3M Petrifilm™ Salmonella Express Plates, Petrifilm™ Salmonella Express Confirmation Disk Operating instructions

3M Petrifilm™ Salmonella Express Plates, Petrifilm™ Salmonella Express Confirmation Disk Operating instructions
6536/6537/6538/6539
Product Instructions
EN Salmonella Express System
ES Sistema Salmonella Express
SALX
Salmonella Express
RAPID
EN (English)
Issue Date: 2018-03
Product Instructions
Salmonella Express System
Product Description and Intended Use
The 3M™ Petrifilm™ Salmonella Express (SALX) System is used for the rapid qualitative detection and biochemical
confirmation of Salmonella species in enriched food and food process environmental samples. The 3M Petrifilm SALX
System consists of the 3M™ Salmonella Enrichment Base, the 3M™ Salmonella Enrichment Supplement, the 3M™
Petrifilm™ Salmonella Express (SALX) Plate, and the 3M™ Petrifilm™ Salmonella Express (SALX) Confirmation Disk,
which are all packaged separately.
The 3M Petrifilm SALX Plate is a sample ready-to-use chromogenic culture medium system that contains a cold-watersoluble gelling agent and is selective and differential for Salmonella, providing a presumptive result. The 3M Petrifilm
SALX Confirmation Disk contains a biochemical substrate that facilitates the biochemical confirmation of Salmonella
organisms.
The 3M Petrifilm SALX Plate is used with or without the 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk. The 3M Petrifilm SALX
Confirmation Disk may be used only in conjunction with the 3M Petrifilm SALX Plate.
The 3M Petrifilm SALX System is intended for use in a laboratory environment by professionals trained in laboratory
techniques. 3M has not documented the use of this product in industries other than food. For example, 3M has
not documented this product for testing water, pharmaceutical, cosmetic, clinical or veterinary samples. The 3M
Petrifilm SALX System has not been evaluated with all possible food products, food processes and food processing
environments, testing protocols or with all possible strains of bacteria and may not detect all Salmonella strains. 3M has
not validated the 3M Petrifilm SALX System using composite samples.
As with all test methods, the enrichment medium formulation can influence the results. The 3M Petrifilm SALX Plate has
only been evaluated for use with the 3M Salmonella Enrichment Base, the 3M Salmonella Enrichment Supplement, and
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) Broth (typical formulation of R-V R10 broth follows below):
Typical Formula
Magnesium chloride (anhydrous)
Sodium chloride
Casein peptone
Monopotassium phosphate
Malachite green
Demineralized water
pH 5.1 ± 0.2 @ 25°C
13.4 grams
7.2 grams
4.54 grams
1.45 grams
0.036 grams
1000.0 mL
Adjust pH as required to meet performance standards.
3M Petrifilm SALX Plate and 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk components are decontaminated though not
sterilized. 3M Food Safety is certified to International Organization for Standardization (ISO) 9001 for design and
manufacturing. 3M Petrifilm SALX Plate and 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk have not been evaluated with all
possible food products, food processes, testing protocols or with all possible microorganism strains.
Safety
The user should read, understand, and follow all safety information in the instructions for the 3M Petrifilm SALX System.
Retain the safety instructions for future reference.
WARNING: Indicates a hazardous situation, which, if not avoided, could result in death or serious injury and/or
property damage.
NOTICE:
Indicates a potentially hazardous situation, which, if not avoided, could result in property damage.
1
EN (English)
W WARNING
Do not use the 3M Petrifilm SALX System in the diagnosis of conditions in humans or animals.
3M Petrifilm SALX System will not specifically differentiate some lactose positive Salmonella sp. (primarily S.
arizonae and S. diarizonae) from other lactose positive organisms. Lactose positive Salmonella strains will appear
as non-Salmonella (blue colonies, green colonies, blue to green colonies, and/or black colonies with or without a
yellow zone and/or associated gas bubble). It has been stated that these strains account for less than 1% of the total
Salmonella serotypes1.
The user must train its personnel in current proper testing techniques: for example, Good Laboratory Practices2 or
ISO 170253 or ISO 72184.
To reduce the risks associated with a false negative result leading to the release of contaminated product and/or the
possibility of false positive results requiring a retest:
• Upon each plate use, verify hydrated 3M Petrifilm Salmonella Express Plate for any gel discoloration.
• Do not use 3M Petrifilm Salmonella Express Plate that show discoloration.
• Always use the 3M Petrifilm SALX System before the expiration date.
• Use the 3M Petrifilm SALX System with food samples and food process environmental samples that have been
validated either by the user or by a third party.
• Use the 3M Petrifilm SALX System only with surfaces, neutralizing buffers, and protocols that have been validated
either by the user or by a third party.
• Store the 3M Petrifilm SALX System as indicated on the package and in the product instructions.
• Follow the procedures and perform the tests exactly as stated in the product instructions.
• Always use a permanent, ultra fine tip marker to circle the characteristic presumptive Salmonella colonies on the
top film before placing the 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk onto the gel.
To reduce the risks associated with exposure to chemicals and biohazards:
• Perform pathogen testing in a properly equipped laboratory under the control of trained personnel.
• Always follow standard good laboratory safety practices (GLP)2, including proper containment procedures, wearing
appropriate protective apparel and eye protection while handling testing materials and test samples.
• Avoid direct contact with the contents of the enrichment medium and inoculated plates.
• Dispose of enrichment media and inoculated plates according to all applicable government, regulatory regulations
and applicable laboratory procedures.
• Wear appropriate protective apparel while handling the 3M Petrifilm SALX Plate as some of the components may be
considered allergenic and irritants to some individuals.
To reduce the risks associated with environmental contamination:
• Follow current industry standards and local regulations for disposal of contaminated waste.
NOTICE
3M Petrifilm SALX System does not differentiate any one Salmonella strain from another.
Consult the Safety Data Sheet for additional information.
For information on documentation of product performance, visit our website at www.3M.com/foodsafety or contact
your local 3M representative or distributor.
User Responsibility
Users are responsible for familiarizing themselves with product instructions and information. Visit our website at
www.3M.com/foodsafety, or contact your local 3M representative or distributor for more information.
When selecting a test method, it is important to recognize that external factors such as sampling methods, testing
protocols, sample preparation, handling, and laboratory technique may influence results.
It is the user’s responsibility in selecting any test method or product to evaluate a sufficient number of samples with the
appropriate matrices and microbial challenges to satisfy the user that the chosen test method meets the user’s criteria.
It is also the user’s responsibility to determine that any test methods and results meet its customers’ and suppliers’
requirements.
As with any test method, results obtained from use of any 3M Food Safety product do not constitute a guarantee of the
quality of the matrices or processes tested.
2
EN (English)
Limitation of Warranties / Limited Remedy
EXCEPT AS EXPRESSLY STATED IN A LIMITED WARRANTY SECTION OF INDIVIDUAL PRODUCT PACKAGING, 3M
DISCLAIMS ALL EXPRESS AND IMPLIED WARRANTIES, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO, ANY WARRANTIES OF
MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR USE. If any 3M Food Safety Product is defective, 3M or its
authorized distributor will, at its option, replace or refund the purchase price of the product. These are your exclusive
remedies. You must promptly notify 3M within sixty days of discovery of any suspected defects in a product and return
it to 3M. Please call Customer Service (1-800-328-1671 in the U.S.) or your official 3M Food Safety representative for a
Returned Goods Authorization.
Limitation of 3M Liability
3M WILL NOT BE LIABLE FOR ANY LOSS OR DAMAGES, WHETHER DIRECT, INDIRECT, SPECIAL, INCIDENTAL OR
CONSEQUENTIAL DAMAGES, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO LOST PROFITS. In no event shall 3M’s liability under
any legal theory exceed the purchase price of the product alleged to be defective.
Storage
Plate storage
Upon receipt, store unopened 3M Petrifilm SALX Plate pouches at 2 to 8ºC. They are sensitive to both moisture and
light. Just prior to use, allow unopened pouches to come to room temperature (20 - 25°C / <60% RH) before opening.
Return unused 3M Petrifilm SALX Plates to pouch. To prevent exposure to moisture, store opened 3M Petrifilm SALX
Plate pouches in a sealed bag, protected from light, at -20 to -10°C for no longer than 4 weeks.
Confirmation Disk storage
3M Petrifilm SALX Confirmation Disks are individually packaged within a foil pouch. They are sensitive to both moisture
and light. Store unopened pouches of 3M Petrifilm SALX Confirmation Disks at 2 to 8ºC. Remove only those individually
packaged 3M Petrifilm SALX Confirmation Disks that will be used immediately and store the remaining 3M Petrifilm
SALX Confirmation Disks in the foil pouch by folding the end of the pouch over and applying adhesive tape. To prevent
exposure to moisture, do not refrigerate opened 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk pouches. Store resealed
pouches in a cool (20-25°C) dry place (less than 60% RH) for no longer than 4 weeks or placed resealed pouches in a
re-sealable storage bag and store at -20 to -10°C for no longer than 5 months.
Do not use 3M Petrifilm SALX Plates that show discoloration after hydration. Do not use 3M Petrifilm SALX
Confirmation Disks that show discoloration. Expiration date and lot number are noted on each package of 3M Petrifilm
SALX Plates and 3M Petrifilm SALX Confirmation Disks. The lot number is also noted on individual plates and on
individual confirmation disk packages.
Disposal
After use, 3M Petrifilm SALX Plates and 3M Petrifilm SALX Confirmation Disks may contain microorganisms that may
be a potential biohazard. Follow current industry standards and local regulations for disposal of contaminated waste.
Consult the Safety Data Sheet for additional information.
Instructions for Use
Follow all instructions carefully. Failure to do so may lead to inaccurate results.
Wear appropriate protective apparel and follow standard good laboratory safety practices (GLP)2.
Sample Enrichment
Foods
Tables 1 and 2 present guidance for test matrix samples. It is the user’s responsibility to validate alternate sampling
protocols (e.g., compositing) or dilution ratios to ensure this test method meets the user’s criteria.
For Low Microbial Load Foods:
Low microbial load foods have a total aerobic colony count of ≤ 104 colony forming units/gram. Examples include:
pasteurized, cooked, or processed foods.
1.
Pre-warm 3M Salmonella Enrichment Base with the added 3M Salmonella Enrichment Supplement to 41.5 ± 1.0°C
(see Tables 1 and 2).
2. Aseptically combine the enrichment medium and sample. For all meat and highly particulate samples, the use of
stomacher filter bags is recommended. Homogenize thoroughly for 2 minutes. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 18-24
hours (see Tables 1 and 2).
3
EN (English)
For High Microbial Load Foods:
High microbial load foods have a total aerobic colony count of > 104 colony forming units/gram and require the use of
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) Broth. Examples include: raw, unprocessed foods.
1.
Pre-warm 3M Salmonella Enrichment Base with the added 3M Salmonella Enrichment Supplement to 41.5 ± 1.0°C
(see Tables 1 and 2).
2. Aseptically combine the enrichment medium and sample. For all meat and highly particulate samples, the use of
stomacher filter bags is recommended. Homogenize thoroughly for 2 minutes. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 18-24
hours (see Tables 1 and 2).
3. After primary enrichment incubation, transfer 0.1 mL of the primary enrichment into 10.0 mL Rappaport-Vassiliadis
R10 (R-V R10) Broth. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 8-24 hours.
Environmental samples
For sample collection, use a biocide-free cellulose sponge hydrated with Dey-Engley (D/E) Neutralizing Broth. Following
user established procedures, remove any remaining D/E Neutralizing Broth residue from the sampled surface.
The recommended size of the sampling area to verify the presence or absence of the pathogen on the surface is 100 cm2
(10 cm x 10 cm or 4 in. x 4 in.)5. When sampling with a sponge, cover the entire area going in two directions (left to right
then up and down).
1.
Pre-warm 3M Salmonella Enrichment Base with the added 3M Salmonella Enrichment Supplement to 41.5 ± 1.0°C
(see Tables 1 and 2).
2. Aseptically combine the enrichment medium and sample. Mix thoroughly. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 18-24 hours.
3. If the environmental sample has a high microbial load (total aerobic colony count of > 104 colony forming
units/sample), then after primary enrichment incubation, transfer 0.1 mL of the primary enrichment into 10.0 mL
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) Broth. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 8-24 hours.
4. If the environmental sample has a low microbial load (total aerobic colony count of ≤ 104 colony forming
units/sample), then step 3 can be skipped.
AOAC® Official Method of AnalysisSM (OMA) 2014.01
AOAC® Performance TestedSM (PTM) Certificate #061301
In AOAC Research Institute OMASM and PTMSM studies, the 3M Petrifilm SALX System was found to be an effective
method for the detection of Salmonella. The matrices tested in these studies are shown in Table 1. The limit of detection
of the 3M Petrifilm SALX System method is 1-5 colony forming units per validated test portion size (in Table 1).
4
EN (English)
Table 1: Sample Enrichment Protocols according to AOAC OMASM 2014.01 and AOAC PTMSM Certificate #061301
Test
Matrix
Raw
ground
beef, raw
ground
pork, raw
ground
chicken
Primary Enrichment
Secondary Enrichment
High
Sample Enrichment
Microbial
Temperature Enrichment Enrichment Temperature Enrichment
Size
Volume
Load
(±1.0°C)
Time (hour)
Medium
(±1.0°C)
Time (hour)
(mL)
225
R-V R10
Broth:
0.1 mL into
10.0 mL
41.5
8-24
25 g
225
R-V R10
Broth:
0.1 mL into
10.0 mL
41.5
8-24
Pasteurized liquid
whole egg
100 g
900
Dry dog
food
375 g
3375
Frozen,
uncooked
shrimp
Fresh,
bunched
spinach
✓
✓
✓
25 g
25 g
225
Environmental –
stainless
steel
surface
(100 cm2
sample
size)
1
Sponge
225
Cooked
chicken
nuggets
25 g
225
Not required for low microbial load
foods.
41.5
18-24
Not required for low microbial load
foods.
R-V R10
Broth:
0.1 mL into
10.0 mL
41.5
24
Not required for low microbial load
samples.
5
EN (English)
For other matrices:
Table 2: Sample Enrichment Protocols
Test
Matrix
Foods:
Raw
Meat,
Poultry,
Seafood
and Fish
High
Microbial
Load
✓
Animal
Feed
Primary Enrichment
Secondary Enrichment
Sample Enrichment
Temperature Enrichment Enrichment Temperature Enrichment
Size
Volume
(±1.0°C)
Time (hour)
Medium
(±1.0°C)
Time (hour)
(mL)
25 g
225
375 g
3375
Foods:
Produce
✓
25 g
225
Environmental
*
1
Sponge
225
Other
Foods
*
R-V R10
Broth:
0.1 mL into
10.0 mL
41.5
8-24
Not required for low microbial load
foods.
41.5
18-24
R-V R10
Broth:
0.1 mL into
10.0 mL
41.5
8-24
Not required for low microbial load
samples.
Follow appropriate
reference method
for sample size and
enrichment volume
* Some environmental and other food samples may have a high microbial load and require the use of R-V R10 secondary
enrichment.
Plate Hydration
1. Use prescribed sterile diluents to hydrate the 3M Petrifilm SALX Plates:
Butterfield’s Phosphate Diluent, distilled water, or reverse osmosis water.
2. Place the 3M Petrifilm SALX Plate on a flat, level surface (figure A).
3. Lift the top film and with the pipette perpendicular dispense 2.0 mL ± 0.1 mL of sterile diluent onto the center of
bottom film (figure B). Do not close the top film before dispensing the entire 2.0 mL volume.
4. Gently roll down the top film onto the diluent to prevent trapping air bubbles (figure C).
5. Place the 3M™ Petrifilm™ Flat Spreader (Catalog #6425) on the center of the plate. Press gently on the center of
the spreader to distribute the diluent evenly. Spread the diluent over the entire 3M Petrifilm SALX Plate growth area
before the gel is formed. Do not slide the spreader across the film (figure D).
6. Remove the spreader and do not disturb the 3M Petrifilm SALX Plate for at least 1 minute.
7.
Place 3M Petrifilm SALX Plate on a flat surface for at least 1 hour at room temperature (20-25°C / <60% RH),
protected from light, to allow the gel to form. Hydrated 3M Petrifilm SALX Plates can be stored at room temperature
(20-25°C / <60% RH) protected from light, for up to 8 hours before use. If hydrated 3M Petrifilm SALX Plates will
not be used within 8 hours, store them in a sealed plastic bag. Protect 3M Petrifilm SALX Plates from light and store
at -20 to -10°C for up to 5 days.
8. After 3M Petrifilm SALX Plates are removed from storage, allow them to warm to room temperature before use.
Plate Inoculation
1. Remove the enrichment medium from the incubator and agitate contents by hand.
2. Use a sterile 10 µL loop (3 mm diameter) to withdraw each sample. Use a smooth loop (one that does not have
jagged edges and is not distorted) to prevent the gel surface from breaking.
3. Open the 3M Petrifilm SALX Plate and streak onto the gel (figure E). Perform a single streak to obtain isolated
colonies (Figure 1).
6
EN (English)
Inicio
Final
Figure 1: Streaking pattern on the 3M Petrifilm SALX Plate
4. Roll down the top film to close the 3M Petrifilm SALX Plate.
5. Using a gloved hand (while practicing good laboratory practices to avoid cross contamination and/or direct contact
with the plate), gently apply a sweeping motion with even pressure onto the top film to remove any air bubbles in the
inoculation area (figure F).
Plate Incubation
Incubate plates at 41.5 ± 1.0°C for 24 hours ± 2 hours in a horizontal position with the colored side up in stacks of no
more than 20 plates.
ttern_FS.aiInterpretation
1. Remove the 3M Petrifilm SALX Plates from the incubator and proceed with visually reading the results.
This artwork has been
2. Using indirect back lighting may enhance
of colony
createdreading
as requested
by 3M. color, discrete yellow zones, and gas bubbles
3M is responsible for the
associated with a colony.
artwork AS APPROVED and
3. For interpretation, visually examine theassumes
isolated
See Table 3. Do not count artifact bubbles that may be
fullcolonies.
responsibility
for its correctness.
present.
4. Presumptive positive Salmonella species are red to brown colonies with a yellow zone or associated gas bubble, or
both (figure G). An associated gas bubble is defined as being located within one colony diameter distance from the
colony (see Table 3 below).
Table 3: Interpretation for Presumptive Positive Salmonella species
Colony Color
Red
Dark
Red
Colony Metabolism
Brown
✓
Yellow
zone
Result
Gas bubble
✓
✓
✓
✓
✓
Presumptive +
✓
Presumptive +
✓
Presumptive +
✓
✓
✓
✓
✓
✓
Presumptive +
✓
Presumptive +
✓
✓
✓
Presumptive +
✓
Presumptive +
✓
Presumptive +
✓
Presumptive +
Non-Salmonella species (figure H):
• Blue colonies, green colonies, blue to green colonies, and/or black colonies with or without a yellow zone and/or
associated gas bubble are non-Salmonella organisms.
• Red, dark red, and brown colonies with no yellow zone and no associated gas are non-Salmonella organisms.
• Red, dark red, and brown colonies with a magenta zone are non-Salmonella organisms.
7
EN (English)
If presumptive positive Salmonella colonies are not present, then Salmonella organisms were not detected in the matrix.
Presumptive Salmonella species:
If presumptive positive Salmonella colonies are present, then perform the following steps and continue to the
Biochemical Confirmation step:
a. On the 3M Petrifilm SALX Plate top film, circle a minimum of five isolated presumptive positive Salmonella
colonies (if present) using a permanent, ultra fine tip marker (figure I).
b. Biochemically confirm all Salmonella presumptive positive results using the 3M Petrifilm SALX Confirmation
Disk. See the Biochemical Confirmation section.
c.
If the 3M Petrifilm SALX Plates cannot be analyzed within 1 hour of removal from the incubator, first circle the
presumptive Salmonella colonies on the top film by using a permanent, ultra fine tip marker and then place
the plates in a sealed plastic bag for later analysis. Protect 3M Petrifilm SALX Plates from light and store at -20
to -10°C for no longer than 72 hours. Allow plates to warm to room temperature (20-25°C / <60% RH) before
adding the disk to the plate.
WARNING: To reduce the risks associated with a false-negative result leading to the release of contaminated
product and the possibility of false positive results requiring a retest, always use a permanent, ultra fine tip marker
to circle the characteristic presumptive Salmonella colonies on the top film of the 3M Petrifilm SALX Plate before
appropriate storage of the plate and/or before placing the 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk onto the gel.
Biochemical Confirmation
1.
Perform good laboratory practices to avoid cross contamination and/or direct contact with the 3M Petrifilm SALX
Plate and/or 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk.
2. Remove an individually packaged 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk from its pouch and allow it to come to
room temperature (20-25°C / <60% RH). Then remove the 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk from its individual
package by peeling the package to expose the 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk’s tab, grasping the tab, and
removing the 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk.
3. Lift the top film (with the already circled presumptive Salmonella colonies) of the 3M Petrifilm SALX Plate and insert
the 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk by rolling it onto the gel to avoid entrapping air bubbles (figure J). Close
the 3M Petrifilm SALX Plate.
4. Using a gloved hand, gently apply a sweeping motion with even pressure onto the top film to remove any air bubbles
in the inoculation area and assure good contact between the gel and the 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk
(figure K).
5. Incubate the 3M Petrifilm SALX System (plate and disk) at 41.5 ± 1.0°C for 4 - 5 hours in a horizontal position, right
side up, no higher than 20 plates.
6. Remove the 3M Petrifilm SALX System from the incubator and proceed with reading the results.
Only read the circled presumptive Salmonella colonies (See Table 4):
Table 4: Interpretation of 3M Petrifilm SALX System:
Colony Color
Green to Blue
Blue to Dark Blue
Black
Biochemical
Confirmation Result
Biochemically
Confirmed +
✓
Biochemically
Confirmed +
✓
✓
Biochemically
Confirmed +
Biochemically confirmed positive results:
• Colonies that are green to blue, blue to dark blue, or black or have a blue precipitate around them are biochemically
confirmed positive for Salmonella species.
Biochemically confirmed negative results:
• Colonies that remain the same red, dark red or brown color without a blue precipitate are negative for Salmonella
species.
8
EN (English)
7.
Colonies may be subcultured for further identification. When subculturing, wear appropriate protective apparel and
follow standard good laboratory safety practices (GLP)2.
a.
Lift the top film and aseptically remove the colony either from the gel or the 3M Petrifilm SALX Confirmation
Disk. If a 3M Petrifilm SALX Confirmation Disk is covering the gel, aseptically peel the disk away and then
aseptically remove the colony from the gel.
b. Streak the colony per appropriate reference method6, 7, 8.
8. If the colonies cannot be subcultured within 1 hour of plate removal from the incubator, then store the 3M Petrifilm
SALX Plates for later analysis by placing in a sealed plastic bag at -20 to -10°C for no longer than 72 hours in the
dark. Allow 3M Petrifilm SALX Plates to warm to room temperature (20-25°C / <60% RH) before continuing
subculturing for identification.
9. After the test is complete, dispose of the 3M Petrifilm SALX Plates and 3M Petrifilm SALX Confirmation Disks in
accordance with current industry standards and/or local regulations.
For further information refer to the 3M™ Petrifilm™ Salmonella Express System “Interpretation Guide.” If you have
questions about specific applications or procedures, please visit our website at www.3M.com/foodsafety or contact
your local 3M representative or distributor.
References
1.
McDonough P.L, et al. (2000). Diagnostic and Public Health Dilemma of Lactose-Fermenting Salmonella enterica
Serotype Typhimurium in Cattle in the Northeastern United States. J. Clin. Microbiol. 38:1221-1226.
2. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice for
Nonclinical Laboratory Studies.
3. ISO/IEC 17025:2017. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
4. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiological
examinations.
5. ISO 18593:2004. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal methods for sampling techniques
from surfaces using contact plates and swabs.
6. US Food and Drug Administration Bacteriological Analytical Manual. Chapter 5 Salmonella.
7.
US Department of Agriculture (USDA) Microbiology Laboratory Guidebook 4.09. Isolation and Identification of
Salmonella from Meat, Poultry, Pasteurized Egg, and Siluriformes (Fish) Products and Carcass and Environmental
Sponges.
8. ISO 6579-1:2017. Microbiology of the food chain – Horizontal method for the detection, enumeration and serotyping
of Salmonella – Part 1: Detection of Salmonella spp.
Refer to the current versions of the standard methods listed above.
Explanation of Symbols
www.3M.com/foodsafety/symbols
9
EN (English)
Figure A.
Figure B.
Figure C.
Figure D.
Figure E.
Figure F.
Figure G.
Figure H.
Figure I.
Figure J.
Figure K.
10
3M Food Safety
3M United States
3M Center
Bldg. 275-5W-05
St. Paul, MN 55144-1000
USA
1-800-328-6553
3M Europe and MEA
3M Deutschland GmbH
Carl-Schurz-Strasse 1
D41453 Neuss/Germany
+49-2131-14-3000
1-800-563-2921
3M United Kingdom PLC
Morley Street, Loughborough
Leicestershire
LE11 1EP
United Kingdom
+(44) 1509 611 611
3M Latin America
3M Center
Bldg. 275-5W-05
St. Paul, MN 55144-1000
USA
1-954-340-8263
3M Österreich GmbH
Euro Plaza
Gebaude J, A-1120 Wien
Kranichberggasse 4
Austria
+(43) 1 86 686-0
3M Canada
Post Office Box 5757
London, Ontario N6A 4T1
Canada
3M Asia Pacific
No 1, Yishun Avenue 7
Singapore, 768923
65-64508869
3M Japan
3M Health Care Limited
6-7-29, Kita-Shinagawa
Shinagawa-ku, Tokyo
141-8684 Japan
81-570-011-321
3M Australia
Bldg A, 1 Rivett Road
North Ryde, NSW 2113
Australia
61 1300 363 878
3
3M Health Care
2510 Conway Ave
St. Paul, MN 55144 USA
www.3M.com/foodsafety
© 2018, 3M. All rights reserved.
3M and Petrifilm are trademarks of 3M. Used under license in Canada.
34-8722-5979-0
ES (Español)
Fecha de emisión: 2018-03
Instrucciones del Producto
Sistema Salmonella Express
Descripción del producto y uso previsto
El Sistema 3M™ Petrifilm™ Salmonella Express (SALX) se utiliza para la detección cualitativa rápida y la confirmación
bioquímica de especies de Salmonella en muestras ambientales de alimentos enriquecidos y del proceso de
alimentación. El Sistema 3M Petrifilm SALX consiste en la Base enriquecida de 3M™ Salmonella, el Suplemento
enriquecido de 3M™ Salmonella, la Placa 3M™ Petrifilm™ Salmonella Express (SALX) y el Disco de Confirmación
3M™ Petrifilm™ Salmonella Express (SALX), que están todos envasados por separado.
La Placa 3M Petrifilm SALX es un sistema de medio de cultivo cromogénico de muestra lista para usar que contiene un
agente gelificante soluble en agua fría y es selectivo y diferencial para la Salmonella, lo que proporciona un resultado
presunto. El Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX contiene un sustrato bioquímico que facilita la confirmación
biológica de organismos de Salmonella.
La Placa 3M Petrifilm SALX se utiliza con o sin el Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX. El Disco de Confirmación
3M Petrifilm SALX se puede utilizar solo en conjunto con la Placa 3M Petrifilm SALX.
El Sistema 3M Petrifilm SALX está previsto para el uso en laboratorios por profesionales capacitados en el empleo de
técnicas de laboratorio. 3M no documentó el uso de este producto en otras industrias que no sean la alimentaria. Por
ejemplo, 3M no documentó este producto para el análisis de muestras de agua, farmacéuticas, cosméticas, clínicas o
veterinarias. El Sistema 3M Petrifilm SALX no ha sido evaluado con todos los posibles productos alimenticios, procesos
alimenticios y entornos de procesamiento de alimentos, protocolos de prueba ni con todas las cepas de bacterias
posibles, y puede que no detecte todas las cepas de Salmonella. 3M no ha validado el Sistema 3M Petrifilm SALX
utilizando muestras compuestas.
Como con todos los métodos de prueba, la formulación del medio de enriquecimiento puede influir en los resultados.
La Placa 3M Petrifilm SALX solo ha sido evaluada para utilizar con la Base de enriquecimiento 3M Salmonella, el
Suplemento de enriquecimiento 3M Salmonella y con el caldo Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) (la formulación típica
del caldo R-V R10 que aparece a continuación):
Fórmula típica
Cloruro magnésico (anhidro)
Cloruro de sodio
Peptona caseína
Fosfato monopotasio
Verde de malaquita
Agua desmineralizada
pH 5,1 ± 0,2 @ 25 °C
13,4 gramos
7,2 gramos
4,54 gramos
1,45 gramos
0,036 gramos
1000,0 mL
Ajuste el PH según sea necesario para reunir los estándares de rendimiento.
Los componentes de la Placa 3M Petrifilm SALX y el Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX están descontaminados,
aunque no esterilizados. 3M Food Safety cuenta con certificación de la Organización Internacional para la
Estandarización (ISO) 9001 de diseño y fabricación. La Placa 3M Petrifilm SALX y el Disco de Confirmación 3M Petrifilm
SALX no han sido evaluados con todos los productos alimenticios, procesos alimenticios, protocolos de prueba posibles,
ni con todas las posibles cepas de microorganismos.
Seguridad
El usuario debe leer, comprender y respetar toda la información de seguridad que se incluye en las instrucciones del
Sistema 3M Petrifilm SALX. Guarde las instrucciones de seguridad para consultas futuras.
ADVERTENCIA:
ATENCIÓN:
Indica una situación peligrosa que, si no se evita, podría ocasionar la muerte o lesiones graves,
y/o daños materiales.
Indica una situación potencialmente peligrosa que, si no se evita, podría ocasionar
daños materiales.
1
ES (Español)
W ADVERTENCIA
No utilice el Sistema 3M Petrifilm SALX para diagnosticar enfermedades de humanos o animales.
El Sistema 3M Petrifilm SALX no diferenciará de manera específica algunos casos de Salmonella sp. lactosa positiva
(principalmente S. arizonae y S. diarizonae) de otros organismos de lactosa positiva. Las cepas de Salmonella lactosa
positiva aparecerán como no-Salmonella (colonias azules, colonias verdes, colonias azules a verdes o colonias
negras con o sin zonas amarillas o burbujas de gas asociadas). Se ha establecido que estas cepas significan menos
del 1 % del total de los estereotipos de Salmonella1.
El usuario debe capacitar a su personal en las técnicas de evaluación adecuadas, por ejemplo, las Buenas Prácticas
de Laboratorio2 o ISO 170253 o ISO 72184.
Para reducir los riesgos asociados con un resultado falso negativo que provoque la liberación de productos
contaminados o la posibilidad de resultados falsos positivos que necesiten una nueva prueba:
• Luego del uso de cada placa, controle que la Placa 3M Petrifilm Salmonella Express hidratada en busca de alguna
decoloración del gel.
• No utilice la Placa 3M Petrifilm Salmonella Express con alguna decoloración.
• Utilice siempre el Sistema 3M Petrifilm SALX antes de la fecha de vencimiento.
• Utilice el Sistema 3M Petrifilm SALX con muestras de alimentos y muestras ambientales del proceso alimenticio que
hayan sido validadas por el usuario o por un tercero.
• Utilice el Sistema 3M Petrifilm SALX solo con superficies, soluciones amortiguadoras neutralizantes y protocolos
que hayan sido validados por el usuario o por un tercero.
• Almacene el Sistema 3M Petrifilm SALX como se indica en el embalaje y en las instrucciones del producto.
• Siga los procedimientos y realice las pruebas exactamente como se indica en las instrucciones del producto.
• Utilice siempre un marcador permanente de punta ultrafina para encerrar las colonias de Salmonella presuntas
características en la superficie de la película colocando antes el Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX sobre
el gel.
Para reducir los riesgos asociados con la exposición a productos químicos y riesgos biológicos:
• Realice las pruebas de patógenos en un laboratorio debidamente equipado, bajo la supervisión de
personal capacitado.
• Siempre proceda de acuerdo con las prácticas estándar de seguridad del laboratorio (GLP)2, lo que incluye usar
procedimientos de contención correctos, ropa de protección adecuada y protección para los ojos al manipular los
materiales de prueba y las muestras de la prueba.
• Evite el contacto directo con los contenidos del medio enriquecido y las placas inoculadas.
• Deseche el medio enriquecido y las placas inoculadas según todas las normativas regulatorias y gubernamentales,
y usando los procedimientos de laboratorio correspondientes.
• Utilice ropa de protección adecuada al manipular la Placa 3M Petrifilm SALX, ya que algunos de los componentes
pueden ser alergénicos e irritantes para algunas personas.
Para reducir los riesgos relacionados con la contaminación ambiental:
• Proceda de acuerdo con las normas de la industria y la normativa local actuales para el desecho de
residuos contaminados.
ATENCIÓN
El Sistema 3M Petrifilm SALX no diferencia ninguna cepa de Salmonella de otra.
Consulte la Hoja de Datos de Seguridad para obtener más información.
Si desea obtener información sobre la documentación del desempeño del producto, visite nuestro sitio web en
www.3M.com/foodsafety o comuníquese con su representante o distribuidor local de 3M.
Responsabilidad del usuario
Los usuarios son responsables de familiarizarse con las instrucciones e información del producto. Visite nuestro sitio
web en www.3M.com/foodsafety o póngase en contacto con su representante o distribuidor local de 3M para obtener
más información.
Al seleccionar un método de prueba, es importante reconocer que factores externos tales como los métodos de
muestreo, los protocolos de prueba, la preparación de la muestra, la manipulación y la técnica de laboratorio pueden
afectar los resultados.
2
ES (Español)
Al seleccionar cualquier método de prueba o producto, es responsabilidad del usuario evaluar un número suficiente de
muestras con retos microbianos y matrices apropiadas para satisfacer al usuario en cuanto a que el método de prueba
cumple con los criterios necesarios.
Además, es responsabilidad del usuario determinar que cualquier método de prueba y sus resultados cumplen con los
requisitos de sus clientes y proveedores.
Como sucede con cualquier método de prueba, los resultados obtenidos del uso de cualquier producto de
3M Food Safety no constituyen una garantía de calidad de las matrices ni de los procesos analizados.
Limitación de garantía/Recurso limitado
SALVO LO EXPRESAMENTE ESTIPULADO EN UNA SECCIÓN DE GARANTÍA LIMITADA O EN EL EMBALAJE DE
UN PRODUCTO ESPECÍFICO, 3M RENUNCIA A TODAS LAS GARANTÍAS EXPRESAS Y TÁCITAS INCLUIDA, ENTRE
OTRAS, CUALQUIER GARANTÍA DE COMERCIABILIDAD O IDONEIDAD PARA UN USO EN PARTICULAR. Si un
producto de 3M Food Safety es defectuoso, 3M o su distribuidor autorizado reemplazará el producto o reembolsará
el precio de compra del producto, a su elección. Estos son sus recursos exclusivos. Deberá notificar inmediatamente a
3M en un lapso de sesenta días a partir del descubrimiento de cualquier sospecha de defecto en un producto y devolver
dicho producto a 3M. Llame a Atención al Cliente (1-800-328-1671 en los EE. UU.) o a su representante oficial de
3M Food Safety para obtener una Autorización de devolución de productos.
Limitación de responsabilidad de 3M
3M NO SERÁ RESPONSABLE DE NINGUNA PÉRDIDA O DAÑO, YA SEA DIRECTO, INDIRECTO, ESPECIAL,
DAÑOS ACCIDENTALES O CONSECUENCIAS, INCLUIDOS ENTRE OTROS, LA PÉRDIDA DE BENEFICIOS. En
ningún caso la responsabilidad de 3M conforme a ninguna teoría legal excederá el precio de compra del producto
supuestamente defectuoso.
Almacenamiento
Almacenamiento de la placa
Luego de la recepción, almacene las bolsas de Placa 3M Petrifilm SALX cerradas en un ambiente de 2 a 8 ºC. Son
sensibles a la humedad y la luz. Antes de usarlas, deje que las bolsas cerradas alcancen la temperatura ambiente antes
de abrirlas (20 °C-25 °C / <60 % de humedad relativa). Vuelva a colocar las Placas 3M Petrifilm SALX que no haya
usado en la bolsa. Para evitar la exposición a la humedad, almacene las bolsas de Placa 3M Petrifilm SALX abiertas en
una bolsa sellada, protegida contra la luz, en un ambiente de -20 °C a -10 °C durante no más de 4 semanas.
Almacenamiento del Disco de confirmación
Los Discos de Confirmación 3M Petrifilm SALX están embalados por separado dentro de una bolsa de aluminio. Son
sensibles a la humedad y la luz. Almacene las bolsas cerradas de los Discos de Confirmación 3M Petrifilm SALX en un
ambiente de 2 ºC a 8 ºC. Saque solo los Discos de Confirmación 3M Petrifilm SALX embalados por separado que se
utilizarán inmediatamente y almacene los Discos de Confirmación 3M Petrifilm SALX restantes en la bolsa de aluminio
doblando el extremo de la bosa y colocando cinta adhesiva. Para evitar la exposición a la humedad, no refrigere las
bolsas abiertas del Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX. Almacene las bolsas reselladas en un lugar frío
(20 °C-25 °C) y seco (menos del 60 % de humedad relativa) durante no más de 4 semanas o coloque las bolsas
reselladas en una bolsa de almacenamiento resellable y almacene en un ambiente de -20 °C a -10 °C durante no más de
5 meses.
No use las Placas 3M Petrifilm SALX que presenten decoloración después de la hidratación. No use los Discos de
Confirmación 3M Petrifilm SALX que presenten decoloración. La fecha de vencimiento y el número de lote figuran en
cada paquete de Placas 3M Petrifilm SALX y Discos de Confirmación 3M Petrifilm SALX. El número de lote también se
anota en las placas individuales y en los paquetes de discos de confirmación individuales.
Desecho
Después del uso, las Placas 3M Petrifilm SALX y los Discos de Confirmación 3M Petrifilm SALX que pueden representar
un posible riesgo biológico. Proceda de acuerdo con las normas de la industria y la normativa local actuales para el
desecho de residuos contaminados. Consulte la Hoja de Datos de Seguridad para obtener más información.
Instrucciones de uso
Siga todas las instrucciones atentamente. De lo contrario, los resultados obtenidos podrían llegar a ser incorrectos.
Use la ropa de protección adecuada y respete las buenas prácticas de seguridad de laboratorio (GLP) estándares2.
3
ES (Español)
Enriquecimiento de la muestra
Alimentos
Las tablas 1 y 2 ofrecen orientación para las muestras matrices de prueba. Es responsabilidad del usuario validar
protocolos de muestreo (p. ej., composición) o proporciones de dilución alternativos para garantizar que este método de
prueba satisface los criterios del usuario.
Para los alimentos de baja carga microbiana:
Los alimentos de baja carga microbiana tienen un recuento total de colonias de bacterias aerobias de f ≤ 104 que forma
unidades/gramos. Los ejemplos incluyen alimentos pasteurizados, cocidos o procesados.
1.
Base enriquecida 3M Salmonella precalentada con Suplemento enriquecido 3M Salmonella de 41,5 ± 1,0 °C
(Consulte las Tablas 1 y 2).
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Para todas las muestras con alto contenido
de partículas y carne, se recomienda utilizar bolsas con filtro Stomacher. Homogenice bien durante 2 minutos.
Encube a 41,5 °C ± 1,0 °C durante 18-24 horas (consulte las Tablas 1 y 2).
Para los alimentos de alta carga microbiana:
Los alimentos de alta carga microbiana tienen un recuento total de colonias de bacterias aerobias de > 104 colonias
que forman unidades/gramos y requiere el uso de caldo Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10). Los ejemplos incluyen
alimentos crudos, no procesados.
1.
Base enriquecida 3M Salmonella precalentada con Suplemento enriquecido 3M Salmonella de 41,5 ± 1,0 °C
(Consulte las Tablas 1 y 2).
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Para todas las muestras con alto contenido
de partículas y carne, se recomienda utilizar bolsas con filtro Stomacher. Homogenice bien durante 2 minutos.
Encube a 41,5 °C ± 1,0 °C durante 18-24 horas (consulte las Tablas 1 y 2).
3. Después de la primera incubación enriquecida, transfiera 0,1 mL del enriquecimiento principal a 10,0 mL de caldo
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10). Incube a una temperatura de 41,5 °C ± 1,0 °C durante 8-24 horas.
Muestras ambientales
Para la recolección de muestras, utilice una esponja de celulosa libre de biocidas hidratada con el caldo neutralizante
Dey-Engley (D/E). Siguiendo los procedimientos establecidos para el usuario, quite cualquier residuo de caldo
neutralizante D/E restante de la superficie muestreada.
El tamaño recomendado del área de muestra para verificar la presencia o ausencia del patógeno en la superficie es de
100 cm2 (10 cm x 10 cm o 4 in. x 4 in.)5. Cuando se extraiga la muestra con una esponja, cubra toda el área moviéndose
en dos direcciones (de izquierda a derecha y luego de arriba a abajo).
1.
Base enriquecida 3M Salmonella precalentada con Suplemento enriquecido 3M Salmonella de 41,5 ± 1,0 °C
(Consulte las Tablas 1 y 2).
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Mezcle bien. Incube a una temperatura de
41,5 °C ± 1,0 °C durante 18-24 horas.
3. Si la muestra ambiental contiene una carga microbiana alta (conteo total de colonias de bacterias aerobias de
> 104 colonias que forman unidades/muestra), después de la primera incubación enriquecida, transfiera 0,1 mL del
enriquecimiento principal a 10,0 mL de caldo Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10). Incube a una temperatura de
41,5 °C ± 1,0 °C durante 8-24 horas.
4. Si la muestra ambiental contiene una carga microbiana baja (conteo total de colonias de bacterias aerobias de
≤ 104 colonias que forman unidades/muestras), se puede saltear el paso 3.
4
ES (Español)
AOAC® Official Method of AnalysisSM (OMA) 2014.01
AOAC® Performance TestedSM (PTM) Certificado 061301
En los estudios de AOAC Research Institute OMASM y PTMSM, se descubrió que el Sistema 3M Petrifilm SALX era un
método efectivo para la detección de Salmonella. Las matrices evaluadas en estos estudios se muestran en la Tabla 1. El
límite de detección del método del Sistema 3M Petrifilm SALX es de 1-5 colonias que forman unidades por tamaño de
parte de prueba validada (en la Tabla 1).
Tabla 1: Protocolos de Enriquecimiento de la muestra según AOAC OMASM 2014.01 y AOAC PTMSM Certificado 061301
Alta
cara
micro‑
biana
Enriquecimiento primario
Tamaño
de la
muestra
Medio de
enriqueci‑
miento
Tempe‑
ratura
(± 1,0 °C)
Tiempo de
enriqueci‑
miento
(horas)
225
Caldo
R-V R10:
0,1 mL en
10,0 mL
41,5
8-24
25 g
225
Caldo
R-V R10:
0,1 mL en
10,0 mL
41,5
8-24
Huevo entero
líquido
pasteurizado
100 g
900
Comida seca
para perros
375 g
3375
Matriz
de prueba
Carne de res
molida cruda,
carne de
cerdo molida
cruda, carne
de pollo
molida cruda
Camarones
congelados,
sin cocinar
Racimo de
espinaca
fresca
✓
✓
✓
25 g
Volumen de
enriqueci‑
miento (mL)
25 g
225
Ambiental:
superficie
de acero
inoxidable
(tamaño de
la muestra
100 cm2)
1 esponja
225
Pollo
empanizado
cocido
25 g
Temperatura
(± 1,0 °C)
Tiempo de
enriqueci‑
miento
(horas)
Enriquecimiento secundario
No se requiere para los alimentos de
baja carca microbiana.
41,5
18-24
No se requiere para los alimentos de
baja carca microbiana.
Caldo
R-V R10:
0,1 mL en
10,0 mL
41,5
24
No se requiere para las muestras de
baja carga microbiana.
225
5
ES (Español)
Para otras matrices:
Tabla 2: Protocolos Enriquecimiento de la muestra
Matriz
de prueba
Alimentos:
Carne
cruda,
carne
de ave,
mariscos
y pescado
Alta
cara
micro‑
biana
✓
Alimento
para
animales
Enriquecimiento primario
Tamaño
de la
muestra
Tiempo de
Volumen de
Medio de
Temperatura enriqueci‑
Temperatura
enriqueci‑
enriqueci‑
(± 1,0 °C)
miento
(± 1,0 °C)
miento (mL)
miento
(horas)
25 g
225
375 g
3375
No se requiere para los alimentos de baja
carca microbiana.
41,5
✓
25 g
225
Ambiental
*
1 esponja
225
*
Tiempo de
enriqueci‑
miento
(horas)
Caldo
R-V R10:
0,1 mL en
10,0 mL
Alimentos:
Producto
Otros
alimentos
Enriquecimiento secundario
18-24
Siga el método de
referencia adecuado
para el tamaño de la
muestra y el volumen
de enriquecimiento
Caldo
R-V R10:
0,1 mL en
10,0 mL
41,5
41,5
8-24
8-24
No se requiere para las muestras de baja
carga microbiana.
* Algunas muestras ambientales y de otros alimentos pueden tener una carga microbiana alta y requieren del uso de
enriquecimiento secundario R-V R10.
Hidratación de placas
1. Use los diluyentes estériles prescritos para hidratar las Placas 3M Petrifilm SALX:
Diluyente fosfato de Butterfield, agua destillada o agua por ósmosis inversa.
2. Coloque la Placa 3M Petrifilm SALX sobre una superficie nivelada y plana (figura A).
3. Levante la película superior y, con la pipeta en posición perpendicular, distribuya 2,0 mL ± 0,1 mL de diluyente
estéril en el centro de la película inferior (figura B). No cierre la película superior antes de dispensar el volumen total
de 2,0 mL.
4. Desenrolle suavemente la película superior sobre el diluyente para evitar que se formen burbujas de aire (figura C).
5. Coloque el 3M™ Petrifilm™ Difusor Plano (N.º de catálogo 6425) en el centro de la Placa. Presione ligeramente
el centro del difusor para distribuir el diluyente de manera uniforme. Esparza el diluyente por toda el área de
crecimiento de la Placa 3M Petrifilm SALX antes de que se forme el gel. No deslice el difusor a través de la
película (figura D).
6. Quite el difusor y no interrumpa la Placa 3M Petrifilm SALX durante, al menos, 1 minuto.
7.
Coloque la Placa 3M Petrifilm SALX en una superficie plana durante, al menos, 1 hora a temperatura ambiente
(20 °C-25 °C / <60 % de humedad relativa), protegida contra la luz, para dejar que se forme el gel. Las Placas
3M Petrifilm SALX hidratadas se pueden almacenar a temperatura ambiente (20 °C-25 °C / <60 % de
humedad relativa) protegidas contra la luz durante hasta 8 horas antes del uso. Si las Placas 3M Petrifilm SALX
hidratadas no se usarán dentro de las 8 horas, almacénelas en una bolsa plástica sellada. Proteja las Placas
3M Petrifilm SALX contra la luz y almacénelas en un ambiente de -20 °C a -10 °C durante hasta 5 días.
8. Después de que se quiten las Placas 3M Petrifilm SALX del almacenamiento, deje que alcancen la temperatura
ambiente antes del uso.
6
ES (Español)
Inoculación de placas
1. Quite el medio de enriquecimiento de la incubadora y agite los contenidos a mano.
2. Use un asa esterilizada de 10 µL (3 mm de diámetro) para retirar cada muestra. Use un asa lisa (una que no tenga
bordes irregulares o torcidos) para evitar que se quiebre la superficie del gel.
3. Abra la Placa 3M Petrifilm SALX y páselo por el gel (figura E). Realice una pasada única para obtener colonias
aisladas (figura 1).
Inicio
Final
Figura 1: Patrón de rayado en la Placa 3M Petrifilm SALX
4. Desenrolle la película superior para cerrar la Placa 3M Petrifilm SALX.
5. Usando la mano con guante (mientras ejercita buenas prácticas de laboratorio para evitar la contaminación cruzada
o el contacto directo con la placa), aplique suavemente un movimiento amplio con presión uniforme sobre la
película superior para eliminar cualquier burbuja de aire de la zona de inoculación (figura F).
Incubación de placas
Incube las Placas a 41,5 ± 1,0 °C durante 24 horas ± 2 horas en posición horizontal, con la parte coloreada hacia arriba,
en pilas de hasta 20 placas.
ttern_FS.aiInterpretación
1. Saque las Placas 3M Petrifilm SALX de la incubadora y proceda con la lectura visual de los resultados.
This artwork has been
2. Usar luz interior indirecta puede mejorar
la lectura
delbycolor
created
as requested
3M. de la colonia, las zonas amarillas discretas y las
is responsible for the
burbujas de gas relacionadas con una3M
colonia.
artwork AS APPROVED and
3. Para la interpretación, examine visualmente
aisladas. Consulte la Tabla 3. No cuente las burbujas del
assumeslas
fullcolonias
responsibility
artefacto que puedan estar presentes.for its correctness.
4. Las especies de Salmonella presuntamente positivas son colonias de rojo a marrón con una zona amarilla o
burbujas de gas asociadas, o con ambas características (figura G). Una burbuja de gas asociada se define así por
estar ubicada dentro de la distancia del diámetro de una colonia desde la colonia (consulte la Tabla 3 que aparece
a continuación).
7
ES (Español)
Tabla 3: Interpretación de especies de Salmonella presuntamente positivas
Metabolismo de
la colonia
Color de la colonia
Rojo
Rojo
oscuro
Marrón
✓
Zona
amarilla
Resultado
Burbuja
de gas
✓
✓
✓
✓
✓
Presuntamente +
✓
Presuntamente +
✓
Presuntamente +
✓
✓
✓
✓
✓
✓
Presuntamente +
✓
Presuntamente +
✓
✓
✓
Presuntamente +
✓
Presuntamente +
✓
Presuntamente +
✓
Presuntamente +
Especies de no-Salmonella (figura H):
• Las colonias azules, verdes, azules a verdes o negras con o sin una zona amarilla o con burbujas de gas asociadas se
consideran organismos de no-Salmonella.
• Las colonias rojas, rojo oscuro y marrones sin zona amarilla y sin gas asociado se consideran organismos
de no-Salmonella.
• Las colonias rojas, rojo oscuro y marrones con una zona magenta se consideran organismos de no-Salmonella.
Si no hay presentes colonias de Salmonella presuntamente positiva, los organismos de Salmonella no se detectaron en
la matriz.
Especies de Salmonella presunta:
Si hay presentes colonias de Salmonella presuntamente positiva, realice los siguientes pasos y continúe hasta el paso de
Confirmación bioquímica:
a. En la película superior de la Placa 3M Petrifilm SALX, encierre un mínimo de cinco colonias de Salmonella
presuntamente positiva (si están presentes) usando un marcador permanente de punta ultrafina (figura I).
b. Confirme bioquímicamente todos los resultados de Salmonella presuntamente positiva usando el Disco de
Confirmación 3M Petrifilm SALX. Consulte la sección de Confirmación bioquímica.
c.
Si las Placas 3M Petrifilm SALX no se pueden analizar dentro de 1 hora de la extracción de la incubadora,
encierre primero las colonias de almonella presuntas sobre la película superior usando un marcador
permanente de punta ultrafina y luego coloque las placas en una bolsa plástica sellada para un análisis
posterior. Proteja las Placas 3M Petrifilm SALX contra la luz y almacénelas en un ambiente de -20 °C a -10 °C
durante no más de 72 horas. Deje que las placas alcancen la temperatura ambiente (20 °C-25 °C / <60 % de
humedad relativa).
ADVERTENCIA: Para reducir los riesgos asociados con un resultado falso negativo que provoque la liberación de
productos contaminados y la posibilidad de resultados falsos positivos que requieran una nueva prueba, siempre use
un marcador permanente de punta ultrafina para encerrar las colonias de Salmonella presunta características en la
película superior de la Placa 3M Petrifilm SALX antes del almacenamiento adecuado de la placa o antes de colocar el
Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX sobre el gel.
Confirmación bioquímica
1.
Ejercite buenas prácticas de laboratorio para evitar la contaminación cruzada o el contacto directo con la
Placa 3M Petrifilm SALX o el Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX.
2. Saque de la bolsa un Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX embalado por separado y deje que alcance la
temperatura ambiente (20 °C-25 °C / <60 % de humedad relativa). Para sacar el Disco de Confirmación
3M Petrifilm SALX de su envoltorio individual, desprenda el envoltorio para exponer la solapa del Disco de
Confirmación 3M Petrifilm SALX, sujete la solapa y quite el Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX.
8
ES (Español)
3. Levante la película superior (con las colonias de Salmonella presunta ya encerradas) de la Placa 3M Petrifilm SALX
e inserte el Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX estirándolo sobre el gel para evitar atrapar burbujas de aire
(figura J). Cierre la Placa 3M Petrifilm SALX.
4. Usando la mano con guante, aplique suavemente un movimiento amplio con presión uniforme sobre la película
superior para eliminar cualquier burbuja de aire del área de inoculación y asegure un buen contacto entre el gel y el
Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX (figura K).
5. Incube el Sistema 3M Petrifilm SALX a 41,5 °C ± 1.0 °C durante 4 a 5 horas en posición horizontal, hacia arriba,
en pilas de no más de 20 placas.
6. Quite el Sistema 3M Petrifilm SALX de la incubadora y proceda con la lectura de los resultados.
Solo lea las colonias de Salmonella presuntas que se encerraron (consulte la Tabla 4):
Tabla 4: Interpretación del Sistema 3M Petrifilm SALX:
Color de la colonia
Verde a azul
Azul a azul oscuro
Negro
Resultado de
confirmación
bioquímica
Confirmado
bioquímicamente +
✓
Confirmado
bioquímicamente +
✓
✓
Confirmado
bioquímicamente +
Resultados positivos confirmados bioquímicamente:
• Las colonias de color verde a azul, azul a azul oscuro o negras, o que tienen un azul precipitado a su alrededor son
confirmadas bioquímicamente confirmadas como positivas para las especies de Salmonella.
Resultados negativos confirmados bioquímicamente:
• Las colonias que mantienen el mismo color rojo, rojo oscuro o marrón sin un azul precipitado son negativas para las
especies de Salmonella.
7.
Puede que las colonias se deban subcultivar para una mayor identificación. Cuando realice subcultivos, use la ropa
de protección adecuada y respete las buenas prácticas de seguridad de laboratorio (GLP) estándares2.
a.
Levante la película superior y quite de manera aséptica la colonia del gel o del Disco de Confirmación
3M Petrifilm SALX. Si un Disco de Confirmación 3M Petrifilm SALX está cubriendo el gel, desprenda el disco de
manera aséptica y quite la colonia del gel de manera también aséptica.
b. Raye la colonia según el método de referencia adecuado6, 7, 8.
8. Si las colonias no se pueden subcultivar dentro de 1 hora de haber quitado la placa de la incubadora, almacene
las Placas 3M Petrifilm SALX para un análisis posterior colocándolas en una bolsa plástica sellada en un ambiente
de -20 °C a -10 °C durante no más de 72 horas en la oscuridad. Deje que las Placas 3M Petrifilm SALX alcancen
la temperatura ambiente (20 °C-25 °C / <60 % de humedad relativa) antes de seguir con el subcultivo para
la identificación.
9. Después de que se haya completado la prueba, deseche las Placas 3M Petrifilm SALX y los Discos de Confirmación
3M Petrifilm SALX de acuerdo con los estándares de la industria o la normativa local.
Para obtener mayor información, consulte la "Guía de interpretación" del Sistema 3M™ Petrifilm™ Salmonella Express.
Si tiene preguntas acerca de los procedimientos o las aplicaciones específicas, visite nuestro sitio web en
www.3M.com/foodsafety o comuníquese con su representante o distribuidor local de 3M.
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ES (Español)
Referencias
1.
McDonough P.L, et al. (2000). Diagnostic and Public Health Dilemma of Lactose-Fermenting Salmonella enterica
Serotype Typhimurium in Cattle in the Northeastern United States. J. Clin. Microbiol. 38:1221-1226.
2. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice
for Nonclinical Laboratory Studies.
3. ISO/IEC 17025:2017. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
4. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for
microbiological examinations.
5. ISO 18593:2004. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal methods for sampling techniques
from surfaces using contact plates and swabs.
6. US Food and Drug Administration Bacteriological Analytical Manual. Chapter 5 Salmonella.
7.
US Department of Agriculture (USDA) Microbiology Laboratory Guidebook 4.09. Isolation and Identification
of Salmonella from Meat, Poultry, Pasteurized Egg, and Siluriformes (Fish) Products and Carcass and
Environmental Sponges.
8. ISO 6579-1:2017. Microbiology of the food chain – Horizontal method for the detection, enumeration and serotyping
of Salmonella – Part 1: Detection of Salmonella spp.
Consulte las versiones actuales de los métodos estándar enumerados anteriormente.
Explicación de los símbolos
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ES (Español)
Figura A.
Figura B.
Figura C.
Figura D.
Figura E.
Figura F.
Figura G.
Figura H.
Figura I.
Figura J.
Figura K.
11
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