岛津 LCMS 简易操作手册

LCMS 简易操作手册
1
前
言
感谢您选择岛津公司的液质联用仪 LCMS, 此本简易手册包括七
节内容，供您学习参考。学习 LCMS 之前，要求对高效液相色谱有一
定的了解和熟悉。更详细的软件功能及参数请参考软件说明书。
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目
第一节
LCMS 简易操作流程
第二节
完全开关机和日常开关机
第三节
系统配置
第四节
方法设置和进样分析
第五节
LCMSsolution 定量分析
第六节
LCMS 调谐操作
第七节
报告制作
录
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第一节：LCMS 简易操作流程
一 抽真空
1． 打开质谱右侧电源开关。
2． 打开计算机。
3． 打开 LC-MS 工作站，点击 instrument 1,进入 LCMS Real Time Analysis 界面。
4． 点击左侧 System Control 按钮，进入抽真空界面，点击 Auto startup,开始抽真空，直
到 Ready 指示灯由黄变绿。真正样品分析一般需要抽真空 8 小时以后才能进行。
以上步骤一般情况下不做，只有在卸真空后，重新开机时，才必须完成的步骤。
二 调谐 MS
1． 配备调谐液及调谐液流动相。
2． 连接好流路，ESI 源调谐时，前端可以连阻尼管。APCI 源调谐时，可以直接 PEEK 管连
接。
3. 进入 LCMS Real Time Analysis 界面，点击 Tuning，进入调谐界面。
4. 先保存调谐报告（File-Save Report as），而后点击 Fill up,气泡排干净。之后点击 Auto
Tuning 开始进行调谐。
4. 调谐完成，虚拟打印调谐报告成 PDF 格式，保存。
以上步骤一般情况下不做，只有长时间未用、重新开机或仪器经过大的调整时，才必须完成
的步骤。
三 联机
1．开机前打开氮气发生器。
2． 开泵、脱气机、系统控制器、柱温箱及 PDA 电源，点击 instrument 1,进入 LCMS Real Time
Analysis 界面。
3． 联机成功，显示 Ready；操作失败，显示 Not Connection。
四 建立分析方法
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1． 在 LCMS Real Time Analysis 界面，所有参数设置均在界面下半部分，如：MS、Interface，
Data Acquisition LC Time Prog. Pump Column Oven.分别设置各操作参数， 保存方
法文件。
2． 打开 Shutter（离子源旁边的杆往外拉）。
3． 打开放在质谱上的气压表，调节反吹气流量。
5． 点击泵、柱温箱、雾化气、PDA 灯及质谱加热模块等快捷键，使仪器进入工作转态。
6． 点击 Download，将方法文件加载到仪器上，这时如果仪器参数未到达设定值，右上方，
LC、PDA、 MS 显示 Not Ready，直到三参数都显示 Ready，可进样。
7． 点击 Single Start，出现对话框，输入样品名、进样瓶号、进样体积，并指定 Tuning File,
输入完毕，点击 OK.开始采集数据。
8． 数据采集完毕，停止，回到 Ready 状态。如数据采集过程中终止数据采集，点击 Stop，
停止采集数据，回到 Ready 状态。
五 数据处理
1． 在最初选择 instrument 1 的界面，进入 Postrun 界面，打开数据文件。
2． 击鼠标右键，出现一系列功能菜单，点击 Peak Intergation,设置积分参数，对指定峰
积分。当自动积分积不出来或积分位置不合理时，采用手动积分，点击 Manual Peak
Intergation for MIC/TIC，然后分别点击被积分峰的起始点和结束点，对指定峰积分。
3． 击鼠标右键，出现一系列功能菜单，点击 Properties，出现对话框，可修改谱图参数，
如颜色、背景等，也可选择各峰参数，使谱图显示峰面积、保留时间等。
4． 标准曲线制作（详细步骤查看 LCMSsolution 定量分析说明部分）。
(1) 打开所有相关数据文件，对谱图进行积分。
(2) 清空界面右下方的 Compound Table View 中的所有信息。
(3) 编辑 Compound Table，保存方法文件。也可通过 Wizard 快捷菜单编辑相关信息，
保存方法文件。
(4) 从 Batch Processing 中进入批处理表，编辑批处理表,表中第一行为最低浓度，
Level 依次递增，同浓度，Level 值相同。编辑完批处理表，保存批处理文件。
(5) 点击 Batch Start, 运行批处理。
(6) 打开 MS Cablibration 界面，运行 Load Method Parameters，加载方法文件，显
示标准曲线信息。
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5．未知样品分析
打开未知样品，运行 Load Method Parameters，加载方法文件，分析未知样品，其结
果显示在左下方的 Compound Table 中 Result 界面。
六 关机
1． 在 LCMS Real Time Analysis 界面，将泵、PDA 灯、质谱加热模块、柱温箱等关闭。等
Heater Block, CDL Temperature 等温度下降至 50℃时，将干燥气关闭。
2． 点击 Shutdown 进行日常关机。
3． 将 Shutter 关闭。
4． 关闭泵、柱温箱、PDA 和系统控制器电源开关，关闭氮气发生器电源开关。
5． 关计算机。
6． 真空机械泵，排气 10 分钟
注意事项：
1． 流动相需用高纯试剂，易挥发试剂，切勿用不挥发性无机盐。
2． 样品经 0.45µm 滤膜过滤。
3． 在没有分流阀情况下，ESI 源建议流速 0.2 mL/min；不超过 1.0 mL/min.
4． 平常质谱电源不关，关质谱电源前，先将真空卸载。方法如下：进入抽真空界面，点击
Auto shutdown.
5． 定时清洗离子源，尤其分析实际样品。
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第二节 完全开关机和日常开关机
岛津质谱仪器的开关机分两种情况：
1.
完全开关机（主要是真空启动和关闭）
2.
日常开关机（主要是其它部分，如气体，CDL，IG，HV 的开启和关闭）
完全开关机
打开仪器电源，
打开软件
点击 SYSTEM CONTROL
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点击 A uto Startup 开始抽真空，约 30MIN 后仪器会到 READY 状态，仪器面板 STATUS 灯
不闪，长亮。
如果需要完全关机，必须先点击 Auto Shutdown 关闭真空，约 20min 再关闭主机电源开关。
注：Vacuum Restart Mode 选项选择时，若停电后再来电会自动开始抽真空。否则，要重新
按上述方法开机。
特别注意：点 Advanced 后弹出下框，其中 Start Stop 键千万不能点击。
在此窗口, 鼠标移至 Maintenace pump unit 下方看泵工作时间, information oil 下方看油使
用时间。
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日常开关机：
一般情况下，在液相泵开始运行之前，最好先手动开启雾化气，CDL 和 HEATBLOCK 的温
度，然后再开启液相的输液泵。
关机，请直接关闭 LCMSsolution 软件窗口，软件会提醒您是否关闭液相的泵，还有质谱气
体，CDL 等等。
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第三节
系统配置
1．点击 SYSTEM CONFIGURATION
2.双击 INSTRUMENT(Communication setting)
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设置液相控制器类型（如：CBM20Alite），连接方式（Ethernet 或者 RS232C），IP 地址或者
串口号.
将左侧 System controller 选中，点击蓝色右箭头添加至 MODULE USED FOR
同样添加 MS
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然后点击 Autoconfiguration,
所有部件均自动配置上， 点击 OK 完成系统配置。
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第四节 方法设置和进样分析
1．点击 DATA ACQUISITIONI：
2 设置 instrument parameters: 选择 ADVANCED
MS 部分（MS 和 INTERFACE）:
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MS:
INTERFACE:
LC 部分：
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3．各部分均设置完成后保存方法.
点击 Download 下载参数。
然后点击 INSTRUMENT on，GAS, CDL, HEAT BLOCK, IG, HIGH VOLTAGE, 观察基线，
稳定后即可进样分析。
4．点击 SINGLE START:
或者建立批处理表 Batch, 批处理运行分析
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第五节 LCMS solution (Version 3.20)定量分析
1、 进入数据后处理软件 LCMSsolution PostRun，打开标准系列数据文件 Tutorial_Std01.lcd,
Tutorial_Std02.lcd,
Tutorial_Std03.lcd （ Sample\Guidedata 文 件 夹 ） 中 一 个 数 据
Tutorial_Std01.lcd。
2、 后处理软件 PostRun 右下方 Compound Table，Edit 模式下，清空表中内容
返回 View 模式；
3、从主菜单中 Qualitative---Peak Integration 设置合适的定性分析参数 Qualitative Parameter，
半 峰 宽
Width,
斜 率
Slope
值 等 积 分 参 数 ， 对 目 标 峰 积 分 ；
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4、对目标峰积分处理后，运行主菜单中 Qualitative---Register to Spectrum Process Table，将
积分结果登入 Spectrum Process Table。
在色谱中单击右键选择 Properties 项，显示 Chromatogram View Properties 界面如下，从中选
定在色谱图中标注的显示内容：如峰号 Peak #、保留时间 RT、峰面积值 Area 等；
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5、编辑 Compound Table：可以通过两种方式实现对 Compound Table 的编辑
A) 将校准曲线的信息直接输入 Compound Table：Edit 模式下，输入目标组份对应的保留时
间、质/荷比、标准系列的各级别浓度值等内容后返回 View 模式。从主菜单 File---Save
Method File As 将编辑的 Compound Table 内容载入与数据相关的方法文件 test.lcm；（如
果是内标法，选择内标峰的 Type 为 ISTD）
B) 另一种方式编辑 Compound Table 是通过 PostRun 的助手工具栏 Assistant Bar 中 Wizard
向导功能，以当前 Spectrum Process Table 的积分数据为基础，逐步引导完成的 Compound
Table 制作。编辑完成后与 A)相同，需从主菜单 File---Save Method File As 将编辑的
Compound Table 内容载入与数据相关的方法文件 test.lcm，具体步骤如下：
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6、批处理表编辑：
1) 从左边助手栏 Assistant Bar 中 Batch Processing 进入批处理功能，编辑批处理表
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2）在表中打开制作标准曲线用的所有数据（每一行打开一个数据），选择 Sample Type
为 Standard, 同时第一行设为 Initialize Calibration。设定方法文件（前一步保存的文件）
、浓
度级别（浓度由低到高的顺序依次为 1、2、3……，未知样品数据 Level 设为 0）等项，保
存批处理文件。
3）点击 Batch Start 运行该批处理文件，对标准系列进行计算。计算完毕后，在批处理
中的方法文件和数据文件中均包含了相应的标准曲线。
7. 标准曲线查看
打开方法文件 test.lcm, 查看标准曲线方程。若积分参数需调整，点击此时方法界面的助手
栏 Quantitative Parameters, 编辑合适参数后点击 Peak Integration for All Data
8、 根据上述校准曲线计算未知样品的浓度，打开未知浓度数据 unknown.lcd，主菜单
File---Load Method Parameters，调入包含校准曲线的方法文件 test.lcm；
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待测未知样品在校准曲线上的位置在下方定量分析(Quantitation View)窗口显示：
而未知样品浓度值可从 Compound Table---Results 项中或通过 Quantitative---Show Peak Table
方式在 Peak Table 中查到。
Compound Table---Results
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第六节 LCMS 调谐操作
1.
调谐前准备工作：
a)
管路连接，阻力管出口连接质谱阀 2 号位置，1 号位置连接 ESI 源液体进口，管路
连接尽量无死体积。
b)
用异丙醇冲洗流路，然后用 90％的乙腈冲洗流路（冲洗时候 ESI 源液体进口直接
放空至废液）
；
c)
Adjust sample（调谐液）放置于质谱抽液的位置。
2.
点击 TUNING，
3.
点击 FILL UP 排除管路的气泡，点击 START 开始吸，STOP 推（图 1）。结束后点 CLOSE。
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4.
对于 ESI 源，先要进行手动调谐（点击 MANUAL TUNING VIEW）
（ APCI 源，不需要
手动调谐，直接跳至 6）
，此时 SHUTTER 必须在 OPEN 位置。
开泵开气。
5.
点击 TUNING----ÆManual Tuning View，将谱图查看区改为 8 区，点击 Stand sample 送
调谐液，手动调节 ESI 源位置调节螺丝，至 520.4 峰（第 4 个框）最高为止（图 2）
。
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6.
点击 Start Auto Tuning 钮，开始自动调谐（图 3）。
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7.
查看打印出来报告，看是否符合标准，合格后必须保存此 TUNING file。
具体标准及其示例如下：
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8.
结束后必须用异丙醇擦或甲醇洗所有喷雾可能涉及表面，并且更换液体进质谱管路即可
测试样品。
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附：调谐液准备
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调谐液溶剂
(约 1L 按下列试剂准备):
甲醇(methanol)
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LC 用
500ml
离子交换水(ion exchange water)
500ml
乙腈( acetonitrile)
1ml
醋酸铵( ammonium acetate)
14.5mg
PEG 储备液
PEG 标准样品
PEG 200
15µL
PEG 600
20µL
PEG
150µL
1000
上述三种标样溶解于 100mL 调谐液溶剂，配制成 PEG 储备液
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调谐液的配制：
1mL PEG 储备液，用调谐液溶剂以 1/100 比例稀释储备液后，按 50mg/L 的浓度加入棉
子糖(Raffinose)
配置成最终调谐标准液 PEG Mix + Raffinose
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调谐流动相：
ESI：乙腈( acetonitrile)/水 = 9 : 1 (体积混合)
APCI：甲醇(methanol)/水 = 1 : 1
(体积混合)
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第七节
报告制作
1 点击进入 Report Format 界面
2 点击菜单 Item 选项，有 Common, General, LC/PDA Common, PDA, MS Items, Figure 等,根
据需要选中后在报告模板中拉出一框进行设定。
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3 通常报告格式为抬头 Sample information, 其次 Chromatogram, 最后数据结果表格。如下图
所示
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32
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