................................................................15
Predeterminado..................................................................................................................................................15
Caudal.................................................................................................................................................................15
Requisitos de la entrada de muestra...................................................................................................................16
TurboIonSpray Optimización de la sonda..................................................................................................................16
Caudal y temperatura.........................................................................................................................................17
Configuración del sistema...................................................................................................................................21
Ejecución del método..........................................................................................................................................21
Configuración de las condiciones iniciales..........................................................................................................18
Optimización de la posición de la sonda TurboIonSpray ....................................................................................18
Optimización de los parámetros de la fuente de iones y del gas y la tensión.....................................................19
Optimización de la temperatura del calentador turbo.........................................................................................20
Sugerencias de optimización...............................................................................................................................20
Optimización de la sonda APCI.................................................................................................................................21
Configuración del sistema...................................................................................................................................21
Ejecución del método..........................................................................................................................................21
Configuración de las condiciones iniciales..........................................................................................................22
Optimización de Gas 1 y Curtain Gas Flow (Caudal)...........................................................................................22
Ajuste de la posición de la aguja de descarga de la corona................................................................................22
Optimización de la posición de la sonda APCI....................................................................................................23
Optimización de la corriente nebulizante............................................................................................................24
Optimización de la temperatura de la sonda APCI..............................................................................................24
Capítulo 4 Mantenimiento de la fuente de iones.............................................................................25
Limpieza de las sondas.............................................................................................................................................26
Extracción de la fuente de iones...............................................................................................................................27
Extracción de la sonda..............................................................................................................................................27
Guía del operador
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Contenido
Limpieza del tubo del electrodo................................................................................................................................28
Montaje de los componentes de la sonda.................................................................................................................29
Ajuste de la extensión de la punta del electrodo......................................................................................................30
Sustitución de la aguja de descarga de la corona.....................................................................................................31
Sustitución del tubo de muestra................................................................................................................................33
Capítulo 5 Consejos de solución de problemas.................................................................................34
Apéndice A Principios de funcionamiento. Fuente de iones............................................................37
Modo TurboIonSpray ...............................................................................................................................................37
Modo APCI................................................................................................................................................................38
Región de ionización de APCI...................................................................................................................................41
Apéndice B Tensiones y parámetros de la fuente............................................................................43
TurboIonSpray parámetros para la sonda.................................................................................................................43
Parámetros para la sonda APCI.................................................................................................................................44
Descripciones de parámetros....................................................................................................................................44
Posición de la sonda.................................................................................................................................................46
Composición de los disolventes................................................................................................................................46
Apéndice C Consumibles y repuestos................................................................................................48
Historial de revisiones.........................................................................................................................50
Índice....................................................................................................................................................51
Fuente de iones Turbo V™
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Guía del operador
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Descripción general de la fuente
de iones
TM
La fuente de iones Turbo V
fuente de iones.
1
®
permite utilizar la TurboIonSpray o la sonda APCI en la misma caja de la
Utilice la fuente de iones para cada ionización por electrospray (ESI), con la sonda TurboIonSpray, o ionización
química a presión atmosférica (APCI), con la sonda APCI. Las aplicaciones de la fuente de iones incluyen el
desarrollo del método cualitativo y el análisis cualitativo y cuantitativo.
¡ADVERTENCIA! Peligro de radiación, riesgo biológico o sustancias químicas
tóxicas. Use la fuente de iones solo si dispone de los conocimientos y la
formación adecuada para usar, contener y evacuar los materiales tóxicos
o nocivos que se emplean con la fuente de iones. Deje de usar la fuente
de iones si la ventana está quebrada o dañada, y póngase en contacto con
un representante del servicio técnico de AB SCIEX. Cualquier material tóxico
o nocivo introducido en el equipo estará presente en la fuente de iones y
la salida de escape. Deseche los objetos con filo siguiendo los
procedimientos de seguridad establecidos del laboratorio.
¡ADVERTENCIA! Peligro de descarga eléctrica. Evite el contacto con las altas
tensiones aplicadas a la fuente de iones durante el funcionamiento. Ponga el
sistema en el modo de espera antes de ajustar el tubo de muestra u otros equipos
cerca de la fuente de iones.
Documentación relacionada
®
Las guías y tutoriales del espectrómetro de masas y el software Analyst se instalan automáticamente con el
software y están disponibles en el menú Start: All Programs > AB SCIEX > Analyst.
La documentación de la fuente de iones se encuentra en el DVD de referencia del cliente. Existe una
lista completa de la documentación disponible, que se puede encontrar en la Ayuda. Para ver la Ayuda del
software, pulse F1.
®
Las guías y tutoriales del espectrómetro de masas y el software Analyst TF se instalan automáticamente con
el software y están disponibles en el menú Start: All Programs > AB SCIEX > Analyst TF. Existe una
lista completa de la documentación disponible, que se puede encontrar en la Ayuda. Para ver la Ayuda del
software, pulse F1.
Asistencia técnica
AB SCIEX y sus representantes cuentan con un equipo de especialistas técnicos y de servicio totalmente
calificados ubicados por todas partes del mundo. Ellos sabrán resolver sus dudas y preguntas sobre el sistema
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Descripción general de la fuente de iones
y cualquier problema técnico que pueda surgir. Para obtener más información, visite el sitio web
www.absciex.com.
Componentes de la fuente de iones
Figura 1-1 Componentes de la fuente de iones
Elemento Descripción
1
Tubo de muestra
2
Torre de sondeo
3
Micrómetro del eje y empleado para colocar la sonda en el eje horizontal a fin de ajustar la
sensibilidad de la fuente de iones
4
Unión de la conexión a tierra
5
Uno de los dos pestillos de la fuente que fijan la fuente de iones al espectrómetro de masas
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Descripción general de la fuente de iones
Elemento Descripción
6
Orificio de ventana
7
Pasador guía
8
Calentador turbo
9
Micrómetro del eje x empleado para colocar la sonda en el eje vertical a fin de ajustar la
sensibilidad de la fuente de iones
10
Anillo de retención de bronce
11
Tornillo de ajuste de la aguja de descarga de corona
12
Tapa de ajuste del electrodo
13
Tuerca del tubo de muestra
¡ADVERTENCIA! Peligro de lesiones personales. Deje de usar la fuente de iones
si la ventana de la misma está quebrada o rota, y póngase en contacto con un
representante del servicio técnico de AB SCIEX. Deseche los objetos con filo
siguiendo los procedimientos de seguridad establecidos del laboratorio.
Sondas
®
La sonda TurboIonSpray y la sonda APCI proporcionan diversas opciones para probar muestras. Seleccione
la sonda y el método más adecuados para el compuesto en el flujo de corriente de muestra.
Tabla 1-1 Especificaciones de la fuente de iones
®
Especificación
TurboIonSpray Sonda
Sonda APCI
Intervalo de temperatura de la
fuente de iones
Temperatura de la sonda desde
temperatura ambiente hasta
750 °C, en función del flujo de
líquido
Temperatura de la sonda desde
50 °C hasta 750 °C, en función del
flujo de líquido
Cromatografía líquida (LC)
Conecta con cualquier sistema LC
Gas 1/Gas 2
Consulte la Guía de planificación de instalaciones para el
espectrómetro de masas.
®
®
El software Analyst o Analyst TF determina la sonda que está instalada y permite emplear los controles
de usuario correspondientes. Todos los datos que se adquieren mediante el uso de la fuente de iones se
identifican con una abreviatura que hace referencia a la sonda empleada para adquirir los datos (TIS para la
sonda TurboIonSpray y HN para la sonda APCI).
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Descripción general de la fuente de iones
®
TurboIonSpray Sonda
La sonda TurboIonSpray es preferiblemente apta para el análisis LC/MS/MS. Produce iones mediante la
evaporación de iones. La sensibilidad alcanzada con esta técnica depende tanto del caudal como del analito.
Debido a una mejor desolvatación con caudales más elevados, la eficiencia de la ionización aumenta al
aumentar la temperatura de la fuente de iones, lo que proporciona una mayor sensibilidad. Los compuestos
con una polaridad extremadamente alta y una baja actividad superficial suelen mostrar el mayor aumento de
®
sensibilidad con un incremento de la temperatura de la fuente. La técnica de la sonda TurboIonSpray es lo
suficientemente suave como para usarla con compuestos lábiles, tales como péptidos, proteínas y fármacos
termolábiles.
TM
Cuando el calentador está apagado, la sonda TurboIonSpray funciona como una fuente de iones IonSpray .
También funciona con caudales de entre 5 µl/min y 3000 µl/min y vaporiza disolventes 100 % acuosos a 100 %
orgánicos.
La sonda TurboIonSpray consta de un tubo de acero inoxidable con un diámetro exterior de 0,012 pulgadas
y se ubica en el centro con los dos calentadores turbo colocados en un ángulo de 45 grados a cada lado. Las
muestras introducidas a través de la TurboIonSpray sonda se ionizan en el tubo mediante la aplicación de alta
tensión (voltaje de IonSpray). Después se nebulizan mediante el chorro de gas nitrógeno caliente, seco y de
UHP (ultra alta pureza) de los calentadores turbo, creando un vapor de pequeñas gotas de alta carga. La
combinación de efluentes de IonSpray y el gas seco caliente procedente del turbo pulverizador se proyecta en
un ángulo de 90 grados a la ruta iónica. Consulte Principios de funcionamiento. Fuente de iones
en la página 37.
Figura 1-2 Piezas de la TurboIonSpray sonda
Elemento Descripción
1
Tuerca de ajuste del electrodo (cuello negro) que ajusta la extensión de la punta del electrodo
2
Anillo de retención de bronce que sujeta la sonda a la torre de sondeo del alojamiento de la
fuente de iones
3
Punta del electrodo a través de la cual las muestras se pulverizan en la zona de entrada de
muestras de la fuente de iones
Sonda APCI
La sonda APCI es adecuada para lo siguiente:
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Guía del operador
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Descripción general de la fuente de iones
•
La ionización de compuestos que no forman inmediatamente iones en una solución. Suelen ser compuestos
no polares.
•
La creación de espectros de APCI simples para experimentos LC/MS/MS.
•
Los análisis de alto rendimiento de muestras complejas y sucias. Es menos sensible a los efectos de la
supresión de iones.
•
La rápida introducción de muestras mediante inyección de flujos con o sin una columna LC.
La sonda APCI puede aceptar todo el efluente, sin dividirlo, con caudales de entre 50 µl/min y 3000 µl/min (a
través de una columna de calibre ancho). Puede vaporizar compuestos volátiles y lábiles con una mínima
descomposición térmica. La rápida desolvatación y vaporización de las gotas y los analitos arrastrados reduce
la descomposición térmica y conserva la identidad molecular para la ionización mediante la aguja de descarga
de la corona. Los tampones son fácilmente tolerados por la fuente de iones sin una contaminación significativa
y la vaporización intermitente del efluente pulverizado permite que el 100 % del agua se utilice sin dificultad.
La sonda APCI consta de un tubo de acero inoxidable con un diámetro interior de 100 µm (0,004 pulgadas)
rodeado por un flujo de gas del nebulizador (Gas 1). La corriente de muestra líquida se bombea a través del
pulverizador, donde se nebuliza en un tubo cerámico que contiene un calentador. La pared interna del tubo
cerámico se puede mantener a un intervalo de temperatura de entre 100 °C y 750 °C, y está supervisada por
el sensor integrado en el calentador.
Un chorro de gas del nebulizador a alta velocidad fluye por la punta del electrodo para dispersar la muestra
en forma de vapor de finas partículas. Se desplaza por el calentador de vaporización cerámico hasta la región
de reacción de la fuente de iones y a continuación sobrepasa la aguja de descarga de corona, donde las
moléculas de la muestra se ionizan a medida que pasan a través de la caja de la fuente de iones. Consulte
Principios de funcionamiento. Fuente de iones en la página 37.
Figura 1-3 Piezas de la sonda APCI
Elemento Descripción
1
Tuerca de ajuste del electrodo (cuello negro) que ajusta la extensión de la punta del electrodo
2
Anillo de retención de bronce que sujeta la sonda a la torre de sondeo del alojamiento de la
fuente de iones
3
Punta del electrodo a través de la cual las muestras se pulverizan en la zona de entrada de
muestras de la fuente de iones
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Descripción general de la fuente de iones
Conexiones de gas y electricidad
Las conexiones eléctricas de alta tensión y de gas se realizan a través de la parte delantera de la placa de la
interfaz y se conectan internamente mediante la caja de la fuente de iones. Cuando la fuente de iones se
instala en el espectrómetro de masas, se realizan todas las conexiones de electricidad y gas.
Circuito detector de fuente de iones
Un circuito detector de fuente de iones deshabilita el sistema de alimentación de alta tensión para el
espectrómetro de masas y el sistema de escape de la fuente en los siguientes casos:
•
La envoltura de la fuente de iones no está instalada o no se ha instalado correctamente.
•
No se ha instalado una sonda.
•
El espectrómetro de masas detecta un fallo de gas.
Sistema de escape de la fuente
¡ADVERTENCIA! Peligro de radiación, riesgo biológico o sustancias químicas
tóxicas. Use la fuente de iones solo si dispone de los conocimientos y la
formación adecuada para usar, contener y evacuar los materiales tóxicos
o nocivos que se emplean con la fuente de iones. Deje de usar la fuente
de iones si la ventana está quebrada o dañada, y póngase en contacto con
un representante del servicio técnico de AB SCIEX. Cualquier material tóxico
o nocivo introducido en el equipo estará presente en la fuente de iones y
la salida de escape. Deseche los objetos con filo siguiendo los
procedimientos de seguridad establecidos del laboratorio.
¡ADVERTENCIA! Peligro de radiación, riesgo biológico o sustancias químicas
tóxicas. Asegúrese de usar el sistema de escape de la fuente para eliminar
el escape de vapor de la muestra del entorno del laboratorio. Para conocer
los requisitos del sistema de escape de la fuente, consulte la Guía de
planificación y suministros de instalación.
¡ADVERTENCIA! Peligro de radiación, riesgo biológico o sustancias químicas
tóxicas. Ventile el sistema de escape de la fuente mediante una campana
extractora externa o un orificio de ventilación externo a fin de evitar que
se liberen vapores peligrosos en el entorno del laboratorio.
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Descripción general de la fuente de iones
¡ADVERTENCIA! Peligro de incendio. No dirija más de 3 ml/min de disolvente a
la fuente de iones. Si se sobrepasa el caudal máximo, el disolvente puede
acumularse en la fuente de iones. Asegúrese de que el sistema de escape de la
fuente está funcionando para evitar que se acumulen vapores inflamables en la
fuente de iones.
Todas las fuentes de iones producen tanto vapores de disolventes como de muestras. Estos vapores constituyen
un posible riesgo para el entorno del laboratorio. El sistema de escape de la fuente está diseñado para eliminar
de forma segura los vapores de muestra y disolvente, y permitir su correcta manipulación. Una vez instalada
la fuente de iones, el espectrómetro de masas no funcionará a menos que el sistema de escape de la fuente
esté en funcionamiento.
Un interruptor de vacío montado en el circuito de escape de la fuente mide el vacío en la fuente. Si el vacío
de la fuente aumenta por encima del punto de ajuste con la sonda instalada, el sistema entrará en estado de
fallo de escape (no preparado).
Un sistema de escape activo elimina el escape de la fuente de iones (vapor de muestra, disolvente y gases) a
través de un puerto de drenaje sin introducir ruido químico. El puerto de drenaje se conecta, a través de una
cámara de drenaje y una bomba de escape de la fuente, a una botella de drenaje y, desde ahí, a un sistema
de ventilación de escape suministrado por el cliente. Para obtener más información sobre los requisitos de
ventilación del sistema de escape de la fuente, consulte la Guía de planificación y suministros de
instalación.
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Instalación de la fuente de iones
2
¡ADVERTENCIA! Riesgo de descarga eléctrica. Instale la fuente de iones en el
espectrómetro de masas como último paso de este procedimiento. Hay alta tensión
cuando la fuente de iones está instalada en el equipo.
La fuente de iones está conectada a la interfaz de vacío y se mantiene en su posición gracias a dos pestillos
de la fuente. El interior de la fuente de iones se puede observar a través de las ventanas de vidrio templado
que se encuentran en el lateral y en el extremo de la fuente de iones.
Cuando la fuente de iones está instalada, el software reconoce la fuente de iones y muestra la identificación
de la fuente de iones.
Materiales necesarios
•
Conjunto de alojamiento de la fuente de iones
•
sonda TurboIonSpray
•
(Opcional) Sonda APCI
•
Kit de consumibles de la fuente de iones
®
Preparación para la instalación
¡ADVERTENCIA! Peligro de radiación, material biológico o sustancias
químicas tóxicas. Asegúrese de que el electrodo sobresalga más allá de la
punta de la sonda a fin de evitar que escapen vapores peligrosos de la
fuente. El electrodo no debe estar embutido dentro de la sonda.
¡ADVERTENCIA! Peligro de perforación. Tenga cuidado al manipular el tubo del
electrodo. La punta del tubo del electrodo es muy afilada.
¡Sugerencia! No deseche el paquete vacío. Utilícelo para guardar la fuente de iones cuando no la esté
usando.
•
Ajuste la tapa de ajuste del electrodo negra en la sonda para desplazar la punta del electrodo dentro del
tubo del electrodo.
Para obtener una estabilidad y rendimiento óptimos, la punta del electrodo debe extenderse entre 0,5 mm y
1mm desde el extremo de la sonda. Consulte la Ajuste de la extensión de la punta del electrodo
en la página 30.
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Instalación de la fuente de iones
Instalación de la sonda
¡ADVERTENCIA! Peligro de descarga eléctrica. Asegúrese de que la fuente de
iones está totalmente desconectada del espectrómetro de masas antes de
continuar.
¡ADVERTENCIA! Riesgo de descarga eléctrica. Instale la sonda en la fuente de
iones antes de instalar la fuente de iones en el espectrómetro de masas.
PRECAUCIÓN: Posible daño en el sistema. No permita que la punta del electrodo
sobresaliente o la aguja de descarga de la corona entren en contacto con ninguna pieza
de la caja de la fuente de iones para evitar dañar la sonda.
PRECAUCIÓN: Posible daño en el sistema. Asegúrese de que la punta de la aguja de
®
descarga de corona esté separada de la abertura cuando utilice la sonda TurboIonSpray
.
La sonda no está previamente instalada en la fuente de iones. Extraiga siempre la fuente de iones del
espectrómetro de masas antes de cambiar de sonda. Consulte Extracción de la fuente de iones en la
página 27.
Si la sonda no está instalada correctamente en la fuente de iones, se desactiva el suministro de alta tensión
para el espectrómetro de masas y el sistema de escape de la fuente.
1. Introduzca la sonda en la de la caja. Alinee el orificio de la sonda con el pasador de alineación en la parte
superior de la fuente de iones. Consulte Componentes de la fuente de iones en la página 6.
2. Presione suavemente la sonda para que los contactos se acoplen con la caja.
3. Gire el anillo de retención de latón sobre la sonda, presiónelo para acoplar sus roscas con las roscas de
la torre de la caja y, a continuación, apriete con las manos el anillo todo lo que pueda. Para apretar, utilice
los dedos únicamente para evitar daños en las roscas.
4. Solo para la sonda APCI, asegúrese de que la punta de la aguja de descarga de la corona de la sonda
apunta hacia la abertura en la place de chapa. Consulte Ajuste de la posición de la aguja de
descarga de la corona en la página 22.
Instalación de la fuente de iones en el
espectrómetro de masas
¡ADVERTENCIA! Riesgo de descarga eléctrica. Instale la sonda en la fuente de
iones antes de instalar la fuente de iones en el espectrómetro de masas.
Guía del operador
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Instalación de la fuente de iones
¡Sugerencia! Para que el rendimiento del sistema sea óptimo, utilice la placa del orificio adecuada para
el sistema en cuestión. No utilice una placa del orificio de otro sistema. El número de modelo del sistema
está grabado en la placa del orificio.
Si la sonda de la fuente de iones no se ha instalado correctamente, no estará disponible el sistema de
alimentación de alta tensión.
1. Asegúrese de que los pestillos de la fuente a cada lado de la fuente de iones apunten hacia arriba, en la
posición de las 12 punto. Consulte Componentes de la fuente de iones en la página 6.
2. Alinee la fuente de iones con la interfaz de vacío asegurándose de que los pestillos de la fuente de iones
estén alineados con las tomas de corriente de la interfaz de vacío.
3. Presione suavemente la fuente de iones contra la interfaz de vacío y, a continuación, gire los pestillos de
la fuente de iones hacia abajo para fijar la fuente de iones en su sitio.
El espectrómetro de masas reconoce la fuente de iones y muestra la identificación de la fuente de iones
®
®
en el software Analyst o Analyst TF.
4. Conecte el tubo del dispositivo de suministro de muestras a la unión a tierra de la fuente de iones.
Conexión del tubo de muestra
¡ADVERTENCIA! Riesgo de descarga eléctrica. No derive la conexión de unión a
tierra. La unión de la conexión a tierra proporciona una conexión a tierra entre
el espectrómetro de masas y el dispositivo de introducción de muestras.
¡ADVERTENCIA! Riesgo de radiación, material biológico o sustancias
químicas tóxicas. Asegúrese de que la tuerca del tubo de muestra esté
correctamente apretada antes de poner en funcionamiento este equipo
para evitar las fugas.
Consulte Componentes de la fuente de iones en la página 6.
1. Introduzca un trozo de 30 cm del tubo PEEK rojo en la tuerca del tubo de muestra.
2. Instale la tuerca del tubo de muestra en el conector de la parte superior de la sonda y, a continuación,
apriete la tuerca del tubo de muestra con las manos tanto como sea posible.
3. Conecte el otro extremo del tubo PEEK rojo a la unión a tierra en la fuente de iones .
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Guía del operador
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Optimización de la fuente de
iones
3
¡ADVERTENCIA! Peligro de radiación, riesgo biológico o sustancias químicas
tóxicas. Use la fuente de iones solo si dispone de los conocimientos y la
formación adecuada para usar, contener y evacuar los materiales tóxicos
o nocivos que se emplean con la fuente de iones. Deje de usar la fuente
de iones si la ventana está quebrada o dañada, y póngase en contacto con
un representante del servicio técnico de AB SCIEX. Cualquier material tóxico
o nocivo introducido en el equipo estará presente en la fuente de iones y
la salida de escape. Deseche los objetos con filo siguiendo los
procedimientos de seguridad establecidos del laboratorio.
¡ADVERTENCIA! Peligro de incendio. No dirija más de 3 ml/min de disolvente a
la fuente de iones. Si se sobrepasa el caudal máximo, el disolvente puede
acumularse en la fuente de iones. Asegúrese de que el sistema de escape de la
fuente está funcionando para evitar que se acumulen vapores inflamables en la
fuente de iones.
Optimice la fuente de iones cuando cambien la composición de la fase móvil, el analito o el caudal.
El rendimiento de la fuente se ve afectado por varios parámetros. Optimice el rendimiento cuando inyecte un
compuesto conocido y supervise la señal del ión conocido. Ajuste los parámetros del micrómetro, el gas y la
tensión para maximizar la relación señal/ruido y la estabilidad de la señal.
Introducción de muestras
Predeterminado
La corriente de muestra líquida se bombea a la fuente de iones mediante una bomba de LC, o bien mediante
una bomba de jeringa. Si se introduce mediante una bomba de LC, la muestra se puede inyectar directamente
en la fase móvil utilizando el FIA (análisis de inyección de flujos) o el conector en forma de T para infusión, o
bien mediante una columna de separación utilizando un inyector de bucle o un automuestreador. Si se introduce
con una bomba de jeringa, la muestra se inyecta directamente en la fuente de iones. La optimización de la
infusión se puede utilizar para la optimización de la ruta iónica y la selección de fragmentos MS/MS.
Caudal
Los caudales de muestras se determinan por el sistema de cromatografía o por el volumen de la muestra
disponible.
Guía del operador
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Fuente de iones Turbo V™
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Optimización de la fuente de iones
Requisitos de la entrada de muestra
•
Utilice las prácticas y los procedimientos analíticos apropiados para reducir al mínimo los volúmenes
muertos externos. La entrada de muestra transfiere la muestra líquida a la entrada de la fuente de iones
sin pérdidas y con volúmenes muertos mínimos.
•
Prefiltre las muestras de forma que el tubo capilar de las entradas de muestra no quede bloqueado por
partículas, muestras precipitadas o sales.
•
Asegúrese de que todas las conexiones estén suficientemente apretadas para evitar fugas. No las apriete
demasiado.
®
TurboIonSpray Optimización de la sonda
¡ADVERTENCIA! Riesgo de radiación, material biológico o sustancias
químicas tóxicas. Asegúrese de que el espectrómetro de masas está
correctamente ventilado y que la ventilación general del laboratorio sea
adecuada. Es necesaria una ventilación adecuada del laboratorio para
controlar las emisiones de los disolventes y muestras y para el
funcionamiento seguro del espectrómetro de masas.
PRECAUCIÓN: Posible daño en el sistema. Si el sistema de LC conectado al espectrómetro
®
®
de masas no está controlado por el software Analyst o Analyst TF, no debe dejar
desatendido el espectrómetro de masas mientras está en funcionamiento. El sistema
de LC puede inundar la fuente de iones cuando el espectrómetro de masas pasa al modo
Standby.
El rendimiento de la sonda TurboIonSpray se ve afectado por varios parámetros. Optimice el rendimiento
cuando inyecte un compuesto conocido y supervise la señal del ión conocido. Ajuste los parámetros para
®
maximizar la relación señal/ruido y la estabilidad de la señal. Consulte TurboIonSpray parámetros
para la sonda en la página 43.
Nota: Si el parámetro Ion Spray Voltage (IS) o IonSpray Voltage Floating (ISVF) es demasiado
alto, puede producirse una descarga de la corona, que se ve como un resplandor azul en la punta de la sonda
®
TurboIonSpray . Una descarga de la corona producirá una reducción de la sensibilidad y la estabilidad de
la señal de iones.
Nota: Para mantener el sistema limpio y con un funcionamiento óptimo, ajuste la posición de la sonda al
cambiar el caudal.
¡Sugerencia! Es más fácil optimizar la señal y la relación señal/ruido con el análisis de inyección de flujo
o las inyecciones en la columna.
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Guía del operador
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Optimización de la fuente de iones
Caudal y temperatura
®
La cantidad y el tipo de la muestra afectan a la temperatura de la sonda TurboIonSpray óptima. A caudales
mayores, aumenta la temperatura óptima. Un factor más significativo es la composición del disolvente. A
medida que el contenido orgánico del disolvente aumenta, debe disminuir la temperatura de sonda óptima.
La sonda TurboIonSpray se emplea normalmente con caudales de muestra de entre 40 y 1000 µL/min. El calor
se utiliza para aumentar el índice de evaporación, lo que mejora la eficiencia de la ionización y da lugar a una
mayor sensibilidad. Los caudales extremadamente bajos de disolventes con alto contenido orgánico no suelen
necesitar temperaturas elevadas.
Caudal (µl/min)
Temperatura (°C)
1 a 20
0 a 100
20 a 100
150 a 350
100 a 300
300 a 400
300 a 1000
400 a 500
Configuración del sistema
1. Configure la bomba HPLC para suministrar la fase móvil con el caudal necesario. Consulte Tensiones y
parámetros de la fuente en la página 43.
2. Conecte la unión de conexión a tierra de la fuente de iones a una bomba, mediante un inyector equipado
con un bucle de 5 µl, o a un automuestreador.
3. Si utiliza un automuestreador, configúrelo para realizar múltiples inyecciones.
Ejecución del método
1. Iniciar el software Analyst
®
®
o Analyst TF.
2. En la barra de navegación, en el modo Tune and Calibrate (Ajuste y calibración), haga doble clic en
Manual Tuning (Ajuste manual).
3. Abra un método optimizado con anterioridad, o bien cree un método basado en los compuestos.
4. Si la fuente de iones se ha dejado enfriar, haga lo siguiente.
a. Defina el parámetro Temperature (TEM) en 450.
b. Deje que la fuente de iones se caliente durante 30 minutos.
La fase de 30 minutos de calentamiento evita que los vapores de los disolventes se condensen en la sonda
fría.
5. Inicie la adquisición.
6. Inicie el flujo y la inyección de muestras.
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Optimización de la fuente de iones
Configuración de las condiciones iniciales
1. En la pestaña Source/Gas del editor Tune Method Editor, escriba un valor inicial para Ion Source
Gas 1 (GS1).
En bombas de LC, utilice un valor entre 40 y 60 para GS1.
2. Escriba un valor inicial para Ion Source Gas 2 (GS2).
En bombas de LC, utilice un valor entre 30 y 50 para GS2.
Nota: Gas 2 se utiliza con caudales mayores típicos en un sistema de LC y en colaboración con una
mayor temperatura.
3. En el campo IonSpray Voltage (IS) [Voltaje de IonSpray (IS)] o IonSpray Voltage Floating (ISVF),
escriba el valor adecuado para el espectrómetro de masas.
Tabla 3-1 Valores de los parámetros IS e ISVF
Espectrómetro de masas
Valor inicial
Sistemas de las series 3200, 3500, 4000, 4500,
5000, 5500 y 6500
4500
®
TripleTOF
5500
4. En el campo Curtain Gas (CUR) , escriba el valor adecuado para el espectrómetro de masas.
Tabla 3-2 Valores del parámetro CUR
Espectrómetro de masas
Valor inicial
Sistemas 3200, 3500, 4000 y 4500
20
Sistemas 5000 y 5500
25
Sistemas 6500
30
®
TripleTOF
De 20 a 25, en función del caudal
®
Optimización de la posición de la sonda TurboIonSpray
1. Mire a través de la ventana del alojamiento de la fuente de iones para ver la posición de la sonda.
2. Utilice la configuración anterior del micrómetro vertical y horizontal o defina 5 como su posición inicial.
3. Utilice el FIA o un conector en forma de T para infusión para inyectar un caudal elevado de muestra.
4. Supervise la señal en el software.
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Optimización de la fuente de iones
5. Utilice el micrómetro horizontal para ajustar la posición de la sonda con pequeños incrementos hasta
alcanzar la mejor señal o relación señal/ruido.
La sonda se puede optimizar ligeramente a cada lado de la abertura.
¡Sugerencia! Es más fácil optimizar la señal y la relación señal/ruido con el análisis de inyección de
flujo o las inyecciones en la columna.
6. Utilice el micrómetro vertical para ajustar la posición de la sonda con pequeños incrementos hasta alcanzar
la mejor señal o relación señal/ruido.
Nota: La posición vertical de la sonda depende del caudal. Con caudales más bajos, la sonda debe estar
más cerca de la abertura. Con caudales más altos, la sonda debe estar más alejada.
¡ADVERTENCIA! Peligro de radiación, material biológico o sustancias
químicas tóxicas. Asegúrese de que el electrodo sobresalga más allá de
la punta de la sonda a fin de evitar que escapen vapores peligrosos de
la fuente. El electrodo no debe estar embutido dentro de la sonda.
7. Ajuste la tapa negra de ajuste del electrodo en la sonda para extender la punta del electrodo. Normalmente,
la extensión óptima del electrodo es de entre 0,5 mm y 1,0 mm más allá del extremo de la sonda.
Después de optimizar la sonda ya solo necesitará pequeños ajustes. Si ha quitado la sonda, o si cambia
la composición del analito, el caudal o el disolvente, repita el procedimiento de optimización después de
la instalación.
¡Sugerencia! Dirija la pulverización de líquido de la sonda TurboIonSpray lejos de la abertura a fin
TM
de prevenir la contaminación de la misma, para evitar la penetración del caudal Curtain Gas , lo que
puede producir una señal inestable, y para evitar cortocircuitos a causa de la presencia del líquido.
Optimización de los parámetros de la fuente de iones y del
gas y la tensión
Optimice el Gas 1 (gas del nebulizador) para conseguir una mayor sensibilidad y estabilidad de la señal. El
Gas 2 (gas del calentador) ayuda a evaporar el disolvente, lo que ayuda a incrementar la ionización de la
muestra.
Una temperatura demasiado elevada puede provocar una vaporización prematura del disolvente en la punta
®
de la sonda TurboIonSpray , especialmente si la sonda está demasiado baja, lo que provocará la inestabilidad
de la señal y un ruido de fondo químico elevado. De igual modo, un caudal de gas del calentador elevado
puede producir una señal ruidosa o inestable.
TM
Utilice la menor tensión posible de la fuente IonSpray sin perder la señal. Céntrese en la señal/ruido y no
solo en la señal. Si la tensión de la fuente IonSpray es demasiado alta, podría producirse una descarga de
corona. Se ve como un resplandor azul en la punta de la sonda TurboIonSpray. Esto producirá una reducción
de la sensibilidad y la estabilidad señal de iones.
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Optimización de la fuente de iones
1. Ajuste GS1 y GS2 en incrementos de 5 hasta alcanzar la mejor señal o relación señal/ruido.
Nota: Para evitar la contaminación, utilice el valor de CUR más alto posible sin sacrificar la sensibilidad.
No configure CUR por debajo de 20. Esto ayuda a evitar la penetración del flujo de Curtain Gas, que
puede producir una señal ruidosa, a evitar la contaminación de la abertura y aumentar la relación
señal/ruido general.
2. Aumente el parámetro CUR hasta que la señal empiece a disminuir.
3. Ajuste IS o ISVF en incrementos de 500 V a fin de maximizar la relación señal/ruido.
Nota: Si el parámetro Ion Spray Voltage (IS) o IonSpray Voltage Floating (ISVF) es
demasiado alto, puede producirse una descarga de la corona, que se ve como un resplandor azul en la
®
punta de la sonda TurboIonSpray . Una descarga de la corona producirá una reducción de la sensibilidad
y la estabilidad de la señal de iones.
Optimización de la temperatura del calentador turbo
La temperatura óptima del calentador depende del compuesto, el caudal y la composición de la fase móvil.
Cuanto mayor sea el caudal y mayor la composición acuosa, mayor será la temperatura optimizada.
Cuando optimice la temperatura de la fuente, asegúrese de que la fuente de iones está equilibrada con respecto
al nuevo ajuste de la temperatura.
•
Ajuste el valor TEM en incrementos de entre 50 °C y 100 °C hasta alcanzar la mejor señal o relación
señal/ruido.
Sugerencias de optimización
•
Utilice la temperatura más alta posible al optimizar compuestos. Una temperatura de 700 °C es común
para muchos compuestos. Las temperaturas altas ayudan a mantener limpia la fuente de iones y reducir
el ruido de fondo.
•
Utilice el caudal de Curtain Gas
siguiente:
•
TM
(CUR) más alto posible sin disminuir la señal. Esto le ayudará a lo
•
Evitar la penetración del caudal de Curtain Gas, que puede producir una señal ruidosa.
•
Evitar la contaminación de la abertura.
•
Aumentar la relación señal/ruido general.
®
Dirigir la pulverización de líquido de la sonda TurboIonSpray lejos de la abertura a fin de:
•
Evitar la contaminación de la abertura.
•
Evitar la penetración del caudal de Curtain Gas, que puede crear una señal inestable.
•
Evitar cortocircuitos debido a la presencia de líquido.
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Optimización de la fuente de iones
•
TM
Utilizar la menor tensión posible de la fuente IonSpray
no solo en la señal.
sin perder la señal. Céntrese en la señal/ruido y
Optimización de la sonda APCI
¡ADVERTENCIA! Riesgo de radiación, material biológico o sustancias
químicas tóxicas. Asegúrese de que el espectrómetro de masas está
correctamente ventilado y que la ventilación general del laboratorio sea
adecuada. Es necesaria una ventilación adecuada del laboratorio para
controlar las emisiones de los disolventes y muestras y para el
funcionamiento seguro del espectrómetro de masas.
PRECAUCIÓN: Posible daño en el sistema. Si el sistema de LC conectado al espectrómetro
®
®
de masas no está controlado por el software Analyst o Analyst TF, no debe dejar
desatendido el espectrómetro de masas mientras está en funcionamiento. El sistema
de LC puede inundar la fuente de iones cuando el espectrómetro de masas pasa al modo
Standby.
Consulte Parámetros para la sonda APCI en la página 44 .
PRECAUCIÓN: Es más fácil optimizar la señal y la relación señal/ruido con el análisis de
inyección de flujo o las inyecciones en la columna.
Configuración del sistema
1. Configure la bomba HPLC para suministrar la fase móvil con el caudal necesario. Consulte Tensiones y
parámetros de la fuente en la página 43.
2. Conecte la unión de conexión a tierra de la fuente de iones a una bomba, mediante un inyector equipado
con un bucle de 5 µl, o a un automuestreador.
3. Si utiliza un automuestreador, configúrelo para realizar múltiples inyecciones.
Ejecución del método
1. Iniciar el software Analyst
®
®
o Analyst TF.
2. En la barra de navegación, en el modo Tune and Calibrate (Ajuste y calibración), haga doble clic en
Manual Tuning (Ajuste manual).
3. Abra un método optimizado con anterioridad, o bien cree un método basado en los compuestos.
4. Si la fuente de iones se ha dejado enfriar, haga lo siguiente.
a. Defina el parámetro Temperature (TEM) en 450.
b. Deje que la fuente de iones se caliente durante 30 minutos.
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Optimización de la fuente de iones
La fase de 30 minutos de calentamiento evita que los vapores de los disolventes se condensen en la sonda
fría.
5. Inicie la adquisición.
6. Inicie el flujo y la inyección de muestras.
Configuración de las condiciones iniciales
1. En la pestaña Source/Gas (Fuente/Gas) del Tune Method Editor (Editor del método de ajuste),
escriba 30 en el campo Ion Source Gas 1 (GS1) [Gas de fuente de iones 1 (GS1)].
2. En el campo Curtain Gas (CUR) , escriba el valor adecuado para el espectrómetro de masas.
Tabla 3-3 Valores del parámetro CUR
Espectrómetro de masas
Valor inicial
Sistemas 3200, 3500, 4000 y 4500
20
Sistemas 5000 y 5500
25
Sistemas 6500
30
®
TripleTOF
De 20 a 25, en función del caudal
3. Escriba 1 en el campo Nebulizer Current (NC) [Corriente nebulizante (NC)].
Optimización de Gas 1 y Curtain Gas
TM
Flow (Caudal)
1. Ajuste GS1 en incrementos de cinco hasta alcanzar la mejor señal o relación señal/ruido.
Nota: Para evitar la contaminación, utilice el valor de CUR más alto posible sin sacrificar la sensibilidad.
No configure CUR por debajo de 20. Esto ayuda a evitar la penetración del flujo de Curtain Gas, que
puede producir una señal ruidosa, a evitar la contaminación de la abertura y aumentar la relación
señal/ruido general.
2. Aumente CUR hasta que la señal comience a disminuir.
Ajuste de la posición de la aguja de descarga de la corona
¡ADVERTENCIA! Peligro de descarga eléctrica. Siga este procedimiento para evitar
el contacto con las altas tensiones aplicadas a la aguja de descarga de corona, la
placa de chapa y los calentadores.
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Optimización de la fuente de iones
Cuando utilice la sonda APCI, asegúrese de que la aguja de descarga de la corona esté apuntando hacia la
abertura.
Materiales necesarios
•
Destornillador de punta fija aislado
1. Utilice un destornillador de punta plana aislado para girar el tornillo de ajuste de la aguja de descarga de
corona de la parte superior de la aguja.
2. Mire a través de la ventana de vidrio para asegurarse de que la aguja está alineada con la punta que se
dirige hacia la abertura.
3. Guarde el método optimizado como nuevo método.
Optimización de la posición de la sonda APCI
Asegúrese de que la abertura de la placa de chapa no presente disolvente ni gotas de disolvente en ningún
momento.
La posición de la boquilla pulverizadora afecta a la sensibilidad y la estabilidad de la señal. Ajuste la sensibilidad
de la sonda únicamente con pequeños incrementos. En el caso de caudales más bajos, coloque la sonda más
cerca de la abertura. En el caso de caudales más altos, coloque la sonda más alejada de la abertura.
Figura 3-1 Posición de la boquilla pulverizadora
Elemento Descripción
1
Aguja de descarga de la corona
2
Placa de chapa
3
Sonda APCI
Guía del operador
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Optimización de la fuente de iones
1. Utilice los ajustes anteriores de horizontalidad y verticalidad del micrómetro o ajústelos a 5 mm como
posición de partida inicial.
Nota: Para evitar reducir el rendimiento del espectrómetro de masas, no pulverice directamente en la
abertura.
2. Utilice el FIA o un conector en forma de T para infusión para inyectar un caudal elevado de muestra.
3. Supervise la señal en el software.
4. Utilice el micrómetro horizontal para ajustar la sonda con pequeños incrementos hasta alcanzar la mejor
señal o relación señal/ruido.
5. Utilice el micrómetro vertical para ajustar la sonda en pequeños incrementos hasta alcanzar la mejor señal
o relación señal/ruido.
Después de optimizar la sonda ya solo necesitará pequeños ajustes. Si ha quitado la sonda, o si cambia
la composición del analito, el caudal o el disolvente, repita el procedimiento de optimización después de
la instalación.
Optimización de la corriente nebulizante
La fuente de iones está controlada por corriente y no por tensión. Seleccione la corriente adecuada para el
método de adquisición, independientemente de la posición seleccionada de la fuente de iones.
•
Comience con un valor para Nebulizer Current (NC) de 1 y aumente hasta alcanzar la mejor señal o
relación señal/ruido.
La NC aplicada a la aguja de descarga de corona suele optimizarse entre 1 µA y 5 µA en modo positivo.
Si no se observan cambios en la señal cuando aumenta la corriente, entonces deje la corriente en el valor
más bajo que ofrezca la mejor señal o relación señal/ruido.
Optimización de la temperatura de la sonda APCI
¡ADVERTENCIA! Riesgo de radiación, material biológico o sustancias
químicas tóxicas. Asegúrese de que el espectrómetro de masas está
correctamente ventilado y que la ventilación general del laboratorio sea
adecuada. Es necesaria una ventilación adecuada del laboratorio para
controlar las emisiones de los disolventes y muestras y para el
funcionamiento seguro del espectrómetro de masas.
La cantidad y el tipo de disolvente afectan a la temperatura óptima de la sonda APCI. A caudales mayores,
aumenta la temperatura óptima.
•
Ajuste el valor TEM en incrementos de entre 50 °C y 100 °C hasta alcanzar la mejor señal o relación
señal/ruido.
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Guía del operador
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Mantenimiento de la fuente de
iones
4
Las siguientes advertencias se aplican a todos los procedimientos de mantenimiento que se describen en este
capítulo.
¡ADVERTENCIA! Peligro de superficies calientes. Espere un mínimo de 30 minutos
para que la fuente de iones se enfríe antes de iniciar cualquier procedimiento de
mantenimiento. Las superficies de la fuente de iones y los componentes de la
interfase de vacío se calientan durante su funcionamiento.
¡ADVERTENCIA! Peligro de incendio y sustancias químicas tóxicas. Mantenga
los disolventes inflamables lejos de las llamas y las chispas, y utilícelos solo
en campanas extractoras de humos químicos ventilados o en cabinas de
seguridad.
¡ADVERTENCIA! Riesgo de toxicidad química. Utilice equipo de protección
individual, incluidos una bata de laboratorio, guantes y gafas de seguridad, para
evitar la exposición de la piel o los ojos a los disolventes.
¡ADVERTENCIA! Peligro de radiación, material biológico o sustancias
químicas tóxicas. En caso de derrame de sustancias químicas, revise las
hojas de datos de seguridad para conocer las instrucciones específicas.
Detenga el derrame o la fuga solo si es seguro hacerlo. Utilice el equipo
de protección individual adecuado y toallas absorbente para contener el
derrame y deséchelo según lo dispuesto por las normas locales.
¡ADVERTENCIA! Peligro de descarga eléctrica. Evite el contacto con las altas
tensiones aplicadas a la fuente de iones durante el funcionamiento. Ponga el
sistema en el modo de espera antes de ajustar el tubo de muestra u otros equipos
cerca de la fuente de iones.
Esta sección contiene procedimientos generales de mantenimiento para la fuente de iones. Para determinar
la frecuencia con la que se debe limpiar la fuente de iones o realizar un mantenimiento preventivo, tenga en
cuenta lo siguiente:
•
Compuestos probados
•
Limpieza de los métodos de preparación
•
Cantidad de tiempo que una sonda inactiva contiene una muestra
•
Tiempo de ejecución del sistema general
Estos factores pueden provocar cambios en el rendimiento de la fuente de iones, lo que indica que se requiere
un mantenimiento.
Guía del operador
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Mantenimiento de la fuente de iones
Asegúrese de que la fuente de iones instalada esté totalmente sellada respecto al espectrómetro de masas y
no haya signos de fugas de gas. Realice inspecciones de mantenimiento general para garantizar que el
funcionamiento del sistema es seguro. Limpie los componentes de la fuente de iones con regularidad para
mantenerla en buen estado de funcionamiento.
PRECAUCIÓN: Posible daño en el sistema. Utilice solo el método de limpieza recomendado
a fin de evitar dañar los equipos.
Materiales necesarios
•
Llave de boca de 0,25 pulgadas
•
Llave hexagonal de 0,14 pulgadas (se suministra llave en forma de L)
•
Llave hexagonal de 5 mm
•
Llave hexagonal de 2,5 mm
•
Destornillador Phillips
•
Destornillador de punta plana
•
Metanol de grado MS
•
Agua desionizada de grado HPLC
•
Gafas de seguridad
•
Máscara y filtro de respiración
•
Guantes no empolvados (se recomienda que sean de neopreno)
•
Bata de laboratorio
Limpieza de las sondas
Enjuague periódicamente la fuente de iones, independientemente del tipo de compuestos muestreado. Hágalo
®
®
mediante la configuración de un método en el software Analyst o Analyst TF específicamente para realizar
una operación de enjuague.
1. Cambie a una fase móvil que sea 1:1 de agua:acetonitrilo, o bien 1:1 de agua:metanol.
2. Ajuste la posición de la sonda de modo que quede lo más lejos posible del orificio.
3. En el software, haga lo siguiente.
a. Ajuste Temperature (TEM) [Temperatura (TEM)] entre500 y 600.
b. Ajuste Ion Source Gas (GS1) [Gas de fuente de iones (GS1)] y Ion Source Gas 2 (GS2) [Gas
de fuente de iones 2 (GS2)] al menos a 40.
c. Configure Curtain Gas (CUR) con el valor más alto posible.
d. Espere hasta que se alcance el punto de ajuste de temperatura TEM.
4. Inyecte fase móvil por el tubo y la sonda a 1 ml/min durante 10-15 minutos.
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Mantenimiento de la fuente de iones
5. Asegúrese de que la sonda y el tubo de muestra queden perfectamente enjuagados.
Extracción de la fuente de iones
Nota: (sistemas 3500, 4500, 5500, 6500 y 6600) Hay un flujo de 5,3 l/min de nitrógeno adicional cuando
se apaga el espectrómetro de masas o cuando se retira la fuente de iones del sistema. Para minimizar el
consumo de gas nitrógeno y para mantener limpio el espectrómetro de masas cuando no se esté utilizando,
deje instalada la fuente de iones en el espectrómetro y el sistema encendido.
La fuente de iones se puede extraer fácil y rápidamente sin necesidad de herramientas. Extraiga siempre la
fuente de iones del espectrómetro de masas antes de realizar cualquier operación de mantenimiento en la
fuente de iones o de intercambiar sondas.
1. Detenga todas las exploraciones en curso.
2. Apague la corriente de muestra.
3. Escriba 0 en el campo Temperature (TEM) (Temperatura), si se están utilizando los calentadores.
4. Deje que la fuente de iones se enfríe durante un mínimo de 30 minutos.
5. Desconecte el tubo de muestra de la unión a tierra.
6. Gire los dos pestillos de la fuente hacia arriba, hasta la posición de las 12 en punto, para liberar la fuente
de iones.
7. Separe suavemente la fuente de iones de la interfaz de vacío.
8. Coloque la fuente de iones sobre una superficie limpia y segura.
Extracción de la sonda
Procedimientos de condiciones previas
•
Extracción de la fuente de iones en la página 27
¡ADVERTENCIA! Peligro de descarga eléctrica. Asegúrese de que la fuente de
iones está totalmente desconectada del espectrómetro de masas antes de
continuar.
La sonda se puede extraer fácil y rápidamente sin necesidad de herramientas. Extraiga siempre la fuente de
iones del espectrómetro de masas antes de cambiar las sondas o de realizar el mantenimiento de la sonda.
1. Afloje la tuerca del tubo de muestra y luego desconecte el tubo de muestra de la sonda.
2. Afloje el anillo de retención de latón que sujeta la sonda a la envoltura de la fuente de iones.
3. Tire suavemente de la sonda hacia arriba y sáquela de la carcasa de la fuente de la torre.
Nota: No permita que la punta de la sonda entre en contacto con nada al sacarla o guardarla.
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Mantenimiento de la fuente de iones
4. Coloque la sonda en una superficie limpia y segura.
Limpieza del tubo del electrodo
Procedimientos de condiciones previas
•
Extracción de la fuente de iones en la página 27
•
Extracción de la sonda en la página 27
¡ADVERTENCIA! Peligro de descarga eléctrica. Asegúrese de que la fuente de
iones está totalmente desconectada del espectrómetro de masas antes de
continuar.
¡ADVERTENCIA! Peligro de perforación. Tenga cuidado al manipular el tubo del
electrodo. La punta del tubo del electrodo es muy afilada.
La sonda contiene un tubo de electrodo. Limpie periódicamente el tubo del electrodo o cuando observe un
descenso en el rendimiento.
Este procedimiento se aplica a ambas sondas. Utilice este procedimiento para extraer el tubo del electrodo a
fin de limpiarlo. Si no se puede limpiar el tubo del electrodo, utilice este procedimiento para reemplazarlo.
1. Extraiga la tuerca de ajuste del electrodo.
2. Sosteniendo la sonda con la punta hacia abajo, de forma que el resorte permanezca dentro de la sonda,
retire de la misma la unión PEEK y el tubo del electrodo acoplado.
Figura 4-1 Sonda, vista ampliada
Elemento
Descripción
1
Tuerca de ajuste del electrodo
2
Tuerca de retención de 1/4 de pulgada
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Mantenimiento de la fuente de iones
Elemento
Descripción
3
Resorte
4
Anillo de retención de bronce
5
Tubo del pulverizador
6
Punta del electrodo
7
Tubo del electrodo
8
Unión PEEK
3. Utilice la llave de boca de 1/4 de pulgada para extraer la tuerca de retención que sostiene el tubo del
electrodo en la unión PEEK.
4. Extraiga el tubo del electrodo de la tuerca de retención.
5. Limpie el tubo del electrodo con una solución de metanol y agua al 1:1 sumergiendo el tubo en un baño
ultrasónico.
Montaje de los componentes de la sonda
¡ADVERTENCIA! Peligro de perforación. Tenga cuidado al manipular el tubo del
electrodo. La punta del tubo del electrodo es muy afilada.
Cuando el tubo del electrodo esté limpio o lo haya reemplazado por una pieza nueva, monte los componentes
de la sonda.
1. Introduzca el tubo del electrodo en la tuerca de retención y, a continuación, en la unión PEEK.
Asegúrese de que el tubo del electrodo esté introducido hasta el final en la unión PEEK. Si existe un hueco
entre el tubo del electrodo y su emplazamiento dentro de la unión, puede producirse un volumen muerto.
2. Apriete la tuerca de retención.
No fuerce la tuerca de retención ni la apriete excesivamente, ya que el tubo podría presentar fugas.
3. Asegúrese de que el resorte esté aún dentro de la sonda y, a continuación, apriete la tuerca de ajuste del
electrodo.
4. Alinee el tubo del electrodo con la abertura estrecha del tubo del pulverizador e introduzca la unión PEEK
y el tubo del electrodo adherido en la sonda. Tenga cuidado de no doblar el tubo del electrodo.
5. Introduzca la sonda en la caja de la fuente, con cuidado de que la punta de la sonda no entre en contacto
con ninguna parte de la caja de la fuente de iones.
6. Empuje hacia abajo el anillo de retención de latón para acoplar su rosca con la rosca de la caja de la fuente
de iones y, seguidamente, apriete el anillo.
7. Inserte un trozo de 30 cm del tubo PEEK rojo en la tuerca del tubo de muestra.
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Mantenimiento de la fuente de iones
8. Instale la tuerca del tubo de muestra en el conector de la parte superior de la sonda y, a continuación,
apriete la tuerca del tubo de muestra con las manos tanto como sea posible.
9. Instale la fuente de iones en el espectrómetro de masas. Consulte la Instalación de la fuente de
iones en la página 12.
10. Ajuste la extensión de la punta del electrodo. Consulte la Ajuste de la extensión de la punta del
electrodo en la página 30.
Ajuste de la extensión de la punta del electrodo
¡ADVERTENCIA! Peligro de radiación, material biológico o sustancias
químicas tóxicas. Asegúrese de que el electrodo sobresalga más allá de la
punta de la sonda a fin de evitar que escapen vapores peligrosos de la
fuente. El electrodo no debe estar embutido dentro de la sonda.
¡ADVERTENCIA! Peligro de perforación. Tenga cuidado al manipular el tubo del
electrodo. La punta del tubo del electrodo es muy afilada.
Ajuste la extensión de la punta del electrodo para obtener un mejor rendimiento. El valor óptimo depende de
los compuestos. La distancia a la que se extiende la punta del electrodo afecta a la forma del cono de
pulverización y la forma del cono de pulverización afecta a la sensibilidad del espectrómetro de masas.
•
Ajuste la tapa de ajuste del electrodo negra en la parte superior de la sonda para extender o replegar la
punta del electrodo. La punta del electrodo debe sobresalir entre 0,5 mm y 1 mm del extremo de la sonda.
Figura 4-2 Ajuste de la extensión de la punta del electrodo
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Guía del operador
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Mantenimiento de la fuente de iones
Elemento Descripción
1
Sonda
2
Electrodo
Sustitución de la aguja de descarga de la corona
Procedimientos de condiciones previas
•
Extracción de la fuente de iones en la página 27
•
Extracción de la sonda en la página 27
¡ADVERTENCIA! Peligro de descarga eléctrica. Asegúrese de que la fuente de
iones está totalmente desconectada del espectrómetro de masas antes de
continuar.
¡ADVERTENCIA! Peligro de punción. Manipule con cuidado la aguja. La punta de
la aguja está muy afilada.
La punta de la aguja de descarga de corona puede oxidarse tanto que es posible que sea necesario separarla
cortándola de la aguja. Si ocurre esto, reemplace toda la aguja de descarga de corona.
1. Gire la fuente de iones para se pueda acceder al lado abierto.
Guía del operador
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Mantenimiento de la fuente de iones
Figura 4-3 Aguja de descarga de corona
Elemento Descripción
1
Chimenea de escape
2
Manguito cerámico
3
Punta de la aguja de descarga de la corona
2. Mientras sostiene la punta de la aguja de descarga de la corona entre el dedo índice y el pulgar de una
mano y la aguja de descarga de la corona con la otra mano, gire la punta de la aguja de descarga de la
corona en sentido contrario al de las agujas del reloj para aflojar y extraer con cuidado la punta.
3. Tire hacia abajo y con cuidado de la aguja de descarga de la corona a través de la chimenea de escape
para extraerla.
4. Introduzca la nueva aguja a través de la chimenea de escape en el manguito cerámico hasta donde le sea
posible.
5. Sosteniendo una nueva punta entre el dedo índice y el pulgar de una mano y la aguja de descarga de la
corona con la otra mano, gire la punta de la aguja de descarga de la corona en el sentido de las agujas
del reloj para instalar la punta.
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Guía del operador
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Mantenimiento de la fuente de iones
6. Inserte la sonda y, a continuación, instale la fuente de iones en el espectrómetro de masas. Consulte la
Instalación de la fuente de iones en la página 12.
Sustitución del tubo de muestra
¡ADVERTENCIA! Peligro de descarga eléctrica. Evite el contacto con las altas
tensiones aplicadas a la fuente de iones durante el funcionamiento. Ponga el
sistema en el modo de espera antes de ajustar el tubo de muestra u otros equipos
cerca de la fuente de iones.
Utilice el siguiente procedimiento para reemplazar el tubo de muestra si presenta un bloqueo.
1. Detenga el flujo de muestra y asegúrese de que todo el gas restante se ha eliminado a través del sistema
de escape de la fuente. Consulte la Extracción de la fuente de iones en la página 27.
2. Desconecte el tubo de muestra de la sonda y la unión a tierra.
3. Reemplace el tubo de muestra con un tubo de la misma longitud que el anterior.
4. Instale la fuente de iones. Consulte la Instalación de la fuente de iones en la página 12.
5. Inicie el flujo de muestra
Guía del operador
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Consejos de solución de
problemas
Síntoma
Posible causa
®
®
El software Analyst o Analyst La sonda no está instalada.
TF informa de que el espectrómetro
de masas está en estado Fault
(Fallo).
La sonda no está conectada
firmemente.
5
Acción correctiva
Instale la sonda. Consulte
Instalación de la sonda en la
página 13.
a. Extraiga la sonda. Consulte
Extracción de la sonda en
la página 27.
b. Instale la sonda asegurándose
de que el anillo de retención de
latón quede bien apretado.
Consulte Instalación de la
sonda en la página 13.
El software Analyst o Analyst TF El fusible F3 está fundido.
indica que se está utilizando la
sonda APCI, pero está instalada la
®
sonda TurboIonSpray .
Póngase en contacto con un
representante del servicio técnico.
La pulverización no es uniforme.
El electrodo está bloqueado.
Limpie o reemplace el electrodo.
Consulte Limpieza del tubo del
electrodo en la página 28.
La sensibilidad no es adecuada.
Los componentes de la interfaz
(extremo delantero) están sucios.
Limpie los componentes de la
interfaz e instale la fuente de iones.
En la región del analizador están
presentes vapor del disolvente y
otros compuestos desconocidos.
Optimice el flujo de Curtain Gas™.
Consulte Optimización de la
fuente de iones en la página
15.
El espectrómetro de masas no ha
superado las pruebas de
instalación.
Realice pruebas de instalación en
el espectrómetro de masas con la
fuente predeterminada.
La solución de prueba no se ha
preparado correctamente.
a. Confirme que las soluciones de
prueba se han preparado
correctamente.
Durante la prueba, la fuente de
iones no cumple las
especificaciones.
b. Si no es posible resolver el
problema, póngase en contacto
con el representante del
servicio técnico.
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Guía del operador
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Consejos de solución de problemas
Síntoma
Posible causa
Acción correctiva
El ruido de fondo es alto.
La temperatura (TEM) es demasiado Optimice la temperatura.
alta.
El caudal de gas del calentador
(GS2) es demasiado alto.
Optimice el flujo de gas del
calentador.
La fuente de iones está
contaminada.
•
Limpie o reemplace los
componentes de la fuente de
iones. Consulte
Mantenimiento de la
fuente de iones en la
página 25.
•
Acondicione la fuente y el
extremo delantero:
a. Mueva la sonda APCI o TIS
a la posición más alejada
de la abertura (vertical y
horizontalmente).
b. Asegúrese de que el
calentador de la interfaz
está encendido.
c. Infunda o inyecte 50:50 de
metanol:agua con un
caudal de bomba de 1
mL/min.
d. En el software Analyst o
Analyst TF, ajuste TEM a
650, GS1 a 60 y GS2 a
60.
e. Ajuste el flujo Curtain
Gas a 45 o 50.
f.
El rendimiento de la fuente de iones La sonda no está optimizada.
ha disminuido.
Guía del operador
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Ejecútelo durante dos horas
como mínimo o
preferiblemente por la
noche para obtener
resultados óptimus.
®
Consulte TurboIonSpray
Optimización de la sonda en
la página 16 o Optimización
de la sonda APCI en la
página 21 .
Fuente de iones Turbo V™
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Consejos de solución de problemas
Síntoma
Posible causa
Acción correctiva
La muestra no se había preparado Confirme que la muestra estaba
correctamente o se ha degradado. preparada correctamente.
Hay una fuga en los conectores de •
entrada de muestras.
•
Se producen arcos o chispas.
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Compruebe que los conectores
estén apretados y reemplácelos
si las fugas continúan. No
apriete los adaptadores
demasiado.
Instale y optimice una fuente
de iones alternativa. Si el
problema no se soluciona,
póngase en contacto con un
representante del servicio
técnico.
La posición de la aguja de descarga Gire la aguja de descarga de la
de la corona no es correcta.
corona hacia la placa de chapa y
retírela de la corriente de gas del
calentador. Consulte Ajuste de
la posición de la aguja de
descarga de la corona en la
página 22.
Guía del operador
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Principios de funcionamiento.
Fuente de iones
A
®
Modo TurboIonSpray
La sonda TurboIonSpray utiliza dos calentadores turbo para inyectar nitrógeno caliente, seco y de UHP (ultra
alta pureza). La sonda se coloca en el centro entre los calentadores turbo, que están colocados en un ángulo
TM
de 45 grados a cada lado de la sonda. La combinación de IonSpray efluentes de y el gas seco caliente
procedente los calentadores turbo se proyecta a un ángulo de 90 grados a la abertura en la placa de chapa.
Solo los compuestos que se ionizan en el disolvente líquido se pueden generar como iones de fase gaseosa
en la fuente. La eficiencia y el índice de generación de iones dependen de las energías de solvatación de los
iones específicos. Los iones con energías de solvatación más baja son más proclives a evaporarse que los iones
con energías de solvatación más elevada.
La interacción entre IonSpray y los calentadores turbo ayuda a centrar la corriente y aumenta el índice de
evaporación de gotas, lo que da lugar a un aumento de la señal de iones. El gas caliente aumenta la eficiencia
de la evaporación de iones, lo que da lugar a una mayor sensibilidad y a la capacidad de manejar caudales
de muestras líquidas mayores.
Un flujo de alta velocidad de gas del nebulizador comparte gotas de la corriente de muestra líquida en la
entrada de IonSpray. Mediante la alta tensión variable aplicada al pulverizador, la fuente de iones aplica una
carga neta a cada gota. Esta carga facilita la dispersión de las gotas. Los iones de una sola polaridad son, de
manera preferente, atraídos por la alta tensión a las gotas cuando se separan de la corriente líquida. No
obstante, esta separación es incompleta y cada gota contiene muchos iones de ambas polaridades. En cada
gota predominan iones de una determinada polaridad y la diferencia entre el número de iones cargados
positivamente o negativamente da lugar a la carga neta. Solo el exceso de iones de la polaridad predominante
estará disponible para la evaporación de iones y solo una fracción de estos llega a evaporarse.
La polaridad y concentración del exceso de iones depende de la magnitud y la polaridad del potencial de alta
tensión que se aplique a la punta del pulverizador. Por ejemplo, cuando una muestra contiene arginina en
una solución de acetonitrilo y agua y se aplica un potencial positivo al pulverizador, el exceso de iones positivos
será H+ y arginina MH+.
La sonda puede generar iones con carga múltiple a partir de compuestos que tienen múltiples centros de
carga, tales como los péptidos y los oligonucleótidos. Esto resulta útil cuando se observan especies de elevado
peso molecular, donde las múltiples cargas producen iones con una relación masa/carga (m/z) dentro del rango
de masa del espectrómetro de masas. Esto permite determinaciones de peso molecular normal de los compuestos
en el rango de kiloDalton (kDa).
Como se muestra en la Figura A-1, cada gota cargada contiene disolvente e iones positivos y negativos,
pero con iones de una polaridad predominante. Como medio conductor, el exceso de cargas se encuentra en
la superficie de la gota. A medida que el disolvente se evapora, el campo eléctrico de la superficie de la gota
aumenta debido a que disminuye el radio de la gota.
Guía del operador
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Principios de funcionamiento. Fuente de iones
Figura A-1 Evaporación de iones
Elemento
Descripción
1
La gota contiene iones de ambas polaridades, pero una de ellas predomina.
2
A medida que el disolvente se evapora, el campo eléctrico aumenta y los iones se
desplazan a la superficie.
3
Con un determinado valor de campo crítico, los iones se desprenden de las gotas.
4
Los residuos no volátiles permanecen como partículas secas.
Si la gota contiene un exceso de iones y se evapora suficiente disolvente de la gota, se alcanza un campo
crítico en el que los iones se desprenden de la superficie. Al final todo el disolvente se evaporará de la gota,
dejando una partícula seca formada por componentes no volátiles de la solución de muestra.
Debido a que se desconocen las energías de solvatación de la mayoría de las moléculas orgánicas, resulta
difícil predecir las sensibilidades de un determinado ión orgánico para la evaporación de iones. La importancia
de la energía de solvatación es evidente debido a que los surfactantes que se concentran en la superficie de
un líquido se pueden detectar con mucha sensibilidad.
Modo APCI
La base para las antiguas incompatibilidades a la hora de vincular la cromatografía líquida con la espectrometría
de masas surgió a partir de las dificultades para convertir moléculas relativamente poco volátiles en solución
líquida en un gas molecular sin inducir una descomposición excesiva. El proceso de la sonda APCI, que consiste
en una nebulización sutil de la muestra en pequeñas gotas finamente dispersadas en un tubo cerámico
calentado, genera una rápida vaporización de la muestra de forma que las moléculas de esta no se
descompongan.
Figura A-2 se muestra el flujo de reacción del proceso de la ionización química a presión atmosférica (APCI)
+
para iones positivos reactivos (los hidratos de protón, H3O [H2O]n).
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Guía del operador
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Principios de funcionamiento. Fuente de iones
Figura A-2 Diagrama de flujo de la reacción APCI
+
+
+
+
Los iones primarios principales N2 , O2 , H2O y NO están formados por el impacto de los electrones creados
+
en la corona en los principales componentes neutros del aire. Aunque NO no es normalmente un componente
principal del aire limpio, la concentración de esta especie en la fuente se ha mejorado debido a reacciones
neutras iniciadas por la descarga de la corona.
Las muestras que introducen a través de la sonda APCI se pulverizan, con ayuda de un gas nebulizante, en el
tubo cerámico caliente. Dentro del tubo, las gotas finamente dispersadas de la muestra y el disolvente
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Principios de funcionamiento. Fuente de iones
experimentan una rápida vaporización con una descomposición térmica mínima. La sutil vaporización conserva
la identidad molecular de la muestra.
Las moléculas gaseosas del disolvente y la muestra se desplazan a la envoltura de la fuente de iones, donde
la ionización mediante APCI se induce a través de una aguja de descarga de la corona conectada al extremo
del tubo cerámico. Las moléculas de la muestra se ionizan al colisionar con los iones de reactivo creados por
la ionización de las moléculas de disolvente de fase móvil. Como se muestra en la Figura A-3, las moléculas
del disolvente vaporizadas se ionizan para producir los iones de reactivo [X+H]+ en el modo positivo y [X-H]–
en el modo negativo. Son estos iones de reactivo los que producen los iones estables de la muestra al colisionar
con las moléculas de la muestra.
Figura A-3 Ionización química a presión atmosférica
Elemento Descripción
1
Muestra
2
Los iones primarios se crean en las proximidades de la aguja de descarga de la corona
3
La ionización genera predominantemente iones de disolvente
4
Los iones de reactivo reaccionan con las moléculas de la muestra formando agrupamientos
5
Placa de chapa
6
Interfaz
x = moléculas del disolvente; M = moléculas de la muestra
Las moléculas de la muestra se ionizan mediante un proceso de transferencia de protones en el modo positivo
y mediante la transferencia de electrones o la transferencia de protones en el modo negativo. La energía del
proceso de ionización de APCI está dominada por la colisión debido a la presión atmosférica relativamente
alta de la fuente de API.
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Guía del operador
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Principios de funcionamiento. Fuente de iones
En aplicaciones de fase inversa, los iones de reactivo constan de moléculas de disolvente protonadas en el
modo positivo e iones de oxígeno solvatados en el modo negativo. Con una termodinámica favorable, la
adición de modificadores altera la composición de los iones de reactivo. Por ejemplo, la adición de modificadores
–
o tampones de acetato pueden convertir el ión acetato [CH3COO] en el reactivo primario en el modo negativo.
+
Los modificadores de amonio pueden convertir el amoniaco protonado [NH4] en el reactivo primario en el
modo positivo.
Mediante colisiones se consigue mantener una distribución equilibrada de ciertos iones (por ejemplo, iones
agrupados de agua protonada). La posibilidad de una fragmentación prematura de los iones de la muestra en
la fuente de iones es reducida debido a la moderada influencia de las agrupaciones del disolvente en los iones
de reactivo y la presión relativamente alta del gas en la fuente. Como resultado, el proceso de ionización
produce principalmente iones de producto moleculares para el análisis de masas en el espectrómetro de masas.
Región de ionización de APCI
En la Figura A-4 se muestra la ubicación general del reactor ión-molécula de la sonda APCI. Las líneas
inclinadas indican un reactor sin paredes. Se crea una corriente de iones de descarga de la corona de encendido
automático en el rango del microamperio como resultado del campo eléctrico entre la aguja de descarga y la
+
+,
placa de chapa. Los iones primarios, por ejemplo, N2 y O2 se crean mediante la pérdida de los electrones
que se originan en el plasma en las proximidades de la punta de la aguja de descarga. La energía de estos
electrones se modera mediante un número de colisiones con moléculas de gas antes de alcanzar una energía
donde su sección transversal de ionización efectiva les permite ionizar moléculas neutras con eficacia.
Figura A-4 Región de ionización de APCI
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Principios de funcionamiento. Fuente de iones
Elemento Descripción
1
Punta de la aguja de descarga
2
Flujo de muestra
3
Reactor sin paredes
4
Abertura de la placa de chapa
5
Curtain Gas suministro
6
Orificio
7
Placa del orificio
8
Tubo cerámico
TM
Los iones primarios, a su vez, generan iones intermedios que conducen a la formación de iones de muestra.
Los iones de la polaridad seleccionada son arrastrados bajo la influencia del campo eléctrico en la dirección
de la placa de chapa y a través de la barrera de gas hacia el analizador de masas. La totalidad del proceso de
formación de iones está dominado por la colisión debido a la relativamente alta presión atmosférica de la
sonda APCI. Excepto en las proximidades de la punta de la aguja de descarga, donde la fuerza del campo
eléctrico es mayor, la energía transmitida a un ión por el campo eléctrico es pequeña en comparación con la
energía térmica del ión.
Mediante las colisiones se consigue mantener una distribución equitativa de ciertos iones (por ejemplo, iones
agrupados de agua protonada). Cualquier exceso de energía que un ión pueda adquirir en el proceso de
reacción ión-molécula está termalizado. Mediante la estabilización por colisiones, muchos de los iones producto
se corrigen, aunque se produzcan muchas colisiones posteriormente. La formación de iones producto e iones
reactivos se rige por condiciones de equilibrio a una presión de funcionamiento (atmosférica) de 760 torr.
La sonda APCI funciona como un reactor sin paredes ya que los iones que se desplazan de la fuente a la cámara
de vacío y finalmente al detector nunca experimentan colisiones con una pared: solo colisiones con otras
moléculas. Los iones también se forman fuera de la fuente de APCI designada, pero no se detectan y finalmente
se neutralizan al interactuar con una superficie de pared.
La temperatura de la sonda es un factor importante en el funcionamiento de la sonda APCI. Para conservar
la identidad molecular, se debe establecer la temperatura con un valor lo bastante elevado como para que
garantice una rápida evaporación. A una temperatura de funcionamiento lo bastante elevada, las gotas se
vaporizan rápidamente de manera que las moléculas orgánicas se desorben de las gotas con una degradación
térmica mínima. Sin embargo, si se establece la temperatura con un valor demasiado bajo, el proceso de
evaporación será más lento y la pirolisis o descomposición puede producirse antes de que se complete la
vaporización. Si se utiliza la sonda APCI con temperaturas superiores a la temperatura óptima, se puede
provocar la descomposición térmica de la muestra.
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Tensiones y parámetros de la
fuente
B
En función de la fuente de iones que se instale en el espectrómetro de masas, hay disponibles para optimizarla
distintos parámetros dependientes de la fuente de iones concreta.
®
TurboIonSpray
parámetros para la sonda
La siguiente tabla muestra las condiciones de funcionamiento recomendadas para la sonda TurboIonSpray
TM
con tres caudales diferentes. Para cada caudal, el flujo de Curtain Gas debería ser lo más elevado posible.
La composición del disolvente empleado para la optimización fue 50:50 de agua:acetonitrilo. Estas condiciones
representan un punto de partida desde el que optimizar la sonda Utilizando un proceso iterativo, optimice los
parámetros utilizando el análisis de inyección de flujos para obtener la mejor señal o señal/ruido para en
compuesto de interés.
Tabla B-1 Optimización de parámetros para la sonda TurboIonSpray
Parámetros
LC flow caudal
Valores típicos
200 µL/min
1000 µL/min
5 µl/min a 3000 µl/min
Gas 1 (gasdel nebulizador) 20 psi a
40 psi
40 psi a 60 psi
40 psi a 60 psi
0 psi a 90 psi
Gas 2 (gas delcalentador)
0 psi
50 psi
50 psi
0 psi a 90 psi
Curtain Gas supply
20 psi
20 psi
20 psi
20 psi a 50 psi
Temperature*
0 °C a
200 °C
200 °C a 650 °C
400 °C a 750 °C
Hasta 750 °C
Declustering Potential (DP) Positivo: 70 Positivo: 70 V
**
V
Negativo -70 V
Negativo -70
V
Positivo: 70 V
Negativo -70 V
Positivo: 0 V a 400 V
Negativo: -400 V a 0
V
Probe vertical micrometer
setting
7 a 10
2a5
0a2
0 a 13
Probe vertical micrometer
setting
4a6
4a6
4a6
0 a 10
TM
5 µl/min a
50 µl/min
Intervalo
operativo
* Los valores de temperatura óptimos dependen de la composición de la fase móvil y el compuesto (el
contenido más acuoso requiere una temperatura mayor). Cero (0) significa que no se aplica temperatura.
** Los valores de DP dependen del compuesto.
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Tensiones y parámetros de la fuente
Parámetros para la sonda APCI
Tabla B-2 Optimización de parámetros para la sonda APCI
Parámetro
Valor típico
Intervalo operativo
LC flow caudal
1000 µL/min
200 µl/min a 2000 µl/min
Gas 1 (gas del nebulizador)
30
0 a 90
Curtain Gas supply
20
20 a 50
Temperature*
400 ºC
100 ºC a 750 ºC
Nebulizer Current (NC)
Positivo: 3
Positivo: 0 a 5
Negativo: -3
Negativo: -5 a 0
Positivo: 60 V
Positivo: 0 V a 300 V
Negativo: -60 V
Negativo: -300 V a 0 V
4 mm
Escala de 0 mm a 13 mm
TM
Declustering Potential (DP)
Probe vertical micrometer setting
* El valor de la temperatura depende del compuesto.
Descripciones de parámetros
Tabla B-3 Parámetros dependientes de la fuente de iones
Parámetro
Descripción
®
Ion Source Gas 1
(GS1)
Controla el gas nebulizador para las sondas TurboIonSpray y APCI. Consulte
Principios de funcionamiento. Fuente de iones en la página 37.
Ion Source Gas 2
(GS2)
Controla el gas del calentador para la sonda TurboIonSpray. La mejor sensibilidad se
obtiene cuando la combinación de la temperatura (TEM) y el caudal del gas del
calentador (GS2) provoca que el disolvente de LC alcance un punto en el que esté
casi todo vaporizado. Para optimizar GS2, aumente el flujo para obtener la mejor
señal o relación señal/ruido si se produce un incremento significativo en el ruido de
fondo. Un flujo de gas demasiado elevado puede producir una señal ruidosa o
inestable. Consulte Principios de funcionamiento. Fuente de iones en la
página 37.
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Tensiones y parámetros de la fuente
Tabla B-3 Parámetros dependientes de la fuente de iones (continuación)
Parámetro
Curtain Gas (CUR)
Descripción
TM
Controla el flujo de gas hacia la interfaz Curtain Gas . La interfaz Curtain Gas se
ubica entre la placa de chapa y el orificio. Evita que el aire ambiente y las gotas de
disolvente entren y contaminen la óptica iónica, al tiempo que permite dirigir los iones
de muestra a la cámara de vacío mediante los campos eléctricos generados entre la
interfaz de vacío y la aguja de pulverización. La contaminación de la óptica de entrada
de iones reduce, por tanto, la transmisión Q0, la estabilidad y la sensibilidad, y aumenta
el ruido de fondo.
Mantenga el flujo de Curtain Gas tan alto como sea posible sin perder sensibilidad.
Temperature (TEM)
Controla el calor aplicado a la muestra para vaporizarla. La temperatura óptima es
la temperatura más baja a la que la muestra se vaporiza completamente.
Optimice en incrementos de 50 °C.
Temperature (TEM) - Controla la temperatura del gas del calentador en la sonda TurboIonSpray.
TurboIonSpray probe
La mejor sensibilidad se obtiene cuando la combinación de la temperatura (TEM) y
el caudal del gas del calentador (GS2) provoca que el disolvente de LC alcance un
punto en el que esté casi todo vaporizado.
A medida que el contenido orgánico del disolvente aumenta, debe disminuir la
temperatura de sonda óptima. Con disolventes formados al 100 % por metano o
acetonitrilo, el rendimiento de la sonda se puede optimizar a un nivel tan bajo como
300 °C. Los disolventes acuosos formados al 100 % por agua con caudales de
aproximadamente 1000 µl/min requieren una temperatura de sonda máxima de
750 °C.
Si la temperatura se fija demasiado baja, la vaporización será incompleta y se
expulsarán gotas grandes y visibles a la envoltura de la fuente de iones.
Si se fija una temperatura demasiado elevada, el disolvente se puede vaporizar
prematuramente en la punta de la sonda TurboIonSpray, especialmente si la sonda
se ha fijado demasiado baja (de 5 mm a 13 mm).
Temperature (TEM) - Controla la temperatura de la sonda APCI
APCI probe
A medida que el contenido orgánico del disolvente aumenta, debe disminuir la
temperatura de sonda óptima. Con disolventes formados al 100 % por metano o
acetonitrilo, el rendimiento de la sonda se puede optimizar a temperaturas tan bajas
como 400 °C en caudales de 1000 µl/min. Los disolventes acuosos formados al 100 %
por agua ajustados a flujos de aproximadamente 2000µl/min requieren una
temperatura de sonda mínima de 700 °C.
Si la temperatura se fija demasiado baja, la vaporización será incompleta y se
expulsarán gotas grandes y visibles a la envoltura de la fuente de iones.
Si se fija una temperatura demasiado elevada, se produce la degradación térmica de
la muestra.
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Tensiones y parámetros de la fuente
Tabla B-3 Parámetros dependientes de la fuente de iones (continuación)
Parámetro
Descripción
Nebulizer Current
(NC)
Controla la corriente que se aplica a la aguja de descarga de la corona en la sonda
APCI. La descarga ioniza moléculas del disolvente que, a su vez, ionizan las moléculas
de la muestra. En el caso de la sonda APCI, la corriente aplicada a la aguja de descarga
de corona (NC) se suele optimizar en un intervalo amplio (entre 1 mA y 5 mA en modo
positivo). Para optimizarla, comience por el valor 1 y aumente hasta alcanzar la mejor
señal o relación señal/ruido. Si, al aumentar la corriente, no se observan cambios en
la señal, deje la corriente en la configuración más baja que proporcione la mejor
sensibilidad (por ejemplo, 2mA).
IonSpray Voltage
Floating (ISVF)
controla la tensión aplicada al pulverizador en la TurboIonSpray sonda, que ioniza
la muestra en la fuente de iones. Depende de la polaridad y afecta a la estabilidad
de la pulverización y a la sensibilidad.
o bien,
IonSpray Voltage (IS)
Calentador de
interfaz (ihe)
Este parámetro siempre está activado para los sistemas 3500, 4500, 5500, 6500 y
®
TripleTOF .
El parámetro ihe enciende y apaga el calentador de la interfaz. Calentar la interfaz
ayuda a maximizar la señal de iones y evita la contaminación de la óptica iónica. A
menos que el compuesto que esté analizando sea extremadamente frágil, se
recomienda al usuario que caliente la interfaz.
Posición de la sonda
La posición de la sonda puede afectar a la sensibilidad del análisis. Consulte Optimización de la fuente
de iones en la página 15 para obtener más información sobre cómo optimizar la posición de la sonda.
Composición de los disolventes
La concentración estándar del formato de amonio o el acetato de amonio es de 2 mmol/l a 10 mmol/l para
iones positivos y de 2 mmol/l a 50 mmol/l para iones negativos. La concentración de ácidos orgánicos es de
®
0,1 % a 0,5 % por volumen para la sonda TurboIonSpray y de 0,1 % a 2,0 % por volumen para la sonda
APCI.
Los disolventes empleados habitualmente son:
•
Acetonitrilo
•
Metanol
•
Propanol
•
Agua
Los modificadores empleados habitualmente son:
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Guía del operador
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Tensiones y parámetros de la fuente
•
Ácido acético
•
Ácido fórmico
•
Formato de amonio
•
Acetato de amonio
Los siguientes modificadores no se utilizan habitualmente porque complican el espectro con sus mezclas de
iones y combinaciones de agrupamientos. También pueden suprimir la fuerza de la señal de iones del compuesto
objetivo:
•
Trietilamina (TEA)
•
Fosfato sódico
•
Ácido trifluoroacético (TFA)
•
Dodecilsulfato de sodio
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C
Consumibles y repuestos
TM
En las siguientes tablas se enumeran las piezas que se pueden solicitar para la fuente de iones Turbo V .
Tabla C-1 Consumibles
Referencia
Descripción
Cantidad
cm
Detalles
016316
TUBO* diámetro exterior de
0,0625 y calibre de 0,005
016325
CONECTOR*PEEK 10-32 y
0,0625 PULG.
016485
TUBO* PEEK con diámetro
exterior de 0,0625 y diámetro
interior de 0,0025 pulgadas
cm
Tubo PEEK marrón claro (calibre de
0,0025 pulgadas)
019675
CONECTOR*INSERCIÓN EN
FORMA DE T, CALIBRE DE 0,25
1
Inserción en forma de T (calibre de
0,25 mm)
027950
ELECTRODO*N
1
Electrodo APCI
027953
ELECTRODO*T
1
electrodo TurboIonSpray
1
Tubo PEEK rojo (calibre de
0,005 pulgadas)
Conector PEEK marrón
®
Tabla C-2 Repuestos
Referencia
Descripción
Cantidad
Detalles
027947
FRU*KIT AGUJA NEB
1
Aguja de descarga de la corona
027950
FRU*KIT ELECTRODO NEB
1
Juego de electrodos APCI
1003263
FUSIBLE*4 A 250 V 5 X 20 GRAN
RETARDO
1
Fusible F3 T4 A 250 V, 5 ×20 mm
retardo de tiempo (No se utiliza para
®
sistemas TripleTOF ).
027460
OPT*CONJ. NEB
1
Conjunto de la sonda APCI. Consulte
la Figura C-3.
027461
OPT*CONJ. TURBO
1
conjunto de sonda TurboIonSpray.
Consulte la Figura C-2.
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Consumibles y repuestos
Figura C-1 Tubo PEEK rojo
Figura C-2 Conjunto de sonda TurboIonSpray (referencia 027461)
Figura C-3 Conjunto de sonda APCI (referencia 027460)
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Descripción del cambio
Primera publicación del documento.
Fecha
Julio de 2014
Guía del operador
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Índice
instalar la sonda 13
mantenimiento preventivo 25
materiales necesarios, mantenimiento 26
métodos en ejecución 17, 21
optimización 15
sistema de escape de la fuente, descrita 11
su identificación en el software 12
A
ajustamiento, punta del electrodo 30
asistencia técnica requisitos
C
Caudal de Curtain Gas
caudal y ruido de fondo 20
circuito detector, fuente de iones 10
componentes
fuente de iones 6
sonda APCI 9
sonda TurboIonSpray 8
conexión, tubo de muestra 14
conexiones
gas y electricidad, fuente de iones 10
contenido orgánico y temperatura de sonda 17
corriente nebulizante, optimización 24
D
descarga de corona, causas de la 20
disolventes
composición de 46
E
evaporación de iones, descrita 38
extraer
fuente de iones 27
F
fuente de iones
circuito detector de fuente de iones, descrito 10
componentes de 6
conexión del ajuste de muestras 14
conexiones 10
configuración del sistema 17, 21
consejos de optimización 20
extraer 27
instalación, materiales necesarios 12
instalar 14
Guía del operador
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G
gas del nebulizador
optimización 19
I
instalación
sondas 13
instalar
fuente de iones 14
inyección de corriente de muestra 15
ionización química a presión atmosférica, descrita 40
L
limpiar
tubo del electrodo 28
limpieza
sondas 26
M
mantenimiento
fuente de iones, preventivo 25
materiales necesarios
instalación de la fuente de iones 12
métodos
en ejecución 17, 21
O
optimización
consejos para optimizar la fuente de iones 20
corriente nebulizante 24
fuente de iones 15
Fuente de iones Turbo V™
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Índice
gas del nebulizador 19
parámetro GS1 19
parámetro GS2 19
parámetros de gas y caudal de Curtain Gas 22
posición de la sonda APCI 23
sonda TurboIonSpray 16
temperatura del calentador turbo 20
tensiones 20
optimizar
posición de la sonda TurboIonSpray 18
temperatura de sonda APCI 24
P
Parámetro Curtain Gas
definido 45
Parámetro GS1
optimización 19
parámetro GS2
definición 44
Parámetro GS2
optimización 19
Parámetro ihe, definido 46
Parámetro IS, definido 46
Parámetro ISVF, definición 46
Parámetro NC, definido 46
parámetro TEM, definición 45
parámetros
configuración de las condiciones iniciales 18, 22
parámetros, optimización 19
sonda APCI 44
parámetros de gas
optimización 19, 22
piezas componentes
punta del electrodo
ajustamiento 30
partes de 31
R
reemplazo
tubo de muestra 33
retirar
sondas de la fuente de iones 27
S
sistema de escape de la fuente, descrita 11
software
identificación de la fuente de iones 12
Fuente de iones Turbo V™
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Sonda ACPI
piezas de la 28
sonda APCI
descripción general 8
parámetros 44
región de ionización 42
Sonda APCI
colocación 23
componentes 9
configuración del sistema 17, 21
corriente nebulizante, optimización 24
optimización de la temperatura de sonda 24
parámetros de gas y caudal de Curtain Gas,
optimización 22
posición de la sonda, optimización 23
principios de funcionamiento 38
sonda TurboIonSpray
descripción general 8
parámetros 43
Sonda TurboIonSpray
componentes 8
optimización 16
optimizar la posición de la sonda 18
principios de funcionamiento 37
temperatura del calentador turbo, optimización 20
tensiones, optimización 19
sondas
caudal y temperatura 17
extraer 27
instalación 13
limpieza 26
optimización de la sonda TurboIonSpray 16
optimización de tensiones 19
parámetros 43
piezas de la sonda APCI 28
selección 7
sonda APCI, descripción general 8
sonda TurboIonSpray, descripción general 8
temperatura de sonda APCI, optimización 24
temperatura del calentador turbo, optimización 20
uso de 5
T
temperatura
temperatura de sonda APCI, optimización 24
temperatura del calentador turbo, optimización 20
tensiones, optimización 20
TIS Sonda TurboIonSpray
Guía del operador
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Índice
tubo de muestra
bloqueos 33
reemplazo 33
tubo de muestra, conexión 14
tubo de muestra, limpieza 27
tubo del electrodo
frecuencia de limpieza 28
limpieza 28
Guía del operador
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Fuente de iones Turbo V™
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