HiSeq 4000 System Guide Translated into German (15066496 v01 DEU)

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HiSeq 4000 System Guide Translated into German (15066496 v01 DEU) | Manualzz

Einsetzen der Sequenzierungsfließzelle

Zu den Schritten zum Einsetzen der Cluster-Fließzelle für die Sequenzierung gehören das

Entfernen der zum Vorfüllen verwendeten Fließzelle, das Reinigen des Fließzellenhalters, das Einsetzen der Cluster-Fließzelle sowie das Verifizieren des ordnungsgemäßen Flusses.

Entfernen der gebrauchten Fließzelle

1 Bewegen Sie den Fließzellenregler langsam in Position 1, um die Manifolds zu lösen.

Abbildung 11 Fließzellenregler in Position 1

2 Bewegen Sie den Fließzellenregler langsam in Position 0, um die Vakuumdichtung zu lösen und die Fließzelle freizugeben.

Abbildung 12 Fließzellenregler in Position 0

3 Heben Sie die gebrauchte Fließzelle aus der Halterung.

Reinigen des Fließzellenhalters

1 Ziehen Sie ein neues Paar ungepuderte Latexhandschuhe an.

2 Reinigen Sie die Oberfläche des Fließzellenhalters mit einem fusselfreien, mit Wasser in

Laborqualität befeuchteten Tuch, um Salze zu entfernen.

3 Reinigen Sie die Oberfläche des Fließzellenhalters mit einem Alkoholtupfer oder einem fusselfreien, mit Ethanol oder Isopropanol befeuchteten Tuch. Es darf kein Alkohol in die Vakuumöffnungen oder auf die Umgebung der Manifolds gelangen.

4 Trocken Sie den Tisch falls erforderlich mit einem fusselfreien Labortuch.

5 Unterziehen Sie den Fließzellenhalter einer Prüfung, um sicherzustellen, dass sich keine Fussel auf dem Halter befinden und die Vakuumöffnungen nicht blockiert werden.

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Material-Nr. 20000063

Dokument-Nr. 15066496 v01 DEU

Abbildung 13 Überprüfen der Vakuumöffnungen

Einsetzen der Sequenzierungsfließzelle

1 Legen Sie die Fließzelle so auf den Fließzellenhalter, dass die Einlass- und

Auslassanschlüsse nach unten weisen und der Barcode sich auf der rechten Seite befindet. Stellen Sie sicher, dass der Pfeil am linken Rand der Fließzelle, der die

Flussrichtung angibt, in Richtung Gerät zeigt.

2 Schieben Sie die Fließzelle vorsichtig bis zum Anschlag in Richtung der oberen und rechten Führungsstifte.

Abbildung 14 Fließzelle an oberen und rechten Führungsstiften ausgerichtet

A Oberer Führungsstift

B Rechte Führungsstifte

3 Nehmen Sie die Hand von der Fließzelle, um zu verhindern, dass im Laufe der Zeit eine Verschiebung der Ausrichtung auftritt.

4 Bewegen Sie den Fließzellenregler langsam in Position 1. Dadurch wird das Vakuum aktiviert und die Fließzelle wird in Position gehalten.

Wenn der Fließzellenregler grün blinkt, ist das Vakuum aktiviert. Falls der Regler nicht grün leuchtet, lesen Sie

Mögliche Probleme bei der Laufkonfiguration auf Seite 49

HiSeq 4000-Systemhandbuch

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Abbildung 15 Fließzellenregler in Position 1

5 Warten Sie fünf Sekunden, und bewegen Sie dann den Fließzellenregler langsam in

Position 2.

Wenn der Fließzellenregler dauerhaft grün leuchtet, ist ein Vakuum entstanden und die

Fließzelle ist einsatzbereit.

Abbildung 16 Fließzellenregler in Position 2

6 Stellen Sie sicher, dass das Kontrollkästchen Vacuum Engaged (Vakuum aktiviert) aktiviert ist und wählen Sie anschließend Next (Weiter).

Prüfen des Flusses

Bei der Überprüfung des Flusses wird auch festgestellt, ob die Fließzelle und die

Dichtungen ordnungsgemäß installiert sind und ein Vakuum entstanden ist.

1 Wählen Sie Lösung 5 aus der Dropdown-Liste.

2 Geben Sie die folgenden Standardwerte ein:

}

Volume (Volumen): 250

}

Aspirate Rate (Aspirationsrate): 250

} Dispense Rate (Zufuhrrate): 2000

3 Wählen Sie Pump (Pumpe).

4 Inspizieren Sie die Fließzelle auf Luftblasen, die die Lanes passieren, sowie auf

Undichtigkeiten in der Nähe der Manifolds.

5 Wenn eine erhöhte Anzahl an Luftblasen vorhanden ist, überprüfen Sie die Manifold-

Dichtungen auf Obstruktionen und wiederholen Sie den Vorgang mit Lösung 6, um zu verhindern, dass die Lösung an Position 5 aufgebraucht wird. Senken Sie die

Aspirationsrate auf 100 und pumpen Sie weitere 250 µl in die Fließzelle.

6 Wählen Sie Next (Weiter) aus.

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Material-Nr. 20000063

Dokument-Nr. 15066496 v01 DEU

7 Stellen Sie sicher, dass der Fließzellenregler grün leuchtet, und schließen Sie dann die

Tür der Fließzellenkammer.

8 Achten Sie darauf, dass die Kontrollkästchen Vacuum Engaged (Vakuum aktiviert) und Door Closed (Tür geschlossen) aktiviert sind, und wählen Sie Next (Weiter).

9 Wählen Sie Start (Start), um den Sequenzierungslauf zu starten.

HiSeq 4000-Systemhandbuch

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